第一次實驗

細菌(xìjūn)的形態(tài)和結構觀察介紹實驗室有關的內容實驗(shíyàn)內容實驗小結

228963373/1/20231第一頁，共四十七頁。學習(xuéxí)要求1、初步了解病原生物學和免疫學實驗技術的概念和內容；2、熟悉(shúxī)病原生物學實驗室的注意事項；3、掌握顯微鏡的使用和保護方法；4、掌握細菌的基本形態(tài)和特殊結構；5、掌握細菌的革蘭染色法；6、了解細菌的運動特點。3/1/20232第二頁，共四十七頁。介紹實驗室有關(yǒuguān)的內容

1、總論微生物實驗寄生蟲實驗免疫學技術2、實驗室注意事項評分標準清潔衛(wèi)生操作規(guī)程(cāozuòguīchéng)顯微鏡管理等3/1/20233第三頁，共四十七頁。實驗(shíyàn)內容1、顯微鏡使用和保護(bǎohù)（錄像）2、細菌的鏡下形態(tài)觀察（學生操作）3、細菌的特殊結構（學生操作）4、革蘭染色（學生操作）5、細菌的動力觀察錄像（教師示教）3/1/20234第四頁，共四十七頁。3/1/20235第五頁，共四十七頁。實驗(shíyàn)小結1、顯微鏡油鏡的使用和保護2、細菌的基本形態(tài)①球菌②桿菌③螺形菌

3、細菌的特殊結構①莢膜②鞭毛③芽胞④菌毛4、細菌的革蘭染色法5、注意事項：評分、衛(wèi)生、操作(cāozuò)、管理。3/1/20236第六頁，共四十七頁。end3/1/20237第七頁，共四十七頁。細菌(xìjūn)的基本形態(tài)觀察(發(fā)片)1、球菌鏡下形態(tài)：①葡萄球菌②鏈球菌③肺炎鏈球菌④腦炎(nǎoyán)奈瑟菌2、桿菌鏡下形態(tài)：①大腸埃希菌②破傷風梭菌③產氣莢膜梭菌④變形桿菌3、螺形菌革蘭染色片：

霍亂弧菌或水弧菌

3/1/20238第八頁，共四十七頁。細菌(xìjūn)的特殊結構(示教片)1．肺炎球菌莢膜染色(rǎnsè)示教片（示莢膜）2．變形桿菌鞭毛染色示教片（示鞭毛）3．破傷風梭菌芽胞染色或革蘭染色示教片（示芽胞）3/1/20239第九頁，共四十七頁。

細菌(xìjūn)的革蘭染色革蘭染色法是細菌檢驗中最常用的一種染色法。利用革蘭染色法，可將細菌分為兩大類，有助于鑒別細菌和選擇用藥等。1、革蘭染色法原理

2、革蘭染色法操作步驟3、革蘭染色結果通過革蘭染色可以觀察到什么？細菌的形態(tài)(xíngtài)、排列、莢膜、芽胞3/1/202310第十頁，共四十七頁。革蘭陰性菌因其細胞壁中肽聚糖含量少，結構疏松，脂類物質含量高而被酒精脫色(tuōsè)，經復染呈紅色。革蘭染色(rǎnsè)原理：革蘭陽性菌因細胞壁中含有大量的肽聚糖和磷壁酸，且結構致密，可保留結晶紫與碘的復合物，并不被酒精(jiǔjīng)脫色而顯示為紫藍色。3/1/202311第十一頁，共四十七頁。

革蘭染色方法(錄像）涂片自然干燥火焰固定染色染色過程：

已固定的涂片加結晶紫1分鐘，水沖洗滴加碘液1分鐘，水沖洗95%酒精20~30秒稀釋石炭酸復紅1分鐘，水沖洗待干鏡檢初染媒染脫色復染一般用室溫干燥(gānzào)，注意必須完全干燥(gānzào)后方可固定。涂片在酒精燈火焰上快速通過3～4次以固定細菌，并使其不易從玻片上脫落。注意不要將涂片直接放在火焰上烤，以免(yǐmiǎn)破壞細菌結構。

3/1/202312第十二頁，共四十七頁。

用滅菌的接種環(huán)取無菌生理鹽水1-2環(huán)，置于玻片中。接種環(huán)滅菌，待接種環(huán)冷卻后，挑取適量培養(yǎng)物混合于鹽水中，涂抹均勻使成一層薄膜（若檢材是液體則不必加生理鹽水）薄膜涂抹的面積約1.5×2.0cm。按上法制備(zhìbèi)大腸桿菌涂膜。3/1/202313第十三頁，共四十七頁。3/1/202314第十四頁，共四十七頁。葡萄球菌(pútáoqiújūn)（革蘭染色）3/1/202315第十五頁，共四十七頁。葡萄球菌(pútáoqiújūn)（革蘭染色）3/1/202316第十六頁，共四十七頁。葡萄球菌(pútáoqiújūn)電鏡照片3/1/202317第十七頁，共四十七頁。鏈球菌（革蘭染色(rǎnsè)）3/1/202318第十八頁，共四十七頁。鏈球菌（革蘭染色(rǎnsè)）3/1/202319第十九頁，共四十七頁。鏈球菌電鏡照片(zhàopiàn)3/1/202320第二十頁，共四十七頁。奈瑟菌（革蘭染色(rǎnsè)）3/1/202321第二十一頁，共四十七頁。雙球菌（革蘭染色(rǎnsè)）3/1/202322第二十二頁，共四十七頁。雙球菌電鏡照片(zhàopiàn)3/1/202323第二十三頁，共四十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌（革蘭染色）3/1/202324第二十四頁，共四十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌（革蘭染色）3/1/202325第二十五頁，共四十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌電鏡照片3/1/202326第二十六頁，共四十七頁。霍亂弧菌（革蘭染色(rǎnsè)）霍亂弧菌(hújūn)電鏡照片3/1/202327第二十七頁，共四十七頁。莢膜莢膜3/1/202328第二十八頁，共四十七頁。莢膜3/1/202329第二十九頁，共四十七頁。莢膜3/1/202330第三十頁，共四十七頁。變形桿菌鞭毛(biānmáo)染色（示鞭毛(biānmáo)）

3/1/202331第三十一頁，共四十七頁。變形桿菌鞭毛(biānmáo)電鏡照片（示鞭毛(biānmáo)）

3/1/202332第三十二頁，共四十七頁。破傷風梭菌（示芽胞）革蘭染色(rǎnsè)和芽胞染色(rǎnsè)3/1/202333第三十三頁，共四十七頁。破傷風梭菌芽胞染色(rǎnsè)（示芽胞）

3/1/202334第三十四頁，共四十七頁。破傷風梭菌革蘭染色(rǎnsè)（示芽胞）

3/1/202335第三十五頁，共四十七頁。破傷風梭菌芽胞電鏡照片(zhàopiàn)（示芽胞）

3/1/202336第三十六頁，共四十七頁。產氣莢膜梭菌革蘭染色(rǎnsè)（示莢膜）3/1/202337第三十七頁，共四十七頁。3/1/202338第三十八頁，共四十七頁。3/1/202339第三十九頁，共四十七頁。3/1/202340第四十頁，共四十七頁。3/1/202341第四十一頁，共四十七頁。霍亂弧菌（革蘭染色(rǎnsè)）霍亂(huòl(fā)uàn)弧菌電鏡照片3/1/202342第四十二頁，共四十七頁。3/1/202343第四十三頁，共四十七頁。3/1/202344第四十四頁，共四十七頁。3/1/202345第四十五頁，共四十七頁。1、實驗時不遲到、不早退。2、實驗時要保持實驗室內的整潔、安靜。3、正確使用(shǐyòng)顯微鏡，觀察完畢應把鏡頭和載玻片上的鏡油擦凈。

4、各實驗小組的實驗用品、由各組保管使用，不得隨意與他組調換或挪用。如需補發(fā)或增添，應說明原因。5、每次實驗后應清點實驗器材、用品數量，如有遺失或損壞應按規(guī)定賠償。動物及標本要按規(guī)定處理，不可(bùkě)擅自拿走。6、實驗結束后，各組應自覺清理實驗器材，值日生做好全室清潔工作，關好門窗、水電，經指導教師(jiàoshī)檢查合格后方可離開實驗室。

1、要按時完成實驗報告。2、實驗報告要保證準確、工整、美觀。3、實驗課結束要將實驗報告交病原生物學實驗室評分存檔。

1、操作考核。2、大體標本考核。3、鏡下標本考核。

病原生物學與醫(yī)學免疫學實驗是獨立計分的學科總評分為100分（平時成績40分+考核成績60分）1、平時成績40分（其中平時表現占40%，實驗報告占60%）2、實驗考核60分（其中操作考核占25%，標本考核占75%）

3/1/202346第四十六頁，共四十七頁。內容(nèiróng)總結第一次實驗

細菌的形態(tài)和結構觀察。2/27/2022