PAGE5-生物技術(shù)有限公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作程序StandardOperatingProcedures版本：V1：A0執(zhí)行日期：2020-05-02共6頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng)目：C-反應(yīng)蛋白方法：膠乳增強(qiáng)免疫比濁法文件編號(hào)XXX-SH-SOP-07-033編寫者日期審核者日期批準(zhǔn)者日期頒發(fā)部門或個(gè)人接收部門或個(gè)人院長(zhǎng)辦公司保管者院檔案室保管者醫(yī)務(wù)科保管者檢驗(yàn)科主任臨床化學(xué)檢驗(yàn)室發(fā)布日期：2020年4月2日實(shí)施日期：2020年4月3日前言為使臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范化，指導(dǎo)檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行正確的常規(guī)操作，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，特制定本操作規(guī)程。本規(guī)程的編寫遵循了ISO15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——關(guān)于質(zhì)量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《

臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫要求》的有關(guān)規(guī)定并結(jié)合產(chǎn)品實(shí)際情況制訂，作為本產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。本規(guī)程從2020年5月2日起實(shí)施，每2年復(fù)審1次。本規(guī)程由浙江生物技術(shù)有限公司編制。本規(guī)程起草單位：生物技術(shù)有限公司技術(shù)部。本規(guī)程主要起草人：XXX、XXX、XXX。本規(guī)程首次起草。XXXX人民醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科2020年4月2日目

錄1檢驗(yàn)申請(qǐng)…………………32標(biāo)本采集與處理…………………………33試劑及成份…………………………44方法原理……….…………45儀器……….……………….…………46校準(zhǔn)液及校準(zhǔn)模式………………………47質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則…………………48標(biāo)本檢測(cè)步驟………….…………………59結(jié)果計(jì)算…………………510操作性能………………511試劑使用的注意事項(xiàng)……………...……512參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平………………………..……513檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍………………………..………514臨床意義……….….……615結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系..……………………..……..……616威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定.…………………..…617有關(guān)引用程序與文件………………..….618參考文獻(xiàn)附錄AXXX型生化分析儀參數(shù)C-反應(yīng)蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清C-反應(yīng)蛋白（CRP）測(cè)定；臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2.標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：2.1.1采血前病人應(yīng)處于安靜、呼吸穩(wěn)定的狀態(tài)，穿刺時(shí)應(yīng)盡量減少病人的疼痛感。坐位與臥位、睡眠后與清醒時(shí)、運(yùn)動(dòng)后與進(jìn)餐后都會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果。生物學(xué)的體液樣本應(yīng)該以同樣的方式來(lái)收集，以便用來(lái)測(cè)試任何實(shí)驗(yàn)室中的試驗(yàn)。新鮮的、剛被抽出的血清或血漿樣本是最佳的選擇。2.2標(biāo)本采集2.2.1除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘，穿刺成功后立即松開(kāi)止血帶，不抗凝，置普通試管中。或采用含分離膠的黃色蓋子SST真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子PST試管。2.2.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.2.3標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識(shí)。2.2.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.2.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.2.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.2.5.2對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、黃疸和渾濁的標(biāo)本。2.2.5.3對(duì)無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.2.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。對(duì)不合格標(biāo)本應(yīng)退回重采，并填寫記錄。2.2.5.5對(duì)不合格標(biāo)本應(yīng)退回重采，并填寫記錄。2.3標(biāo)本處理2.3.1接收標(biāo)本在30min內(nèi)離心分離血清或血漿。吸出血清/血漿。處理樣品時(shí)要將其當(dāng)成生物污染品。2.3.2標(biāo)本保存：分離的血清或血漿在15℃到30℃的環(huán)境下保存不應(yīng)該超過(guò)8小時(shí)。假如測(cè)試無(wú)法在8小時(shí)內(nèi)完成時(shí)，血清或血漿應(yīng)該被保存在2℃-8℃的環(huán)境中；假如測(cè)試無(wú)法在48小時(shí)內(nèi)完成，或分離的樣本無(wú)法儲(chǔ)存超過(guò)48小時(shí)，樣本應(yīng)該冰凍在-15℃～-20℃的環(huán)境中。冰凍的樣本只能解凍一次，避免反復(fù)凍溶。有時(shí)分析物產(chǎn)生降低或惡化的情形多半是因?yàn)橹貜?fù)冰凍及解凍的原因所造成。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1d的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.3.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置2～8℃冰箱內(nèi)保存7d。2.4標(biāo)本的注意事項(xiàng)2.4.1不建議采集抗凝標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是EDTA。2.4.2標(biāo)本采血管應(yīng)該一直保持垂直、塞住的姿勢(shì)。血清或血漿應(yīng)該立即被分離，避免接觸到血球部分。從采血到上機(jī)的最長(zhǎng)時(shí)間限制是2小時(shí)。2.4.4血清標(biāo)本出現(xiàn)溶血、脂血、黃疸或抗壞血酸的干擾情況參見(jiàn)抗干擾能力。3.試劑及成份3.1試劑本科使用的CRP檢測(cè)試劑盒，由浙江生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),產(chǎn)品貨號(hào)為:XXX,試劑為液體試劑，其組份如下：組成主要成份濃度R1Tris緩沖液100mmol/L聚乙二醇50g/LR2羊抗人CRP抗體適量表面活性劑25mmol/L3.2試劑盒保存及效期未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲(chǔ)存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉(cāng)冰箱內(nèi)穩(wěn)定28d。開(kāi)蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。新打開(kāi)試劑不宜與已用過(guò)的試劑混合在一起,否則易造成試劑穩(wěn)定性下降。3.3試劑盒準(zhǔn)備液態(tài)試劑型，即開(kāi)即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。4.方法原理4.1測(cè)定方法：終點(diǎn)法。4.2原理：樣品中CRP與試劑中相應(yīng)的抗體在溶液中相遇，立即形成抗原—抗體復(fù)合物，并形成一定濁度。該濁度的高低在一定量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比。通過(guò)與同樣處理的校準(zhǔn)液比較，計(jì)算未知樣品中的CRP含量。5.儀器XXXX型號(hào)儀器。6.校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式6.1校準(zhǔn)品：使用CRP標(biāo)準(zhǔn)液或復(fù)合標(biāo)準(zhǔn)液。其中包含CRP的定值。6.2標(biāo)準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，5點(diǎn)校準(zhǔn)。6.3校準(zhǔn)周期：全點(diǎn)定標(biāo)：①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須需要全點(diǎn)定標(biāo)。7.質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則7.1質(zhì)控品采用由XX公司提供的兩個(gè)不同水平定值質(zhì)控血清。7.2質(zhì)控液重建方法：用XXXml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。7.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定至少兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。7.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開(kāi)始標(biāo)本檢測(cè)。8.標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測(cè)定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。△A測(cè)定△A測(cè)定血清CRP濃度（mg/L）△A標(biāo)準(zhǔn)＝Χ△A標(biāo)準(zhǔn)式中：△A測(cè)定——標(biāo)本管吸光度；△A標(biāo)準(zhǔn)——標(biāo)準(zhǔn)管吸光度；C——校準(zhǔn)血清中CRP濃度（mg/L）；10.操作性能10.1精密度：批內(nèi)CV≤4％，批間相對(duì)極差CV≤8％。10.2準(zhǔn)確度：測(cè)量結(jié)果在質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請(qǐng)確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。10.3線性范圍：0～60mg/L（血清與試劑用量之比為1:175時(shí)）10.4方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響。11.試劑使用的注意事項(xiàng)11.1本試劑僅應(yīng)用于體外診斷。11.2扔棄廢物應(yīng)符合當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)要求。12.參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：0~10mg/L13.檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍13.1結(jié)果的報(bào)告13.1.1結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。13.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。13.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。13.2報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為1:175時(shí)，測(cè)定上限為60mg/L。超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，并經(jīng)上級(jí)主管技師審核后報(bào)告。14.臨床意義14.1CRP是急性時(shí)相蛋白的一種，在感染性和非感染性炎癥時(shí)的各種非特異性反應(yīng)中血液中的CRP水平升高，包括心血管疾病和周圍血管病等。14.2正常時(shí)血漿中含量極低，各種疾病狀態(tài)導(dǎo)致組織損傷、感染或炎癥時(shí)，在急性事件作的4~8h內(nèi)CRP水平可急劇升高至20~500mg/L。14.3如果將CRP用于評(píng)價(jià)冠心病和周圍血管病的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)將CRP測(cè)定結(jié)果與以前的結(jié)果作比較。14.4對(duì)于指示急性炎癥來(lái)說(shuō)，CRP比血沉（ESR）和白細(xì)胞計(jì)數(shù)的意義更好，上升更快而在治愈時(shí)迅速回落至參考值。15.結(jié)果審核分析以及相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與其他免疫球蛋白、急性時(shí)相蛋白關(guān)系。如出現(xiàn)與臨