Agilent1200高效液相色譜儀操作規程

題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規程編號共5頁SOP-YQ-010A第1頁制訂人審核人批準人生效日期

一、目的：規范實驗室Agilent1200高效液相色譜儀的操作維護方法，保證實驗的有效性。二、適用范圍：適用于實驗室Agilent1200高效液相色譜儀的使用和維護。三、職責：所有使用Agilent1200高效液相色譜儀的分析人員，需正確操作，并做好維護保養和狀態檢查工作。四、操作步驟1.Agilent1200化學工作站開機順序(LAN卡聯接)

1.1、將待測樣品按要求前處理，準備HPLC所需流動相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等

1.2、打開計算機，進入Bootp；1.3、打開主機各模塊電源（不分先后），等待Bootp接收,等待各模塊就緒后,再雙擊工作站圖標,進入化學工作站；1.4、調出一個分析方法，檢查各參數的設置；1.5、旋開泵上的排氣閥，將工作站中的泵流量設到5ml/min，溶劑A設到100%；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規程編號共5頁SOP-YQ-010A第2頁1.6、在工作站中打開泵，排出管線中的氣體數分鐘；1.7、依此切換到B、C、D溶劑分別排氣；1.8、將工作站中的泵流量設到1ml/min，多元泵則再設定溶劑配比，如A=80%，B=20%；1.9、關閉排氣閥，檢查柱前壓力；1.10、待柱前壓力基本穩定后,打開檢測器燈，觀察基線情況；2、數據采集方法編輯2.1由運行控制進入樣品信息，設定操作者姓名，樣品數據文件名等。2.2自動進樣器參數設定:1）選擇合適的進樣方式,“StandardInjection”----只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能。“InjectionwithNeedleWash”----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，“UnRegistered”--此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會在洗瓶中洗針。“Useinjectorprogram”---可以點擊“Edit”鍵進行進樣程序編輯。2)單擊確定進入下一畫面。2.3泵參數設定：（四元泵）1）在流量（Flow）處輸入流量,如1.5ml/min，在溶劑B處輸入70.0,(A=100-B-C-D),也可插入一行時間列表（Timetable）,編輯梯度。在最大壓力極限處（PressureLimitsMax）輸入柱子的最大題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規程編號共5頁SOP-YQ-010A第3頁耐高壓，以保護柱子。2）單擊確定進入下一畫面。2.4柱溫箱參數設定:1）在柱溫下面的方框內輸入所需溫度,并選中它,點擊更多鍵,選中與左側一致，使柱溫箱的溫度左右一致。2）單擊確定進入下一畫面。2.5DAD檢測器參數設定:1）在波長下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm,在峰寬(響應時間)下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應時間,如>0.1min(2s)。2）在時間列表中可以插入一行，輸入隨時間切換的波長，如1min，波長=300nm。3）點擊確定進入下一畫面。2.6單擊方法菜單，選中保存方法，輸入一方法名，如“test”，單擊確定。2.7、運行序列：新建序列，在序列參數中輸入樣品信息，在序列表中輸入樣品位置，方法等，運行該序列，等儀器就緒，基線平穩，從方法菜單中選擇運行方法，進樣。3、數據處理操作步驟3.1由主菜單上的視圖進入數據分析，到數據處理界面；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規程編號共5頁SOP-YQ-010A第4頁3.2由主菜單上的文件進入調用信號，調出要分析的數據文件色譜圖；3.3由主菜單上的圖形進入信號選項，調整譜圖坐標:1)點自定義量程，在時間范圍中輸入橫坐標(時間）(例如0到10)；2)在響應范圍:中輸入縱坐標(響應值）(例如-50到800)；3)在量程框中，調到全部使用相同量程；4)點擊確定退出。3.4由主菜單上的積分進入積分事件，設置、修改積分參數；1)在斜率靈敏度后，輸入斜率值；2)在峰寬后中，輸入最小峰寬值；3)在最小峰面積后，輸入最小峰面積值；4)在最小峰高后，輸入最小峰高值；5)點擊左上方帶鉤的圖標，確認；3.5由主菜單上的報告進入設定報告，設置報告參數：1)在定量結果欄中，選擇計算（面積百分比，外標法，內標法等）；2)在目標欄，選打印機打印，或屏幕打印；3)點擊確定退出。3.6由主菜單上的報告進入打印報告，打印報告；4、關機4.1關機前，用95%水沖洗柱子和系統0.5-1小時，流量0.5—1ml/min，再用100%有機溶劑沖0.5小時，然后關泵，（適于反相色譜柱）。題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規程編號共5頁SOP-YQ-010A第5頁[正相色譜柱用適當的溶劑沖洗]4.2退出化學工作站，及其它窗口，關閉計算機（用shutdown關）。4.3關閉Agilent1200各模塊電源開關。5、Agilent1200高效液相色譜儀維護保養：5.1氘燈是易耗品，應最后開燈，不分析樣品即關燈；5.2開機時，打開排氣閥，100%水，泵流量5ml/min，若此時顯示壓力>10bar，則應更換排氣閥內玻璃料。5.3流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長菌）。5.4流動相使用前必須進行脫氣處理，可用超聲波振蕩10-15min。5.5配制90%水+10%異丙醇，以每分2—3滴的速