電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網址：本產品僅供科學研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質檢測技術有限公司第第頁ABTS自由基清除能力檢測試劑盒說明書貨號：UPLC-MS-4571規格：100T/48S

微量法產品內容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系工作人員。試劑名稱規格保存條件提取液液體80mL×1瓶2-8℃保存試劑一液體40mL×1瓶2-8℃保存試劑二粉劑×1支2-8℃保存試劑三液體20μL×1支2-8℃保存試劑四液體1.5mL×1支-20℃保存試劑五粉劑×1支2-8℃保存溶液的配制：1、試劑二：臨用前加入1mL蒸餾水，充分溶解；用不完的試劑可分裝后保存，-20℃可保存四周，避免反復凍融；、試劑三工作液的配制：液體置于試劑瓶內EP管中。臨用前根據樣本量按試劑三（μL）：蒸餾水（mL）=1μL:12mL的比例配成試劑三工作液，現用現配，用多少配多少，盡量在4h之內用完；3、試劑四工作液的配制：可先將試劑四-20℃分裝保存。臨用前根據樣本量按試劑四：試劑一（V:V）=1:9的比例配成試劑四工作液，現配現用，用不完的試劑放于-20℃可保存兩周。45mgC2.8mL提取液，充分振蕩溶解；10mmol/LC溶液，用于陽性對照。2-8℃可保存兩周。5ABTS（V:V:V）=76:5:4的比例ABTS工作液，現用現配，室溫避光保存，30分鐘內使用。產品說明：ABTSABTS經氧化后生成穩ABTS405nm734nmABTSABTSnmABTS自由基的能力。ABTS

H2O2

ABTS·+(405nm)

Antioxidants

ABTS注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。需自備的儀器和用品：可見分光光度計//96/30~50目篩、冰、蒸餾水。操作步驟：一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）160℃（或粉碎機粉碎30~500.05g1mL40℃30min；10000rpm10min，取上清，置于冰上待測。2、紅酒、果汁等液體樣本：吸取100μL樣本溶液加入900μL提取液，旋渦振蕩混勻，室溫10000rpm離心10min，取上清，置冰上待測。3、提取物或者藥物：可用提取液配制成一定濃度，如5mg/mL。注意：ABTS自由基的能力可能相差很大，為保證實驗結果的準確性，樣本要根據預實驗結果進行適當調整（90%5%，建議加大烘干樣本質量或液體樣本體積進行提取。二、測定步驟分光光度計/30min405nm，分光光度計用蒸餾水調零。序號稀釋前濃度（mmol/L）C（μL）提取液體積（μL）稀釋后濃度（mmol/L）110100900121160400.831120800.641801200.451401600.26序號稀釋前濃度（mmol/L）C（μL）提取液體積（μL）稀釋后濃度（mmol/L）110100900121160400.831120800.641801200.451401600.261201800.1備注：實驗中每個標準管需10μL維生素C溶液。96EP管中分別加入下列試劑：試劑名稱（μL）空白管測定管對照管陽性對照管上清液-1010-不同濃度的VC溶液10蒸餾水10試劑四工作液2020-20ABTS工作液170170-170試劑一--190-6min405nmA空白、A測定、A對照、A陽性1-2次。三、ABTS自由基清除率的計算陽性對照的自由基清除率計算公式：ABTS自由基清除率DVC%=[(A空白-A陽性對照)÷A空白]×100%。樣本的