第十章

特殊環(huán)境中的微生物知識(shí)要點(diǎn)：醫(yī)院環(huán)境微生物的特點(diǎn)正常微生物群概念正常菌群生理作用微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室生境特征：公共場(chǎng)所定義及種類公共用品微生物檢測(cè)第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物

醫(yī)院感染的危害1、延長(zhǎng)病人住院日，增加患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)國(guó)內(nèi)統(tǒng)計(jì)醫(yī)院感染浪費(fèi)達(dá)50-100億人民幣/年。我國(guó)醫(yī)院感染發(fā)病率約為6～8％，美國(guó)每年發(fā)生醫(yī)院感染達(dá)2百萬例，6～9萬人因醫(yī)院感染死亡處理院內(nèi)感染費(fèi)用超過40億美金。2、醫(yī)院感染嚴(yán)重影響病人的預(yù)后與安危，甚至對(duì)醫(yī)院聲譽(yù)與社會(huì)安定均造成重大影響。一、醫(yī)院環(huán)境的生境特征1、醫(yī)院病人對(duì)病原微生物的抵抗力普遍較低一、醫(yī)院環(huán)境的生境特征2、醫(yī)院是病人高度聚集的場(chǎng)所一、醫(yī)院環(huán)境的生境特征3、各種診療手段在醫(yī)院中普遍應(yīng)用1.診療技術(shù)：(1)器官移植；手術(shù)創(chuàng)傷；術(shù)后免疫抑制劑的應(yīng)用。(2)血液透析或腹膜透析。2.侵入性檢查或治療(1)侵入性檢查：支氣管鏡、膀胱鏡、胃鏡 等檢查;(2)侵入性治療：氣管插管、導(dǎo)管及人工心 臟瓣膜等。3.損害免疫系統(tǒng):放療、化療、激素治療等

4.其他因素：抗菌素使用不當(dāng)；手術(shù)；住 院時(shí)間過長(zhǎng)等。一、醫(yī)院環(huán)境的生境特征3、各種診療手段在醫(yī)院中普遍應(yīng)用（一）醫(yī)院環(huán)境微生物的特點(diǎn)1、多數(shù)為正常菌群或條件致病菌正常菌群寄居于正常人體表及與外界相通的腔道中，對(duì)人體無害的微生物亦稱正常微生物群。其中以細(xì)菌為主，據(jù)統(tǒng)計(jì)健康成人約由1013個(gè)組織細(xì)胞組成，而人體表和腔道卻有1014個(gè)細(xì)菌，相當(dāng)人體細(xì)胞的10倍。醫(yī)院內(nèi)的感染有相當(dāng)一部分是它們引起的(二)分類：1.按生境分：(1)原籍菌（常住菌）：

相對(duì)固定，伴隨終生；密度高，免疫原性低。2)外籍菌(暫住菌)：

匆匆過客，流動(dòng)性大，有潛在致病性。(2.按關(guān)系分：(1)共生菌(symbioticflora):

與原籍菌有共生關(guān)系的細(xì)菌。 (2)寄生菌(parasitismflora):

與宿主有寄生關(guān)系的細(xì)菌。人體各部位的微生態(tài)系(一)口腔微生態(tài)系1.已發(fā)現(xiàn)細(xì)菌500多種；2.口腔鏈球菌為優(yōu)勢(shì)菌群，約占培養(yǎng)菌總數(shù) 的60%；3.口腔不同部位菌群分布不同；4.口腔菌群失調(diào)可引起多種口腔疾病。(二).食管與胃1.食管上部微生物群組與口腔接近，下部與胃接 近，食管中尚未發(fā)現(xiàn)原籍菌。2.胃內(nèi)原籍菌為乳桿菌、幽門螺桿菌和酵母菌。 幽門螺桿菌與胃炎、胃潰瘍及胃癌有關(guān)。(三).腸道1.量大：腸道微生物約占人體微生物總量的80%.2.細(xì)菌為主：占糞便重量的30-40%。3.厭氧菌居多：為需氧菌的100-1000倍。4.小腸生態(tài)系與大腸生態(tài)系：菌量至上而下逐漸 增多；

5.腸道正常微生物群的類型：①.致病性類型: 主要包括韋榮球菌、葡萄球菌、變形桿菌及假單胞菌。菌量少，病理情況下，可大量繁殖致病；②.互生類型： 主要包括雙歧桿菌、類桿菌等，數(shù)量多，對(duì)人體有益；③.中間類型： 主要包括乳桿菌、大腸桿菌、鏈球菌等，既有生理作用，也有病理作用。6.腸道內(nèi)正常菌群的調(diào)節(jié)機(jī)制：①胃酸的作用，多數(shù)細(xì)菌被殺滅;②腸蠕動(dòng)使大量細(xì)菌被排出；③腸道分泌物如膽酸、溶菌酶等可抑制細(xì) 菌生長(zhǎng)；

④微生物群相互作用保持平衡穩(wěn)定狀態(tài)。(四).陰道常駐菌主要為乳桿菌、腸桿菌、丙酸桿菌等，乳桿菌為優(yōu)勢(shì)菌群。陰道菌群失調(diào)——?dú)缛樗釛U菌，滋生霉菌(五).呼吸道①.有21個(gè)菌屬，200多種細(xì)菌，細(xì)菌類型相對(duì)穩(wěn)定;②.鼻腔液中以厭氧菌為最多，氣管和支氣管僅有少量細(xì)菌，細(xì)小支氣管以下部位無菌；③.呼吸道的正常菌群可刺激機(jī)體產(chǎn)生全身或局部特異性抗體，是機(jī)體重要的生物屏障。(六).皮膚常駐菌：表皮葡萄球菌、丙酸桿菌、類白 喉棒狀桿菌、銅綠假單胞菌等。非常駐菌：金黃色葡萄球菌、鏈球菌。

鼻咽腔

葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌

肺炎球菌、奈氏菌、類桿菌等

外耳道葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌綠膿桿菌、非致病性分枝桿菌表皮葡萄球菌

口腔甲，丙型鏈球菌

類白喉?xiàng)U菌、肺炎球菌奈氏菌、乳桿菌、梭桿菌螺旋體、放線菌、白念珠菌

腸道大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌綠膿桿菌、葡萄球菌、厭氧性細(xì)菌真菌、乳桿菌，雙歧桿菌等

陰道

大腸桿菌、乳桿菌

白念珠菌、類白喉?xiàng)U菌

非致病性分枝等

皮肽葡萄球菌、綠膿桿菌、白念珠菌丙酸桿菌、類白喉?xiàng)U菌、非致病性分枝桿菌人體各部位的微生態(tài)系

眼結(jié)膜白色葡萄球菌、干燥桿菌

尿道白色葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、非致病性分枝桿菌三.生理作用1.生物拮抗(antagonism)：抵抗外來致病菌，維持正常菌群內(nèi)部的平衡，保護(hù)機(jī)體免受感染；①.生物屏障作用：競(jìng)爭(zhēng)黏附，形成微菌落②.化學(xué)屏障作用：產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物，抑制其他細(xì)菌;③.營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)作用。2.營(yíng)養(yǎng)作用：參與機(jī)體代謝，產(chǎn)生維生素等供人吸收；3.免疫作用：促進(jìn)免疫器官發(fā)育，刺激免疫系統(tǒng)應(yīng)答；4.抗衰老作用：產(chǎn)生過氧化物歧化酶(SOD),清除自由基(O2-);5.抗腫瘤作用：①.產(chǎn)生自身抑癌產(chǎn)物；②.激活巨噬細(xì)胞等發(fā)揮免疫功能抑制腫瘤。

機(jī)會(huì)性感染細(xì)菌方面機(jī)體方面正常菌群/非致病菌條件致病菌？寄生部位改變菌群失調(diào)免疫功能下降（一）醫(yī)院環(huán)境微生物的特點(diǎn)1、多數(shù)為正常菌群或條件致病2、病原體對(duì)外界的抵抗力較強(qiáng)3、

耐藥菌或多重耐藥菌，如MRSA不僅對(duì)甲氧西林耐藥，而且對(duì)多種廣譜抗生素耐藥；4.新的病原體不斷出現(xiàn)，隨年代不同而發(fā)生變化。（一）醫(yī)院感染的概念與分類廣義：醫(yī)院感染(nosocomialinfection)

又稱醫(yī)院獲得性感染（hospital-acquiredinfection,HAI）是指任何人（住院患者、探視者和醫(yī)院職工等）在醫(yī)院活動(dòng)期間，遭受病原體侵襲而引起的任何診斷明確的感染或疾病。一醫(yī)院感染1、地點(diǎn)：在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生.2、人群：一切在醫(yī)院內(nèi)活動(dòng)的人，主要指病人

3、后果：受到感染并出現(xiàn)癥狀要點(diǎn)：（一）醫(yī)院感染的概念狹義：指住院病人入院時(shí)不存在、也非處于潛伏期，而在住院期間遭受病原體侵襲而引起的任何診斷明確的感染或疾病。包括住院期間發(fā)生的感染和在醫(yī)院內(nèi)獲得而在院外發(fā)生的感染。第一節(jié)醫(yī)院感染（二）醫(yī)院內(nèi)感染的分類

按病原體來源分：1．外源性感染(ExogenousnosocomialInfection)

也稱交叉感染（crossinfection)

是指來自于病人體外的病原體，通過直接或間接感染途徑，傳播給病人而引起的感染。2．內(nèi)源性感染(EndogenousnosocomialInfection)

也稱自身感染（autogenousinfection)

是指病人遭受其自身攜帶的感染源侵襲而發(fā)生的感染。如長(zhǎng)期使用抗生素引起的菌群失調(diào)。第一節(jié)醫(yī)院感染二、醫(yī)院感染的形成

醫(yī)院感染的發(fā)生必須具備三個(gè)基本條件：感染源、傳播途徑和易感宿主，三者構(gòu)成感染鏈。

第一節(jié)醫(yī)院感染易感宿主感染源傳播途徑感染鏈（一）感染源

感染的來源,是指病原微生物自然生存、繁殖及排出的場(chǎng)所或宿主（人或動(dòng)物）。

1、已感染的病人及病原攜帶者

2、醫(yī)務(wù)人員

3、醫(yī)院環(huán)境

4、其他（1）病人家屬和探視者（2）未徹底消毒的器械（3）不合格血液制品、藥物（4）動(dòng)物感染源

5、病人自身正常菌群第一節(jié)醫(yī)院感染外源性的內(nèi)源性的（二）傳播途徑

指病原體從感染源傳到易感宿主的途徑和方式菌群的轉(zhuǎn)移及其生長(zhǎng)環(huán)境的改變是感染發(fā)生的基礎(chǔ).第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物（二）傳播途徑

.1、接觸傳播：是外源性感染的主要途徑（1）直接接觸傳播：不經(jīng)媒介（2）間接接觸傳播：通過媒介（水、食物、醫(yī)療設(shè)備、昆蟲）第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物（二）傳播途徑

2、空氣傳播（微生物氣溶膠傳播）:以空氣為媒介，三種形式（1）飛沫傳播:空氣中懸浮時(shí)間不長(zhǎng)，1m內(nèi)易感（2）飛沫核傳播:長(zhǎng)時(shí)間浮漂，長(zhǎng)距離傳播（3）菌塵傳播:吸入或菌塵降于傷口，引起直接傳播,菌塵降于物體表面，引起間接傳播第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物（二）傳播途徑

3、生物媒介傳播：蚊子傳播瘧疾、乙腦等4、共同媒介傳播（1）經(jīng)水源傳播（2）飲食傳播（3）注射、輸液、輸血傳播第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物如：SARS的傳播：感染源傳播途徑空氣易感宿主SARS病毒另外還有腸道、體液接觸等途徑又如：艾滋病的傳播：艾滋病患者易感宿主體液（性傳播）血液傳播母嬰傳播蚊子會(huì)傳播嗎HIV？而日常的接觸（如握手、共用浴室、共用餐具等）不會(huì)造成傳播再如：乙肝的傳播：乙肝患者或病毒攜帶者易感宿主體液（性傳播、粘膜破損）血液傳播（輸血、注射）母嬰傳播乙肝不會(huì)通過空氣傳播，同室工作、交談不會(huì)被傳染。但病毒攜帶者的唾液可能含有病毒，應(yīng)采用公筷、分食。乙肝一般也不會(huì)通過握手傳染給其他人，除非雙方雙手都有裂口，有出血情況。（三）易感宿主對(duì)感染性疾病缺乏免疫力而易感染的人1、患有嚴(yán)重影響或損傷機(jī)體免疫系統(tǒng)功能疾病的病人2、侵入性診斷治療的病人3、接受各種免疫抑制療法的病人4、大量長(zhǎng)期使用抗生素的病人5、老年人、嬰幼兒、營(yíng)養(yǎng)不良者醫(yī)院患者既可能是感染源也是易感宿主

宿主是否感染主要取決于病原體定植的數(shù)量、部位與宿主正常的防疫功能

第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物

醫(yī)院環(huán)境微生物的種類

1．環(huán)境污染嚴(yán)重

2．易感人群增多

3．大量抗生素的廣泛使用和濫用開發(fā)和普及

4．介入性診治手段增多

5.醫(yī)務(wù)人員對(duì)醫(yī)院感染的重要性認(rèn)識(shí)不足；

6.醫(yī)院布局不合理，隔離措施和隔離設(shè)施不健全第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物1、葡萄球菌廣泛存在于自然界，醫(yī)務(wù)人員帶菌率70%，是醫(yī)院內(nèi)感染的重要來源最常見的化膿性細(xì)菌最常見的引起醫(yī)院內(nèi)感染的致病菌之一最易產(chǎn)生耐藥性變異在無芽胞細(xì)菌中，對(duì)理化因素的抵抗力最強(qiáng)葡萄球菌生物學(xué)性狀——分類

金黃色葡球菌表皮葡球菌腐生性葡球菌色素金黃色白色白色或檸檬色凝固酶+--分解甘露醇+--溶血素+-/+-致病力強(qiáng)弱無血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌的菌落金黃色葡萄球菌與表皮葡萄球菌的比較

二、致病性

致病物質(zhì)：1.凝固酶2.葡萄球菌溶素3.殺白細(xì)胞素4.腸毒素5.表皮剝脫毒素

6.毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）7.其它：SPA、耐熱核酸酶等1、凝固酶—鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)

游離凝固酶(試管法檢測(cè))

種類

結(jié)合凝固酶(玻片法檢測(cè))與致病性關(guān)系：抗吞噬作用;

免受體液殺菌物質(zhì)殺傷；感染局限化2.葡萄球菌溶素：分α、β、γ等五種；其中α溶素毒性最強(qiáng)，對(duì)多種哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞有溶血作用；對(duì)白細(xì)胞、血小板等均有損傷。3.殺白細(xì)胞素：作用于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的細(xì)胞膜，膜穿孔和膜通透性增高抗吞噬作用，增強(qiáng)致病菌侵襲力4.腸毒素：是一組熱穩(wěn)定的可溶性蛋白，耐100℃30min；抗胃蛋白酶分解；刺激嘔吐中樞，導(dǎo)致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒5.表皮剝脫毒素：使表皮層細(xì)胞脫落，引起剝脫性皮炎（右圖）

6.毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）（toxicshocksyndromtoxin1）刺激單核吞噬細(xì)胞釋放活性物質(zhì)，作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管通透性增加，血液中液體成分外滲，回心血量減少，出現(xiàn)低血壓性休克

所致疾病：1.侵襲性疾病：通過多種途徑侵入機(jī)體，引起以化膿性炎癥為主的感染。（1）皮膚軟組織感染：毛囊炎、癤、癰、傷口化膿、麥粒腫、甲溝炎等。（2）內(nèi)臟器官感染：氣管炎、肺炎、膿胸、中耳炎。（3）全身感染：敗血癥、膿毒血癥等。癤癰毛囊炎金黃色葡萄球菌引起化膿性感染特點(diǎn)膿汁黃而粘稠，化膿灶多局限，與周圍組織界限明顯。與致病性鏈球菌引起的化膿性感染特點(diǎn)相區(qū)別2.毒素性疾病

（1）食物中毒：進(jìn)食腸毒素污染的食物導(dǎo)致的以嘔吐為主的急性胃腸炎。（2）假膜性腸炎：長(zhǎng)期使用廣譜抗生素后，導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，耐藥性葡萄球菌大量繁殖產(chǎn)生毒素，引起嘔吐、腹瀉等腸炎癥狀。假膜性腸炎發(fā)病機(jī)理：人群中10%—15%有少量金葡寄居腸道當(dāng)其他優(yōu)勢(shì)菌因抗生素而抑制

耐藥的葡萄球菌繁殖

腸毒素（3）燙傷樣皮膚綜合征：由表皮剝脫毒素引起，多見于嬰幼兒（右圖）（4）毒性休克綜合征：由TSST-1引起，高熱、低血壓、嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)休克2、銅綠假單胞菌各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有本菌存在。本菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。心內(nèi)膜炎、腦脊髓膜炎、腦膜炎等入血可引起敗血癥大腸埃希菌、克雷伯菌、沙雷菌尿路感染、膽道感染、腹膜炎、創(chuàng)傷化膿是引起敗血癥的主要細(xì)菌常產(chǎn)生耐藥菌傷寒沙門菌傷寒桿菌在自然界中的生活力較強(qiáng)，在水中可存活2—3周，在糞便中能維持1—2個(gè)月，在牛奶中不僅能生存，且可繁殖。傷寒桿菌只感染人類，人是主要的帶菌者。

傷寒瑪麗結(jié)核菌溶血性鏈球菌厭氧菌真菌病毒：肝炎病毒、HIV

醫(yī)院感染的主要因素

1．環(huán)境污染嚴(yán)重

2．易感人群增多

3．大量抗生素的廣泛使用和濫用開發(fā)和普及

4．介入性診治手段增多

5.醫(yī)務(wù)人員對(duì)醫(yī)院感染的重要性認(rèn)識(shí)不足；

6.醫(yī)院布局不合理，隔離措施和隔離設(shè)施不健全第一節(jié)醫(yī)院環(huán)境微生物五、醫(yī)院感染的預(yù)防和控制醫(yī)院感染的監(jiān)測(cè)消毒滅菌隔離預(yù)防合理使用抗生素第二節(jié)

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物66

實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（事例）1941年美國(guó)發(fā)生74例實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的吸入性布氏桿菌感染事故1976年英國(guó)某醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人員高5倍1992年美國(guó)報(bào)告因工作感染愛滋病的人員13例，其中有1例是實(shí)驗(yàn)室工作者，12例是臨床醫(yī)生或護(hù)士我國(guó)實(shí)驗(yàn)室感染事件中國(guó)CDC實(shí)驗(yàn)人員感染非典病毒事故

2004年4月中國(guó)CDC病毒所腹瀉病毒室兩名研究生在做病毒實(shí)驗(yàn)時(shí)感染sars病毒。（后患者又引發(fā)北京與安徽各1人感染）事故調(diào)查：事故起因系該所實(shí)驗(yàn)人員多次違規(guī)將未完全滅活的sars病毒從P3實(shí)驗(yàn)室?guī)С鲋疗胀▽?shí)驗(yàn)室操作而引起（時(shí)間與患者發(fā)病相吻合）。我國(guó)實(shí)驗(yàn)室感染事件六點(diǎn)違規(guī)操作：1科研課題跨專業(yè)4人員配備不嚴(yán)2安全管理不重視5健康監(jiān)測(cè)不到位3技術(shù)操作不規(guī)范6執(zhí)行制度不嚴(yán)處理措施:中國(guó)疾控中心主任李立明引咎辭職，其它有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)人員亦受相應(yīng)處理。

我國(guó)實(shí)驗(yàn)室感染事件臺(tái)灣實(shí)驗(yàn)人員感染非典病毒事故

2003年12月臺(tái)灣一位實(shí)驗(yàn)人員在P3實(shí)驗(yàn)室做病毒實(shí)驗(yàn)時(shí)，因清理廢棄物操作疏忽，安全程序處理不當(dāng)而感染病毒。70病原微生物的分類第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。

71病原微生物的分類第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

第四類病原微生物，是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。生物安全實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)實(shí)驗(yàn)室分級(jí)處理對(duì)象危險(xiǎn)等級(jí)BSL-1對(duì)人體和環(huán)境危害較低，不會(huì)引發(fā)健康成人疾病Ⅰ級(jí)四類BSL-2對(duì)人體和環(huán)境有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子Ⅱ級(jí)三類BSL-3主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有預(yù)防治療措施Ⅲ級(jí)二類BSL-4對(duì)人體有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明的微生物。尚無預(yù)防治療措施Ⅳ級(jí)一類一級(jí)生物安全防護(hù)

適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象已知對(duì)健康成年人無致病作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的潛在危害很小。一級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介舉例：枯草芽孢桿菌感染性犬肝炎病毒

大腸桿菌二級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)人和環(huán)境具有中等潛在危害。二級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介

麻疹病毒

沙門氏菌

弓形蟲

乙肝病毒

舉例：*有有效的疫苗或抗生素治療有效二級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介

舉例：

血源病原體

人類體液，尤其是明顯有血液污染的體液*特別要警惕污染的針頭或者銳器三級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介嚴(yán)適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是通過呼吸途徑使人感染導(dǎo)致重的甚至是致死性疾病的感染性材料。三級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介暴露于通過氣溶膠途徑傳播的致病菌嚴(yán)重感染，有可能致命例如：

結(jié)核桿菌炭疽

圣路易腦炎病毒漢坦病毒等四級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介

適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是危險(xiǎn)的和新的感染性材料，表現(xiàn)出通過氣溶膠途徑傳播實(shí)驗(yàn)室感染和致命疾病的高度危險(xiǎn)性。四級(jí)生物安全防護(hù)簡(jiǎn)介有暴露于通過氣溶膠傳播或者傳播途徑不明確的致病菌潛在可能

感染可能致死

例如：

埃波拉病毒無名病毒（SNV）

天花病毒BSL-1實(shí)驗(yàn)室基本要求1.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的設(shè)計(jì)和設(shè)施，窗戶開啟時(shí)應(yīng)使用紗窗。2.實(shí)驗(yàn)室的墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、不滲水、易清潔并耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。3.實(shí)驗(yàn)臺(tái)和櫥柜應(yīng)牢固穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面能防水、耐腐蝕、耐熱，易消毒。4.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用的利器應(yīng)盛放在固定的容器內(nèi)。835.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)照明應(yīng)保證工作需要，并避免反光和強(qiáng)光。6.在實(shí)驗(yàn)室出口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，專門放置實(shí)驗(yàn)室工作服。7.實(shí)驗(yàn)室門口應(yīng)有生物安全一級(jí)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)識(shí)。防護(hù)設(shè)施1.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在靠近出口處設(shè)洗手池，洗手龍頭應(yīng)為自動(dòng)感應(yīng)式、長(zhǎng)手柄式或腳踏式，并配備消毒洗手皂液。2.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)有空氣和物體表面消毒的設(shè)備和設(shè)施。BSL-2實(shí)驗(yàn)室基本要求1.首先要符合BSL-1實(shí)驗(yàn)室建筑設(shè)計(jì)和設(shè)施要求2.實(shí)驗(yàn)室門宜帶鎖、可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗。3.實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨認(rèn)的標(biāo)識(shí)。4.實(shí)驗(yàn)室宜有不少于每小時(shí)3～4次的通風(fēng)換氣次數(shù)。5、裝備負(fù)壓的安全操作柜；BSL-3實(shí)驗(yàn)室基本要求1.實(shí)驗(yàn)室在平面布局、送排風(fēng)系統(tǒng)等方面有許多特殊要求。2、全負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室+安全操作柜；；中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所在BSL-3實(shí)驗(yàn)室開展科研活動(dòng)BSL-4實(shí)驗(yàn)室「魔鬼實(shí)驗(yàn)室」是指全球生物安全最高級(jí)別實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱P4實(shí)驗(yàn)室。為了對(duì)世界上最危險(xiǎn)的病原體進(jìn)行研究而建的全世界15個(gè)實(shí)驗(yàn)室。有4間位于美國(guó)，在英國(guó)、俄羅斯和德國(guó)各建有兩間，此外，在法國(guó)、加拿大、瑞士、印度和澳大利亞也分別建有一間。BSL-4實(shí)驗(yàn)室專用實(shí)驗(yàn)大樓+與其它建筑物有安全的隔離帶+細(xì)菌操作帶手套+其它必要的隔離裝置+實(shí)驗(yàn)者不會(huì)直接接觸細(xì)菌等。。P4實(shí)驗(yàn)室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。在實(shí)驗(yàn)室的四周裝有高效空氣過濾器。到達(dá)實(shí)驗(yàn)室的核心區(qū)，總共有10道門，最里面的7道門是互鎖的，如果一道門沒有關(guān)好，另一道門肯定打不開，第二節(jié)指示微生物指示微生物：是在常規(guī)衛(wèi)生監(jiān)測(cè)中，用以指示樣品衛(wèi)生狀況及安全性的（非致病）微生物(或細(xì)菌）衛(wèi)生指示微生物可分為四種類型①菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)；②大腸菌群、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌等③其它指示菌，包括某些特定環(huán)境不能檢出的菌類(如特定菌、某些致病菌、或其它指示性微生物)；④病毒（包括噬菌體），間接反映腸道病毒存在的可能性。①菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)用途：用來評(píng)估被檢樣品的一般衛(wèi)生質(zhì)量、污染程度和安全性。菌落總數(shù) 概念：菌落總數(shù)就是指在一定條件下（如需氧情況、營(yíng)養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時(shí)間等）每克（每毫升）檢樣所生長(zhǎng)出來的細(xì)菌菌落總數(shù)。按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定，即在需氧情況下，37℃培養(yǎng)48h，能在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落總數(shù)。因此菌落總數(shù)并不表示實(shí)際中的所有細(xì)菌總數(shù)，菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類，所以有時(shí)被稱為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)等。霉菌的檢測(cè)意義霉菌和酵母菌及其檢驗(yàn)酵母菌是真菌中的一大類，通常是單細(xì)胞，呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。霉菌也是真菌，能夠形成疏松的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為霉菌。 霉菌和酵母也可造成中腐敗變質(zhì)。由于它們生長(zhǎng)緩慢和競(jìng)爭(zhēng)能力不強(qiáng)，故常常在不適于細(xì)菌生長(zhǎng)的食品中出現(xiàn)，這些食品是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品，含有抗菌素的食品等

。由于霉菌和酵母能抵抗熱、冷凍，以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術(shù)，它們能轉(zhuǎn)換某些不利于細(xì)菌的物質(zhì)，而促進(jìn)致病細(xì)菌的生長(zhǎng)；有些霉菌能夠合成有毒代謝產(chǎn)物－霉菌毒素。霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，霉菌在食品中繁殖，可使食品發(fā)生難聞的異味，它還可以使液體發(fā)生混濁，產(chǎn)生氣泡，形成薄膜，改變顏色及散發(fā)不正常的氣味等

。二、糞便污染指示菌1、大腸菌群大腸菌群是指一群能在35~37℃,24h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽胞桿菌.它主要包括腸桿菌科的大腸埃希氏菌、枸椽酸桿菌、克雷伯氏菌和腸桿菌

用途：大腸菌群主要來自人和溫血?jiǎng)游锏募S便，故以此作為土壤、水和食品等受糞便污染的標(biāo)志，以其含量多少來判定樣品的衛(wèi)生質(zhì)量。衛(wèi)生學(xué)意義

主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中是否有糞便污染。大腸菌群數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對(duì)人體健康危害性的大小。糞便是人類腸道排泄物，其中有健康人糞便，也有腸道患者或帶菌者的糞便，所以糞便內(nèi)除一般正常細(xì)菌外，同時(shí)也會(huì)有一些腸道致病菌存在（如沙門氏菌、志賀氏菌等），因而食品中有糞便污染，則可以推測(cè)該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性，潛伏著食物中毒和流行病的威脅，必須看作對(duì)人體健康具有潛在的危險(xiǎn)性。

耐熱大腸菌群

耐熱大腸菌群也稱糞大腸菌群是指在44-45°時(shí)仍能生長(zhǎng)和發(fā)酵乳糖的大腸菌群。

類型與總腸菌群相同，埃希菌屬為主，其他比例很少。衛(wèi)生學(xué)意義總大腸菌群在非糞便污染的情況下，在營(yíng)養(yǎng)豐富的水體、土壤、腐敗的植物等外環(huán)境中也有可能檢出。耐熱大腸菌群一般不會(huì)在飲用水輸配系統(tǒng)中再繁殖。糞大腸菌群在人和動(dòng)物糞便中所占的比例較大，而且在自然界容易死亡。故耐熱大腸菌群比總大腸菌群能更確切地反映飲用水受人和動(dòng)物糞便的近期污染及污染的程度，也較為實(shí)用和可行，因此越來越受到重視。大腸菌群可能數(shù)

指100g(或100ml)檢樣內(nèi)所含大腸菌群的最可能數(shù)(MPN)。有時(shí)為了更確切地反映糞便污染，用糞大腸菌群作指標(biāo)。是指在44土0.5℃培養(yǎng)24h能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、在蛋白陳水中生長(zhǎng)產(chǎn)生靛基質(zhì)的、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，主要是指大腸桿菌。

項(xiàng)目級(jí)別細(xì)菌總數(shù)萬個(gè)/克大腸菌值產(chǎn)氣莢膜梭菌值清潔1>1.0>0.1輕度污染缺1.0～0.010.1～0.001中度污染缺0.1～0.0010.001～0.0001嚴(yán)重污染數(shù)百>0·001>0.0001

1、土壤土壤的細(xì)菌學(xué)檢查，主要是測(cè)定細(xì)菌總數(shù)、大腸菌值和產(chǎn)氣莢膜梭菌值(也作為糞便污染的指標(biāo))三項(xiàng)指標(biāo)。大腸菌值(產(chǎn)氣莢膜梭菌值)是指能檢出大腸桿菌(產(chǎn)氣莢膜梭菌)的最小土壤量(g)。

2、水水的細(xì)菌學(xué)檢查，主要是測(cè)定細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)。我國(guó)曾規(guī)定，生活飲用水(自來水)的衛(wèi)生指標(biāo)為細(xì)菌總數(shù)不得超過100個(gè)/ml，總大腸菌群數(shù)不得超過3個(gè)。

3、空氣空氣的細(xì)菌學(xué)檢查，主要是測(cè)定每1m3空氣中的細(xì)菌總數(shù)、鏈球菌數(shù)。我國(guó)1988年頒布的公共場(chǎng)所室內(nèi)空氣衛(wèi)生指標(biāo)中，規(guī)定細(xì)菌總數(shù)不得超過4000個(gè)/m3，三級(jí)以上的旅館不得超過2000個(gè)/m3，商店、火車站、航運(yùn)站、汽車站、火車車箱(冬季)不得超過6000個(gè)/m3，客機(jī)(冬季)不得超過3000個(gè)/m3。大腸桿菌大腸埃希氏菌(E.coli)通常稱為大腸桿菌，是