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僅供個人參考實十

血膽醇定(固氧酶)膽固醇的測定方很多;通??煞譃榛瘜W試劑比法、酶法、氣相色譜法、高效液色譜法、核素稀質譜法五大類?;瘜W試劑比色中有直接法和間接法;前者可用清直接測定者用溶劑或其它方法提取膽醇后再作定量法于操作簡便結果準確,試劑無腐蝕性,且因使用特異性酶,大大減少血液中其它成分的干擾,目前已為測定膽固醇的主要法?!灸俊?.了解膽固醇氧化酶法測定血清膽固醇的原理,能進行血清膽固測定的操作。2.掌血清膽固醇測定的臨床意義。【原】血清中總膽固(TC包膽固醇(CE)游離型膽固醇FC),型占70%游離占30%膽固醇酯酶CEH先將膽固醇酯水解為固醇和游離脂肪酸FFA固醇在膽固醇氧化酶()的作用下氧化成膽甾酮和過氧化氫。后者經過氧化物酶()催化氫與4-氨基安替比林4-AAP)和酚反,生成紅色的醌亞胺,其顏色淺與膽固醇的含量呈正比,500nm波處測定吸光度,與標準管比較可計算出血清膽固醇含量。反應式如下:【器】試管、吸管、試架、微量加樣器、恒溫水浴箱分光光度計?!驹嚒棵阜y定膽固醇采用市售試劑盒。1.應用液膽醇酶試劑的成為:磷酸鹽緩沖液50mmol/L膽固醇酯酶≥200U/L膽固醇氧化酶≥100U/L過氧化物酶≥000U/L4-氨基安替比林0.3苯酚5mmol/L此外還含有膽酸和Triton,膽酸鈉是固醇酯酶的激活劑,表面活性TritonX-100能促進脂白釋放膽固醇和膽固醇酯,有于膽固醇酯的水解。不得用于商業(yè)用

僅供個人參考2.5.17mmol/L(200mg)膽固醇標準液精確稱取膽固醇200mg溶無水乙醇移入100ml量瓶中用無水乙醇釋至刻度(也可用異丙醇等配制?!静佟咳≡嚬?支,編,按下操作。表3-15酶測定清固醇作驟加入物ml)血清膽固醇標準液蒸餾水酶應用液

測定管0.02--2.00

標準管-0.02-2.00

空白管--0.022.00混勻后℃水浴保溫15分,在500nm波處比色,以白管調零,讀取各管吸光度?!舅恪疽忭?.疸血清過高的膽紅素可還原—部分反應中的HO,低顯色反應,使結果偏低。但測定膽固醇,紅素對酶法的干擾比化學法小2.膽固醇標準液引起的誤差較大,故目前提倡采用膽固醇定值清為標準。3.輕溶血對測定結果無影響,但顯溶血可使結果增高,此時用一個不加COD的空白管從結果減去后糾正。4.它影響因素,如維生素C、胱甘肽、氟化物引起偏差?!境?紘?.10~5.70mmol/L【床義1.清膽固醇增高常見于動脈粥樣硬化、原發(fā)性高脂血癥、糖尿病、腎病綜合征、膽管阻塞、甲狀功能減退。2.清膽固醇降低常見嚴重貧血、甲狀腺功能亢進、長期營養(yǎng)不良等?!竟帧俊究肌?.膽固醇有哪些重要的生理功能,血清膽固醇升高對機體最嚴重危害是什么?2.膽固醇在體內可轉變?yōu)槟男┪镔|,如何排泄?不得用于商業(yè)用

僅供個人參考3.實驗中需要哪幾種酶參加,各有什么作用?不得用于商業(yè)用

僅供個人參考僅供個人用于學習、究;不得用于業(yè)用途。Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;notforcommercialuse.Nurfürdenpers?nlichenfürStudien,Forschung,kommerziellenZweckenverwendetwerden.Pourl'étudelarechercheuniquementàdesfinspersonnelles;pasàdesfinscommerciales.толкдлялюдей,котореиспо

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