1、精品HE 染色程序1取材與固定：一般取0.5 立方米，基本不用再次修形。置于4% 甲醛溶液中，至少固定24 小時。室溫保存即可。2水洗：視組織塊大小而定。一般與固定時間相等或至少水洗24 小時。3脫水： 70 酒精（過夜或2h ） 80 酒精（過夜或1h ）90 酒精（ 1h ）95 酒精（ 1h ） 95 酒精（ 1h ） 100 酒精 (1h) 100 酒精 (1h) ，梯度酒精脫水注：當酒精濃度逐漸升高時，特別是100% 的酒精，注意觀察組織塊情況，不能脫水脫過了，如果拖過了，切片時，組織易碎。如果水脫的不徹底，則浸蠟時，蠟不能完全浸入，也會影響后期切片。4、透明：二甲苯（ 10min

2、）二甲苯 (10min)。5、浸蠟： 58 1.5-2h（一般用新蠟）6 、包埋：疊好的蠟槽，一般深1cm ，寬 1cm ，長 7cm ，放 4個組織塊為宜。注：包埋一般采用舊蠟，避免產生氣泡。包埋時用來夾取組織塊的鑷子，要同時放在蠟箱里預熱。先向蠟槽內倒蠟，然后用預熱的鑷子夾取浸蠟缸中的組織，放到蠟槽底部，盡量避免漂浮。包埋后，就不要挪動蠟槽了，否則組織漂浮在蠟槽的表面。7、常規切片，一般組織3-5 微米，神經組織切7 微米。展片溫度為 52 攝氏度。撈片時刻直接從95% 的酒精中取載玻片直接撈片，不必擦干載玻片上的酒精。 撈好片后，置于 37 度溫箱恒溫干燥過夜。感謝下載載精品8、 切片脫

3、蠟：二甲苯（ 5min ）二甲苯 (8min) ，9、 水化： 100 酒精（ 1min ） 90酒精 (1min) 80 酒精(1min) 70 酒精 (1min)10、 水洗 2-5min11、 蘇木素染色 15-20min12、 水洗至灰黃色13、 分化： 1% 鹽酸酒精分化 30s 至桃粉色，14、 水洗返藍： 2-3h15、伊紅染色： 15min16 、脫水：70 酒精（10s ）80 酒精（20s ）90 酒精（ 30s ） 95 酒精（ 1min ） 100 酒精 (2min) 100 酒精 (2min) 17 、二甲苯透明：二甲苯（ 5min ）二甲苯 (5min) 18 、中

4、型樹膠封片，鏡檢。相關液體的配制：1、4% 甲醛固定液： 40% 的甲醛溶液 10ml + 90ml蒸餾水，搖勻即可。2、處理載玻片用的鹽酸酒精： 95% 酒精 100ml + 36-38%鹽酸 1 ml搖勻即可。3、分化用1%鹽酸酒精：注：1%鹽酸酒精配制：75% 酒精99ml+36-38%HCL1ml即可。4、二甲苯：無需配制，用商品化得即可。感謝下載載精品5、各個濃度的酒精，均用100% 的酒精或 95% 酒精按比例稀釋配制即可。6、蘇木素的配制：A 液：銨明礬（硫酸鋁按）55 克加蒸餾水至 600mlB 液：蘇木素6 克加 100% 酒精 50ml 混勻C 液：甘油150ml 加甲醇

5、150ml分別配制 A、B、C 液，將 A 與 B 混合過夜，用濾紙過濾后，加入C液，在溫暖有陽光處照射1-2 個月，使染料成熟，方可使用。7、1% 伊紅的配制（水溶性的）：1 克伊紅（曙紅 B）加 100ml 蒸餾水即可，需放置于陽光下成熟一段時間。 一般 500ml 染液中加入 5-6 滴醋酸，可以增強其著色力。HE 染色原理 ;蘇木精染液為堿性 ，主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ，主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。所有化學試劑買“分析純”級別的。甲醛：買回來的都是40% 濃度的，回來自己配成4% 的。二甲苯：買回來的直接用就行，無需配制。無水乙醇：95% 乙醇： 此兩種濃度的酒精，用來配制90% ，80% ，70% 濃度的酒精。感謝下載載精品蘇木素：還有叫蘇木精的。如果買粉末的話，就按上邊給的配方配制，這樣就需要 銨明礬（硫酸鋁按 ）常規藥品，都好買。也有商品化的，買現成的染液，直接就是液體的。伊紅，又有叫曙紅B，（千萬別買錯了，還有叫曙紅Y 的，這個不能用于 HE 染色）。粉末狀的，按上面的配方自己配。也有現成的商品化的染液，就是價格略貴一些。蠟：有國產的，國產的比較便宜。 有進口的。進口的比較貴， 60-100元/kg 價格不等。我們實驗室以前買過