標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 18637-2002 牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)》這一國家標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)布于2002年，旨在為牛病毒性腹瀉和粘膜病的診斷提供一套統(tǒng)一的技術(shù)規(guī)范和方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細闡述了如何通過實驗室檢測手段來準(zhǔn)確識別和確認(rèn)這兩種疾病，確保獸醫(yī)診斷的準(zhǔn)確性和一致性，對于控制疾病傳播、保護畜牧業(yè)健康具有重要意義。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概覽：

  1. 范圍：標(biāo)準(zhǔn)明確了其適用范圍，即規(guī)定了牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）感染及由此引發(fā)的牛病毒性腹瀉/粘膜病的實驗室診斷方法和技術(shù)要求。

  2. 術(shù)語和定義：對牛病毒性腹瀉、粘膜病以及相關(guān)專業(yè)術(shù)語進行了明確界定，為標(biāo)準(zhǔn)的正確理解和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

  3. 診斷原則：概述了診斷應(yīng)遵循的基本原則，包括臨床觀察、流行病學(xué)調(diào)查與實驗室檢測相結(jié)合的方法，確保診斷的全面性和準(zhǔn)確性。

  4. 樣品采集與保存：詳細說明了應(yīng)采集哪些類型的樣本（如血液、組織、分泌物等），以及樣本的采集方法、保存條件和運輸要求，以保證樣本的有效性和檢測的可靠性。

  5. 實驗室檢測方法：

    • 病毒分離：描述了如何在特定細胞系中分離和培養(yǎng)BVDV，這是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。
    • 抗原檢測：介紹了直接檢測樣本中病毒抗原的方法，如免疫熒光試驗（IFT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等。
    • 抗體檢測：闡述了血清學(xué)方法，如病毒中和試驗、ELISA等，用于檢測動物體內(nèi)對BVDV的免疫反應(yīng)。
    • 分子生物學(xué)方法：包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及其衍生技術(shù)，如實時熒光定量PCR（qPCR），用于病毒核酸的快速、靈敏檢測。

  6. 結(jié)果判定與報告：規(guī)定了如何根據(jù)實驗結(jié)果進行診斷判定，包括陽性、陰性及可疑結(jié)果的定義，以及診斷報告的格式和內(nèi)容要求。

  7. 質(zhì)量控制：強調(diào)了實驗室檢測過程中質(zhì)量控制的重要性，包括內(nèi)部質(zhì)控、外部質(zhì)控及實驗室間比對，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。

  8. 安全防護：提供了在操作BVDV樣本時應(yīng)采取的安全措施和生物安全等級要求，以防止病毒的擴散和人員感染。


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  • 2002-02-19 頒布
  • 2002-05-01 實施
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文檔簡介

ICS.11.220B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18637—2002牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)DiagnostictechniquesforbovineViraldiarrhea/mucosaldisease2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華：人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18637-2002前牛病毒性腹瀉/粘膜病（bovineviraldiarrhea/mucosaldisease,BVD/MD)是由牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)引起的牛的一種以粘膜發(fā)炎、摩爛、壞死和腹瀉為特征的疾病。應(yīng)用微量血清中和試驗檢查BVD/MD抗體,具有其特殊意義,它不僅可以定性，而且還可以定量并從抗體量的動態(tài)變化中，可以判定病牛是以前感染過本病.還是現(xiàn)在正在感染過程中.從而為防治本病提供科學(xué)依據(jù)。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國獸藥監(jiān)察所、農(nóng)業(yè)部動物檢疫所本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：邵振華、鄭志剛

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18637-2002牛病毒性腹瀉/粘膜病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforbovineviraldiarrhea/mucosaldisease1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛病毒性腹瀉/粘膜病(BVD/MD)的診斷技術(shù)要求本標(biāo)準(zhǔn)適用于BVD/MD的流行病學(xué)調(diào)查和檢疫2定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。細胞玻片放置在萊頓氏(Leighton's)管或其他用作培養(yǎng)細胞的小瓶中，長有單層細胞的蓋玻片3BVD/MD病毒分離與鑒定3.1材料準(zhǔn)備3.1.1陽性參照毒林為牛粘膜病病毒俄勒岡毒株(OregonC.V)3.1.2BVD/MD熒光抗體(BVD/MD-FA)、陽性血清。3.1.3熒光顯微鏡：采用藍紫光為激發(fā)光的透射式或落射式熒光顯微鏡3.1.4牛(或胎牛)血清：無BVD/MD抗體和無污染3.1.5細胞培養(yǎng)瓶扁瓶、Leighton's管、0.17mm厚度的盞玻片(1.0cmX3.8cm或0.8cmX2.4cm),0.8mm～1.0mm厚的普通玻璃載片，帶蓋濕盒。3.1.6溶液配制：pH7.0～7.20.01mol/L磷酸鹽緩沖液·pH9.0～9.50.5mol/L碳酸緩沖甘油C見附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。3.1.7細胞培養(yǎng)液：見附錄B(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。3.1.8原代細胞培養(yǎng)物：見附錄C(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)3.2病毒分離3.2.1樣品的采集3.2.1.1對于牛群、種公牛的檢疫.無菌采血液或精液3.2.1.2對懷疑為急性感染期或持續(xù)感染的牛·采血或鼻分泌物。3.2.1.3對流產(chǎn)、死胎，采胎兒的組織。3.2.1.4對懷疑為死于粘膜病的牛，可采集血塊和各組織,尤其是腸道集合淋巴組織。如果腸道樣品已發(fā)生自溶，可采扁桃體或淋巴結(jié)，3.2.2樣品處理3.2.2.1血液用常規(guī)方法分離血清3.2.2.22凝血塊：凍融數(shù)次后·取析出的上清液(加入適量的雙抗即青鏈霉素)3.2.2.3組織樣品用含1000IU/mL

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