ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T18637—2018

代替

GB/T18637—2002

牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術規范

Technicalspecificationsfordiagnosisofbovineviraldiarrhea/mucosaldisease

2018-09-17發布2019-04-01實施

國家市場監督管理總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T18637—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準代替牛病毒性腹瀉粘膜病診斷技術除編輯性修改外主要技術變

GB/T18637—2002《/》,,

化如下

:

增加了臨床診斷方法見第章

———“”(4);

增加了實時熒光檢測見

———“RT-PCR”(5.4)。

本標準由中華人民共和國農業農村部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國獸醫藥品監察所中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局揚州大學中華人

:、、、

民共和國寧夏出入境檢驗檢疫局中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局中國動物衛生與流行病學

、、

中心

。

本標準主要起草人李俊平劉環印春生陶潔郝俊虎蒲靜范學政吳華偉孫淼王建華

:、、、、、、、、、、

宋建德朱國強

、。

本標準所代替標準的歷次版本發布情況為

:

———GB/T18637—2002。

Ⅰ

GB/T18637—2018

引言

牛病毒性腹瀉粘膜病簡稱是由牛病

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease,BVD/MD,BVD),

毒性腹瀉粘膜病病毒簡稱感染

/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus,BVD/MDV,BVDV)

牛引起的以發熱粘膜糜爛潰瘍白細胞減少腹瀉咳嗽及懷孕母牛流產或產出畸形胎兒為主要特征的

、、、、

一種傳染病在分類學上屬黃病毒科Flaviviridae瘟病毒屬Pestivirus是瘟病毒屬的代

。BVDV(),(),

表種目前國際病毒分類委員會確定的有二個基因型或種分別是和它

,BVDV(),BVDV-1BVDV-2。

們與同屬的豬瘟病毒及羊邊界病病毒

(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)(BorderDiseaseVirus,

之間存在著結構與抗原相關性在血清學上有部分交叉反應引起的疫病呈全球分布

BDV),。BVDV-1,

較為常見而引發的疫病不多見二個基因型的病毒均可根據其在培養細胞上能否產生細胞

,BVDV-2。

病變而被分為二個生物型即致細胞病變型和非致細胞病變型

,(Cytopathictype,CP)(Non-cytopathic

毒株是引起所有感染和發病類型的生物型而毒株主要出現在粘膜病病例

type,NCP)。NCP,CP。

目前該病在世界范圍內廣泛流行我國于年首次分離到了近年來病原學調查表明

,,1983BVDV。,

我國牛羊鹿豬等均不同程度的感染該病已嚴重影響著我國畜牧業的健康發展

、、、BVDV,。

本標準中所描述的方法均為近幾年我國在診斷過程中常用的方法包括臨床診斷病原學診

BVD,、

斷及血清學診斷技術血清學診斷技術為病毒中和試驗病原學診斷技術包括病毒分離鑒定和實時熒

。。

光檢測方法本標準中的檢測方法具有特異

RT-PCR(Real-timeRT-PCR),Real-timeRT-PCRBVDV

性能夠同時檢測和且能特異區分與

,BVDV-1BVDV-2,BVDVCSFV。

結合我國動物防疫相關法律法規和政策本標準能夠有效地診斷和監測我國的發生和

、,BVD/MD

流行

。

Ⅱ

GB/T18637—2018

牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術規范

1范圍

本標準規定了牛病毒性腹瀉粘膜病的流行病學臨床癥狀病理變化等臨床診斷及樣品采集與處

/、、,

理病毒分離與鑒定檢測及病毒中和試驗等實驗室診斷的技術要求和操作規范

、、Real-timeRT-PCR。

本標準適用于檢測不同樣品中的型和型牛病毒性腹瀉粘膜病病毒核酸及抗體水平

12/、。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

禽流感病毒通用熒光檢測方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

實驗室生物安全通用要求

GB19489

實驗室質量控制規范動物檢疫

GB/T27401

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

牛鼻甲骨細胞

BT:(BovineTurbinatecell)

牛病毒性腹瀉粘膜病

BVD/MD:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDisease)

牛病毒性腹瀉粘膜病病毒

BVD/MDV:/(BovineViralDiarrhea/MucosalDiseaseVirus)

致細胞病變效應

CPE:(CytopathicEffect)

致細胞病變型

CP:(Cytopathictype)

互補

cRNA:RNA(ComplementRNA)

每個反應管內的熒光信號量達到設定的閾值所經歷的循環數

Ct(Cp):(CycleThreshold,or

CrossingPoint)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(DiethylPyrocarbonate)

羧基熒光素

FAM:(Carboxyfluore