1、心可舒片制備工藝研究中醫對治療冠心病提出了活血化瘀的理論1,2 ，心可舒片是選用活血化瘀的中藥而研 制的復方制劑用于冠心病、高血壓病、心律失常等有良好療效。對于活血散瘀，舒心降壓, 擴張血管，降低膽固醇。心可舒片具有較強的活血化瘀行氣止痛之功效，用于冠心病心絞痛 (胸痹)中醫辨證屬心血瘀阻證型者療效較好。該藥不含冰片，對胃腸道功能影響較小，病 人服后多無胃腸道不適癥狀，對肝腎系統均未見不良影響，是一種較好的治療心絞痛的中成 藥。藥物組成：山楂、丹參、葛根、三七、木香。1、丹參：君藥(學名：Savia miltiorrhiza Bge.)根主含二帖齪類色素，丹參 酮(tanshinone) I

2、, II A, II B,隱丹參酮(cryptotanshinone),異丹參酮(isotanshinones) 1,11,異隱丹參酮(1 socryptotanshinone)，丹參新酮(miltirone),丹參酸甲 Sb (methyl tanshinonate)，疑基丹參酮 II A( hydroxytanshinone),二氫丹參酮 I ( dihydrotanshinone I ),丹參新醍甲、乙、丙， 次甲丹參醍(methylenetanshinquinone )和鼠尾草酚 (salviol).另報道合鐵銹醇(femiginol)、丹參新酮(Al-dehydromiltirone

3、)、A1- 丹參酮 II A ( Al-dehydrotanshinone IIA)、丹參新酉昆 J ( danshenxinkun D )和 1, 2.二氫 丹參SS等.除二祜醍類化合物外，尚合原兒茶醛(protocatechuic aldehyde)、卜谷笛 醇和D ( + ) p- (3,4二務基苯基)乳酸(即丹參素，丹參酸甲)，以及縮竣酸化合 物(salvianolic acids) A,E 等，以及熊果酸(ursolic acid)、異阿魏酸(isoferulic acid) 等。另外，尚含黃苓甘等。2、山楂(Crataegus puinatifida,二名法 Fmctus Crat

4、aegi Puinatifidae)山楂的 主要成 分是黃酮類物質，對。目前，從山楂中分離的黃酮成分有30余種，主要有含碳鍵 的黃酮甘類、黃酮醇及其苛類、雙氧黃酮苛類、聚合黃酮類。另一類較為重要的成分 是有機酸類，如三帖類成分：熊果酸(ursolic acid)、齊墩果酸(oleanolic acid)、其他 酸類如 山楂酸(crataegolic acid,maslinic acid)氯原酸、咖啡酸及蘋果酸、酒石酸、 碩脂酸、亞油酸和亞麻酸等等。3、葛根(Radix Puerariae, Lobed Kudzuvine Root)主要含有黃酮類物質:大豆 素，大豆貳，還有大豆素-4, 7-二

5、葡萄糖貳，葛根素，葛根素-7-木糖貳，葛根醇，葛 根藤及異黃酮試等。還含人豆試元(daidzein),大豆試(daidzin),葛根素(puerarm), 牢-甲氧基葛根素(4，-methoxypuerarm),人豆試元-4，, 7-二葡萄糖試(daidzein-4, 7-diglucoside),人豆試元-7- ( 6-0-丙二酰基)-葡萄糖貳daidzem-7- ( 6-O-malonyl) -lucoside,葛根素木糖 (puerannxyloside, PG-2), 3疑基葛根素(3 hydroxypuerarin, PG-1),葛根酚(puerarol),葛根貳(pueroside

6、 )葛根皂醇(kudzusapogenol) C、A 和葛根皂醇B甲酯(kudzusapogenol B methylester)為試元的三菇皂貳,。4、三七(Paiiax Notogmseng (Burk.) F.H.Chen,二名法 Panax Notogiiiseng)含總皂甘 約12%,含有多種與人參皂貳類似的成分，為主要有效成分。從根中分離鑒定了十二 種單體皂貳,分別為人參皂貳(Ginsenoside)Rbl, Rd, Re, Rgl, Rg2, Rhl,七葉膽 試 XVH, (gypenoside XVH),三七皂(notoginsenoaide)Rl, R2, R3, R4, R

7、6。5、木香(Aucklandia lappa Decne , Common Vladimiria Root)其根含揮發油 1%2.8% (水蒸氣蒸館f)或4% 7%(溶劑提取)，根油主含去氫木香內酯(deliydrocostuslactone), 木香烯內酯(costunolide),含量達50%1, 2,還含木香祜醛(saussureal), 4p-甲氧 基去氫木香內酯(4p-methoxydehy-drocotuslactone) 2,木香內酯(costuslactone), 二氫木香內酯(di-hydrocostuslactone) 3, a-環木香烯內酯(a-cyclocostuno

8、lide),卩- 環木香烯內酯，土木香內酯(alantolactone),異土木香內酯(isoalan-tollactone) 4, 異去氫木香內酯(isodehydrocostuslactone),異中美菊素(isozaluzanm) C5, 12-甲 氧基二氫去氫木香內酯(12-methoxydihydrodehydrocostuslactone ),二氫木香烯內酯 (diliydro-costunolide) 6,木香烯(costene)等等。心可舒片為薄膜衣片，除去包衣后顯棕色；氣微，味酸、澀。主要用于胸痹心痛，心 悸眩暈。祖國傳統醫學認為冠心病心絞痛的發病與寒邪內侵、飲食不當、情志失

9、調、年 邁體虎有關，乃本虎標實、虎實夾雜之證，總以心腎氣虛、瘀血阻滯為主要病機。心 可舒片是由多種天然中藥材經精工制作而成的中醫復方制劑，現已證明其含有多種生 物活性物質。主要成分丹參、葛根、三七、木香、山楂等。藥理及動物實驗證實：心 可舒片具有活血化瘀，行氣止痛之功能，達到增加冠脈流量，改善心肌的供血、供氧， 改善左室作功，使心臟的“泵”功能加強而起到顯著的治療作用。冠心病心絞痛的基本 病理過程是在冠狀動脈痙攣，粥樣硬化的基礎上發生心肌氧代謝供需失調，供血不足， 耗氧量增加是缺血性心臟病的主要因素。理想而有效的治療藥物是以增加冠狀動脈血 流量的同時又降低心肌耗氧量，在某些狀態下降低心肌耗氧尤

10、為重要。而心可舒片不 但具有以上治療特性，并對改善心肌的營養狀態，增強心肌抗缺血能力，以及對由垂 體后葉素引起的心肌缺血有明顯的保護作用。通過臨床觀察治療結果證實，心可舒片 治療冠心病療效顯著，對冠心病心絞痛縮短療效時間，迅速緩解癥狀、病情，減輕患 者痛苦和經濟負擔，提高生活質量起到其他抗冠心病心絞痛類藥物無法比擬和替代的 良好作用。心可舒片對心血管病具有標本兼治的獨特作用，重在治本，因此遠期療效尤為 突出，隨用藥持續時間的延長，療效越加顯著，無明顯不良反應。對老年慢性病，如 糖尿病，高血脂、哮喘及外周血管病變患者無禁忌。心可舒片比卩受體阻滯劑更適宜 冠心病患者長期治療，克服卩受體阻滯劑用藥過

11、程中需慎重調整劑量的麻煩，所以是 慢性患者長期治療的新一代廣譜高效的血管類藥物。一、心可舒片對冠心病心絞痛的作用：心可舒片中含丹參、三七、葛根、木香、山楂， 其改善微循壞，增加冠脈血流量，改善心肌缺血，緩解心絞痛，用于冠心病患者的治療已得 到中醫學基礎及臨床研究的證實。其有效成分葛根素、丹參酮、三七總皂貳、木香內酯、山 楂酸等，據現代藥理研究，上述主要成分除直接有穩定心電活動、穩定膜電位因而抗心律失 常作用外，更具有改善心肌供血、治療心絞痛、調節血脂異常情況、減緩動脈粥樣硬化進展 及抑制血小板聚集、抗自由基損傷、擴張冠狀動脈等多種作用，綜合全面的改善心肌功能繼 而降低心肌自律性，并延長心房肌、

12、心室肌與傳導系統的動作電位，終止折返，從而治療早 搏。二、治療心律失常：應用心可舒片治療冠心病并室性早搏患者有較好的臨床療效，能夠改 善此類患者的心率變異性，降低QT離散度，雙向調節自主保護神經，減少惡性心律失常的 發生，改善心肌功能的基礎上改善心律失常。且其不良反應較少，致心律失常作用小，應用 范圍廣泛、安全。三、心可舒片對血流動力學的影響：這與心可舒中的丹參、三七有抑制凝血功能，促進 纖溶系統功能，抑制血小板粘附聚集和血小板III因子，以及延長血清凝血酶原時間作用有 關。動物實驗研究中，王氏等觀察心可舒對犬血流動力學及心肌耗氧量的影響，結果顯示心 可舒可縮短心臟的收縮期，降低心臟前負荷，抑

13、制心肌收縮，延長心舒期。制備工藝研究：一、劑型選擇：選擇片劑是因為其穩定性較好且由于片劑有很多類型，可以滿足同 臨床醫療的需要。特別是薄膜衣片采用IV號胃溶聚丙烯酸樹脂（E u d r a g e E 1 0 0）為薄膜衣成膜材料的包衣方法。并與糖衣片進行了平行比較，其 結果表明：用此方法制成的薄膜衣片，在抗濕性、抗熱性、抗磨損、水分、外 觀等方面均優于糖衣片，增加了片劑的穩定性。工藝設計和工藝路線擬定：山楂、葛根60%乙醇“分流提取 藥液木香、三七粉碎細粉丹參煎煮浸膏濃縮浸膏配料、過篩（LHPC、HPC） 預混v 80目加輔料，制粒，干燥60C整粒過篩v 80目總混碩脂酸鎂干淀粉胃溶聚丙烯酸

14、樹脂包衣最后包裝、入庫以三七、木香的細粉做底料，并將兩種浸膏噴霧干燥3 5-6 0分鐘，制得顆粒加如 潤滑劑、崩解劑混合，壓片并用胃溶薄膜包衣材料包衣既得心可舒片。三、工藝條件篩選（一）原料藥處理工藝條件篩選1、將木香、三七粉碎應選用適宜的粉碎方法，對粉碎機的選用應有一 定的要求，粉末要求有一定得粉碎度，要求制片的細粉能過80100目 篩。2、提取：對于山楂、葛根選用醇提水沉法時有乙醇提取（三次）濃縮加水沉淀山楂、葛根提取液濃縮液C水沉雜質（棄去）醇液（回收乙醇）醇浸膏一加輔料制粒以葛根素為指標成分，對制備過程中各環節（醇提液、濃縮液、醇浸膏 等樣品）有效成分的提取率、損失率、轉移率等進行考查

15、、比較。（1）原料藥材中葛根素含量如下表批號原藥材中葛根素含量C原（ug/g）1305.52311.93322.7（2）醇提液中葛根素含最如卞批號醇提液中葛根素 濃度（ug/g）生藥葛根提取生藥葛根含量提取率D（%）濃度（1唧2）(ug/g)11.4810.44305.52.620.464.6311.91.731.3813.8322.73.040.595.9（3）各工序后葛根素的提取率、轉移率及損失率如下批號物料折成生藥濃度（ug/g） 提取率（）轉移率（）損失率（）1藥液10.4436100藥汁4.583.631.766.0浸膏1.623.610.588.92藥液4.61.8100藥汁0.3

16、771.87.190.6浸膏0.191.83.392.93藥液13.83.4100藥汁4.833.434.565.3浸膏1.723.413.085.64藥液5.9100藥汁0.46110.489.4浸膏0.224.891.8以上實驗數據表明：在浸膏制取過程中，葛根素的提取率是極低的，僅為1.8%3.6%, 濃縮過程中損失高達92%,并且經過各單元操作后轉移率僅為3.3%13%,而在水沉的雜質中去留下不少葛根素，可見此法需要改進。3、浸泡溶媒對實驗結果的影響乙醇濃度5060708090葛根素含量(ug/g)7.313.310.412.513.0從上述町看出60%的乙醇最適合用于提取該物質4、對心

17、可舒片與心可舒膠囊進行比較儀器、試劑和藥品口本島津LC10ATM高效液相色譜儀,SPD-M10AT檢測器,CLASS-VP色譜工作站。乙 睛為色譜純，甲醇、磷酸為分析純，水為超純水，丹酚酸B對照品(批號111562-200302,供定量測定用)由中國藥品生物制品檢定所提供，心可 舒膠囊由山西德元堂藥業有限公司提供，心可舒片由山東沃華醫藥科技股份有限公司提供。方法和結果(2. 1)色譜條件：色譜柱為 ShimadzuShim-packVp-ODS( 250nunX4. 6 min, 5 m);流動相 乙睛-0. 1%磷酸(24 : 76);體積流量:1.0mL/min;進樣量:10 L;檢測波長

18、:286nm。(2.2)對照品溶液的制備：精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75%甲醇制成0. 154mg/ niL 的溶液，即得。(2. 3)供試品溶液的制備：取心可舒膠囊、心可舒片各20粒或片，研細，取約lg,精密稱定, 分別置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50niL,密塞，稱定質 量，超聲處理(功率250W,頻率50kHz) 25mm,放冷，再稱定質量，用75%甲醇補足減失的 質量，搖勻,濾過，取續濾液，即得。(2. 4)陰性對照溶液的制備：取缺丹參藥材的處方量藥材，參照制劑工藝過程制備陰性樣 品，按照供試品溶液的制備操作，即得。(2-5)線性關系考察：取0. 154mg/mL丹酚酸B對照

19、品溶液,分別進樣2、5、8、10、15、20 L, 測定丹酚酸B的峰面積值。以峰面積平均值為縱坐標，質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線, 得回歸方程Y= 144297 , X- 82& 22, r =0. 9999,表明丹酚酸B在0. 3083. 08 g線性關系 良好。(2.6)精密度試驗：稱取批號5002001心可舒膠囊粉末lg,制備供試品溶液，精密吸取供試 品溶液10 L,重復進樣6次，進樣測定丹酚酸B峰面積，結果其RSD為0.41%。(2. 7)重現性試驗：稱取批號5002001心可舒膠囊和批號051014心可舒片粉末各6份，每 份lg,精密稱定，制備供試品溶液，進樣10 L測定，每份兩次

20、，以峰面積平均值計算質量分 數，結果心可舒膠囊和心可舒片中丹酚酸B質量分數的RSD分別為1.02%. 0.98%。(2. 8)穩定性試驗：稱取批號5002001心可舒膠囊粉末lg,制備供試品溶液，精密吸取供試 品溶液10 L,分別在0、2、4、6、8、16、24h進樣測定丹酚酸B峰面積，計算。結果其RSD 為0-57%。表明供試品溶液在24h內穩定。(2. 9)回收率試驗：取批號5002001的心町舒膠囊粉末約0. 5g(含丹酚酸B1.6mg)共6份, 精密稱定。分別按相當于樣品中丹酚酸B質量的80%、100%、120%的質量加入對照品，制 備供試品溶液，進樣測定，計算回收率。結果丹酚酸B的平

21、均回收率為99. 48%, RSD為1. 24%。(2. 10)樣品的測定：分別稱取心可舒膠囊和心可舒片粉末約lg,精密稱定，制備供試品溶 液，精密吸取10 L進樣，測定峰面積，以外標法計算，結果見表4。Table 1 Detenninationof salvianolic acidBinXuikeshuprepai,ations( 11= 3) TOC o 1-5 h z 心可舒膠囊50020013-2350030143.46心可舒片0510149.070604349.570605349.23 (3在進行色譜條件選擇過程中，分別考察了流動相甲醇-乙膳-甲酸-水（30 ： 10 ： 1 ： 5

22、9）、乙膳 -0. 1%磷酸（24 : 76）和不同色譜柱 Hypersil ODS2 柱、Waters Symmetry 柱、 ShimadzuShun-packVp-ODS柱對分離效果的影響。結呆以流動相乙月青-0. 1%磷酸 ShimadzuShim-packVp-ODS色譜柱的分離效果較好。中國藥典2005年版一部丹參藥材項 下選擇75%甲醇為提取溶劑。由于丹酚酸B對熱不穩定，故采用超聲提取，同時輔以循壞水 降溫的方法，考察不同的提取時間（15、25、35、45mm）。結果表明，超聲25mm已能將樣 品中的丹酚酸B提取完全，因此選擇75%甲醇為提取溶劑，超聲提取25mm。5采用TLC法

23、對方中葛根素和丹參酮0A進行定性鑒別，用HPLC法對其進行了含量測定。1儀器與試藥 Agilent 1100全自動液相色譜儀系統；紫外檢測器；超聲波清洗機（上海超 聲波儀器廠）NETTLERAE240電子分析天平；UV- 2401可見-紫外分光光度計。葛根素、 丹參酮對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用）；試驗用水為純化水；甲醇 為色譜純；硅膠G、硅膠H（青島海洋化工有限公司），其余試劑均為分析純。心可舒片為市 場購得；按配方自制陰性對照樣品。2定性鑒別1葛根取本品內容物（約相當于一片的量）加甲醇5nil超聲提取10分鐘，濾過，濾液作為供 試品溶液；同法制備缺少葛根的陰性對照溶液。另取

24、葛根素對照品加甲醇溶解制成 0 2mg nil-1的溶液，作為對照品溶液。吸取上述三種溶液各10 1,分別點于同一以竣甲基 纖維素鈉為黏和劑的硅膠H薄層板上，以氯仿-甲醇冰（7#2 5#0 25）為展開劑，展開，取 出，晾干，置紫外光燈（365nm）卞檢視，供試品色譜圖中，在與對照品色譜相應的位置上, 顯相同顏色的熒光斑點，2 丹參取2 1項下剩余的供試品溶液，水浴蒸干，加醋酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液；取缺 少丹參的陰性對照樣品適量加甲醇5nil超聲提取10分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，加醋酸乙 酯lml使溶解，作為缺少丹參的陰性對照溶液。另取丹參酮0A對照品適量，加醋酸乙酯溶 解制成0

25、2mg nil-1的溶液作為對照品溶液。吸取上述三種溶液各10 1,分別點于同一硅 膠G薄層板上,以苯-醋酸乙酯（19#1）為展開劑，展開，取出晾干，口光卞觀察，供試品色譜 圖中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。3含量測定1 色譜條件 色譜柱：安捷倫SBC18 （ 4 6mm 3 250nmi,5 m）;檢測波長:250mn;流 動相：甲醇-水（85#15）;流速：1 0ml min-1;柱溫：室溫;進樣量：10 1。2 對照品儲備溶液的制備精密稱取葛根素對照品10 5mg,丹參酮DA對照品 10 Omg,分別置于50ml量瓶中，加甲醇溶解并桶釋至刻度，混勻即得。3 3 測定波長

26、的選擇 分別取兩種對照品儲備液各2ml,加甲醇25ml,混勻，在 200400nm波長處進行打描，從吸收光譜圖中看出葛根在250mii波長處有最大吸收；丹參在 250mn波長處有一肩峰，也有較人的吸光度；所以選擇25011111波長作為二者的測定波長。3 4 供試品溶液的制備 取本品10片除去包衣，精稱，研細，稱取細粉適量置具塞三角 瓶中，精密加甲醇501H1,稱重，超聲處理30111111,放至室溫，再稱重，用甲醇補足減失的重量, 濾過，精密移取1ml溶液置1 Onil量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，作供試品溶液。同法制備 除葛根、丹參外的陰性供試品溶液。5系統適應性試驗 在上述色譜條件下，葛根

27、素和丹參酮0A的保留時間分別約為2和13 5,理論塔板數大于2000和3500。陰性供試品溶液對測定無干擾,。3 6 線性關系考察分別取兩種對照品儲備液各1 0, 1 5, 2 0,2 5, 3 Oinl于100ml 量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，作為對照品溶液。在上述色譜條件下測定，并以峰面枳為縱坐 標，以濃度為橫坐標進行線性回歸，葛根素的回歸方程為Y= 75 6334 +42 4504X1-0 9999,表明濃度在0 0021 7) 0063mg ml-1范I制內呈良好的線性關系；丹參酮DA回歸 方程為 Y=1 06S7+ 40 8949X r=0 9997,表明濃度在 0 00200 00

28、60mg ml-1 范憐| 內 呈良好的線性關系。3 7 精密度試驗 取上述一份對照品溶液進樣10 1,重復進樣51857 32776, RSD為 1 1%；丹參酮DA的平均峰面枳為1636 82349, RSD為0 95%,結果表明精密度良好。3 8 重復性試驗 取同一批樣品(031096),分別稱取5份，同3 4項下制備5份供試品溶 液，每份溶液進樣兩次，按外標法計算，含量平均值為葛根素1 128mg片，丹參酮 Al 106mg/ 片,RSD 分別為 1 1%和 1 3%。3 9 穩定性試驗 取同一批樣品(031096)的供試品溶液分別在2、4、6、8、24h進樣，供 試品溶液在24h內基

29、本穩定,6次測定葛根素的平均峰面積為1962 11658, RSD為1 0%;丹 參酮0A的平均峰面積為2019 38757, RSD為1 2%。3 10 回收率試驗 精密稱取已知含量的本品內容物(031096)適量，分別精密加入一定 量的葛根素和丹參酮0A儲備溶液，按供試品溶液制備方法制備并測定，計算加樣回收率, 見表1、2o表1葛根素加樣回收率試驗理論值(mg)加入量mg)測得值(mg)加樣回收率()平均回收率()RSD(%)1.1402.15796.91.0102.03097.11.0321.052.03395397.82.21.0712.133101.11.09923598.7表2丹參酮11A加樣回收率試驗理論值(mg)加入量(mg)測得值(mg)加樣回收