1、降壓物質(zhì)檢查法操作規(guī)程：1簡(jiǎn)述/本法系比較一定量的組織胺對(duì)照品與供試品引起麻醉貓血下降的程度，以確定供試品中降壓物質(zhì)的含量是否符合規(guī)定的一種方法。2實(shí)驗(yàn)材料及用具/天平精度或?qū)φ掌坊蚬┰嚻贩Q量用/精度1mg試劑稱用量/ 精度10g動(dòng)物稱重用/血壓記錄裝置 記錄儀、汞柱血壓計(jì)、壓力傳感器或記紋鼓、描記杠桿、汞柱 血壓計(jì)。實(shí)驗(yàn)用具 手術(shù)臺(tái)、注射器（1ml精度，5ml精度）吸管、移液管、容量瓶、 帶塞小瓶、安瓶、測(cè)量尺、三通開(kāi)關(guān)、脫脂棉、純、線。手術(shù)用器械 剪毛剪、手術(shù)剪、眼科直鑲、眼科彎鑲、手術(shù)刀、止血銀、氣管 插管、動(dòng)靜脈夾及插管。試劑 氯化鈉、苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、肝素鈉及其他試劑。3溶液配

2、制10%苯巴比妥鈉溶液 稱取苯巴比妥鈉適量，加水配成 10%液（必要時(shí)加熱 溶解）。5 5%戊巴比妥鈉溶液 稱取戊巴比妥鈉適量，加水配成 5%液（必要時(shí)加熱溶 解）。或用其他適當(dāng)濃度試劑。生理鹽水稱取氯化鈉適量，加水配成播液。肝素鈉溶液 稱取肝素鈉適量，乘以每毫克標(biāo)示效價(jià)單位，得肝素總單位數(shù)，加生理鹽水配成1000u/ml溶液。/對(duì)照品溶液取磷酸組織胺對(duì)照品，放置至室溫。割開(kāi)對(duì)照品小管，（注射勿使玻屑掉入）精密稱量磷酸組織按適量。將稱取的毫克數(shù)乘以，換算出組胺的實(shí)際重量（/mg）。加水將組胺溶解配成ml的對(duì)照品溶液，分裝于安瓶中，熔封，置48c保存用，在確保降壓活性符合要求的前提下，可在/3個(gè)

3、月內(nèi)使用。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，取出組按溶液，放置至室溫。割開(kāi)安瓶，精密量取組胺溶液適量，用生理鹽水配成ml的稀釋液。供試品溶液按中國(guó)藥典正文規(guī)定的劑量，配成適當(dāng)濃度的供試品溶液。實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般要求供試品溶液與對(duì)照品稀釋液的注入體積相等。4實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康無(wú)傷，體重2kg以上的貓，雌雄均可，雌者無(wú)孕。5檢定法 /麻醉動(dòng)物和手術(shù)5.1.1 將動(dòng)物稱重用注射器吸取10%f巴比妥鈉溶液（kg）和5%t巴比妥鈉（kg）混勻，腹腔 注射麻醉動(dòng)物。也可用其他麻醉藥品麻醉動(dòng)物。動(dòng)物麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上（動(dòng)物需保持體溫，必要時(shí)采取保溫措施）， 沿頸部正中線切開(kāi)，分離氣管，并插氣管插管，必要時(shí)可接人工呼吸機(jī)。分離一側(cè)頸動(dòng)

4、脈，剝離附著的脂肪組織和神經(jīng)，并在動(dòng)脈底下穿二根線，一線 靠遠(yuǎn)心端將動(dòng)脈結(jié)扎，近心端用動(dòng)脈夾夾住。分離一側(cè)股靜脈。6測(cè)壓裝置和記錄儀的調(diào)節(jié)（以壓力傳感器和記錄儀法操作步驟說(shuō)明）。將汞柱血壓計(jì)、動(dòng)脈插管、壓力傳感器與記錄儀連接好。用生理鹽水將壓力傳感器、汞柱血壓計(jì)和動(dòng)脈插管中的空氣排盡（每個(gè)連接處 必須牢固，不漏氣，如漏氣會(huì)影響血壓的測(cè)量）。接通記錄儀的電源靈敏度或基線的校正，用生理鹽水加壓，將汞柱血壓計(jì)液面升高到100mmHg調(diào)節(jié)記錄筆的振幅為合適高度或滿量程；將汞柱血壓計(jì)液面回到0時(shí)，記錄筆也 相應(yīng)回零點(diǎn)基線，反復(fù)數(shù)次調(diào)節(jié)使穩(wěn)定，并關(guān)上記錄筆，并將壓力換能器與泵柱 血壓計(jì)的通道關(guān)閉。在頸動(dòng)脈

5、上剪一小口,、插入動(dòng)脈插管，（或用12號(hào)短鈍針頭）/并用另一線結(jié)扎 固定插管與動(dòng)脈，使插管和動(dòng)脈處在自然狀態(tài)下， 避免使動(dòng)脈扭曲，影響血壓的 測(cè)量。打開(kāi)動(dòng)脈夾，從插管上的三通中注入 1000u/ml肝素溶液左右，以防液凝固堵 塞插管影響血壓測(cè)量。用生理鹽水將靜脈插管中的空氣排盡，在股靜脈上用針頭扎孔，插入靜脈插管，（或用頭皮針），固定插管，同時(shí)注射適量肝素溶液抗凝（不超過(guò)300U的肝素）， 手術(shù)全部完畢后，用少許脫脂棉蘸生理鹽水后覆蓋在動(dòng)、靜脈插管處。正常血壓值的測(cè)量接通記錄筆，走紙記錄正常血壓（適當(dāng)調(diào)節(jié)記錄筆的位置）。 / 7動(dòng)物靈敏度的測(cè)定/使記錄儀慢速走紙,按動(dòng)物體重從靜脈插管中注入組胺

6、對(duì)照品稀釋液pg/ml , / kg立即注 入適宜體積生理鹽水，將藥液沖入體內(nèi)，記錄血壓下降曲線。當(dāng)血壓回升恢復(fù)到基線時(shí)，使記錄儀慢速走紙，注入第二針對(duì)照品稀釋液以 g/kg, /kg,立即注入適宜體積的生理鹽水，將藥液沖入體內(nèi)，記錄血壓下降曲 線。血壓恢復(fù)正常值后，使記錄儀慢速走紙，注入第三針對(duì)照品稀釋液以g/kg, /kg,立即注入適宜體積的生理鹽水，將藥液沖入體內(nèi)，記錄血壓下降曲線。重復(fù)給藥2-3次。如kg劑量所致的血壓下降值均不小于 20mmHg同時(shí)相應(yīng)各劑量所致反應(yīng)的平 均值有差別，可認(rèn)為該動(dòng)物的靈敏度符合規(guī)定。靈敏度和給藥時(shí)，相鄰兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)保持一致， 每次給藥應(yīng)在前一次

7、反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。8給藥（按ds、dT、dds）順序給藥前記錄儀慢速走紙，按kg對(duì)照品稀釋液劑量（ds）經(jīng)靜脈插管給動(dòng)物注 入，并立即用適宜體積生理鹽水，將藥液沖入體內(nèi)，記錄血壓下降曲線。供試品按藥典正文中規(guī)定的劑量（dD給藥，方法同ds,給藥后記錄血壓曲線。同上進(jìn)行dT的第二次給藥，記錄血壓下降曲線。/同上進(jìn)行ds的第二次給藥，記錄血壓下降曲線。9結(jié)果判斷/測(cè)量每個(gè)劑量降低血壓的幅度。以第一與第三、第二與第四劑量所致的反應(yīng)分別比較。如dT所致的反應(yīng)值不大于ds所致的反應(yīng)值的一半，即認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì) 檢查符合規(guī)定，否則應(yīng)按上述次序繼續(xù)注射1組4個(gè)劑量，并按相同方法分別比 較兩組內(nèi)各對(duì)ds、dT劑量所致的反應(yīng)。如dT所致的反應(yīng)值均不大于ds所致的反 應(yīng)值，仍認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì)檢查符合規(guī)定。如dT所致的反應(yīng)值均大于ds所致的反應(yīng)值，即認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì)檢查不 符合規(guī)定，否則應(yīng)另取動(dòng)物復(fù)試，如復(fù)試的結(jié)果仍有 dT所致的反應(yīng)值大于ds所 致的反應(yīng)值，即認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì)檢查不符合規(guī)定。10注意事項(xiàng)/如需在同一只動(dòng)物上測(cè)定多個(gè)樣品時(shí)， 需再經(jīng)靈敏度檢查，如仍符合規(guī)定，方 可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以此類推動(dòng)物的麻醉 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)可單用戊巴比妥鈉溶液 4055