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文檔簡介
第一章動物胚胎技術:以動物生殖細胞和胚胎為主要研究對象,以生物科學為基礎,研究調控和提高動物繁殖力的一門學科第二章精細管上皮周期:某個特定時間有一個特定的細胞組合,然后間隔一段時間后,在同一橫斷面又會出現相同的細胞組合精細管上皮波:從精細管縱切面上看,細胞組合也是有規律的出現,即沿著縱切面每間隔一段距離會觀察到相同的細胞組合促性腺激素釋放激素(GnRH)促卵泡素(FSH)促黃體素(LH)催產素(OXT)催產素和精氨酸加壓素(AVP)表皮生長因子(EGF)胰島素樣生長因子(IGF)轉化生長因子β(TGF-β)轉化生長因子α(TGF-α)膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)干細胞因子(SCF)精子:有頭部、頸部、尾部組成,精子的形態的差異主要在頭部卵泡:分為原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡、三級卵泡征集:生長卵泡池中一群小卵泡開始迅速生長選擇:只有部分被征集的卵泡繼續發育,以致最終確立優勢卵泡的過程優勢化:優勢卵泡迅速發育而其他同時被征集的卵泡的生長和發育被抑制自發排卵:卵泡成熟后不需外界刺激即可排卵和自動形成黃體誘發排卵:動物經過交配或人為刺激子宮頸才能引起排卵。旁分泌:某種組織內一種類型的分泌的活性物質作用于同一組織中另一類型細胞,調節其功能、生長和分化自分泌:某種細胞的因子作用于同一類型的細胞或自身細胞的現象第三章獲能:動物剛射出的精子不能穿入卵子,只有在雌性生殖道內經歷一段時間,在形態和生理上發生一系列變化,才具備受精能力的生理現象。去能:獲能精子一旦與漿液和附睪液接觸,已獲能的精子就會失去授精能力發生泡破裂:卵細胞成熟后,這一時期細胞核的變化包括兩個銜接的過程早期胚胎發育階段:1、卵裂2、桑椹胚3、囊胚4、胚胎的原腸化胚胎的擴張或伸長6、胚胎遷移和分布附植時間:1、人(8~13d)2、家兔(7d)3、豬(13d)第五章同期發情:對群體母畜采取措施,使之發情相對集中在一定時間范圍的技術同期發情的意義:1、有利于推廣人工授精,促進家畜品種改良2、便于組織和管理生產,節約配種經費3、提高低繁殖率畜群的繁殖率4、作為其他繁殖技術和科學研究的輔助手段5、用于培訓人工授精技術人員和啟動一個地方的牛品種改良工作同期發情的原理:母畜的一個發情周期中,黃體期約占整個發情周期的70%,黃體分泌的孕酮對卵泡發育成熟有很強的抑制作用,只有黃體消退后,孕酮下降,卵泡才能發育至成熟階段,母畜才能表現發情。因此,控制母畜黃體的消長,是控制母畜發情的關鍵控制黃體消長的途徑有兩個:1、人為的制造黃體期2、消除黃體牛的同期發情處理:1、孕激素埋植物理植法2、孕激素陰道栓法3、PGF2α一次注射法4、PGF2α兩次用藥5、PGF2α結合孕激素處理影響同期發情效果的因素:1、處理牛的質量和牛的生殖狀況2、所用藥品的質量3、處理方案的選擇4、所有精液的質量5、適當的處理時間6、輸精人員的技術水平7、配種后母牛的飼養管理第七章胚胎移植:也稱受精卵移植和借腹懷胎。將體內、外生產的哺乳動物早期胚胎移植到另一頭同種的生理狀態相同的雌性的生殖道內,使之繼續發育成為新個體。胚胎移植的意義:1、充分發揮優良母畜的繁殖潛力,提高繁殖效率2、縮短世代間隔,加快遺傳進展3、誘導肉畜懷雙胎,提高生產效率4、代替種畜的引進5、保存品種資源6、使不孕母畜獲得生殖能力7、防疫需要8、研究手段胚胎移植的生理學基礎:1、母畜發情后生殖器官的孕向發育2、早期胚胎的游離狀態3、胚胎的遺傳特性4、生殖道對移植胚胎的免疫耐受性胚胎移植的基本原則:1、胚胎移植前后所處環境的同一性(同一物種、生理一致、解剖部位一致)2、胚胎發育的期限3、胚胎的質量3、供受體的狀況(生產性能和經濟價值、全身及生殖器官的生理狀態)胚胎移植技術程序:1、超數排卵技術(供、受體選擇,供、受體同期發情處理,超數排卵,供體的配種)2、胚胎采集技術3、胚胎鑒定與保存技術、胚胎的移植技術超數排卵:在母畜發情周期的適當時間,施以外源性促性腺激素,使卵巢中比自然情況下有較多的卵泡發育并排卵用于超排的主要激素:1、FSH2、PMSG3、前列腺素(PGF2α)4、促黃體生成素(LH)5、孕激素6、促性腺激素釋放激素(GnRH)超排方法:1、牛(FSH+PGF2α法、FSH+孕激素+PGF2α法、FSH+CIDR+E2+P4法、PMSG法、PVP+FSH法)2、綿羊(FSH+PG法、FSH+孕激素+PGF2α法、PMSG法、PVP+FSH法)3、山羊(FSH+PGF2α法、FSH+孕激素+PGF2α法、PVP+FSH法)4、豬(PMSG)胚胎的采集方法:1、手術法采卵(輸卵管采卵法、子宮角采卵法、輸卵管—子宮角雙沖洗法)2、非手術法采卵胚胎發育期的劃分和特征:1、桑椹胚2、致密桑椹胚3、早期囊胚4、囊胚5、擴張囊胚6、孵化囊胚胚胎的分級:1、A級2、B級3、C級4、D級胚胎的移植:1、手術移植2、非手術移植影響胚胎移植妊娠率的因素:1、胚胎因素(胚胎的質量、胚胎發育階段、移植胚胎的數量、提供胚胎的供體、胚胎在體外停留的時間、鮮胚和凍胚)2、母體因素(供、受體發情同期化程度、受體的孕酮水平、移植黃體同側與對策、移植部位、受體的營養、受體子宮、卵巢的生理狀況等)3、其他因素(自然發情與人工誘導發情、移植法、移植器械污染程度以及操作者的熟練程度)胚胎移植存在的主要問題:1、盡管體外受精技術的發展為胚胎來源提供了新的途徑,且成本降低,但這些胚胎不能作為種用2、胚胎移植就其性質是家畜群體水平的一種生物技術,遠比人工授精復雜3、胚胎移植是一個復雜而細致的完整的系統工程,它有許多操作環節所構成,它們有嚴格的系統性和連續性,要求所有步驟和細節準確無誤,一步出了問題就會造成嚴重后果,甚至前功盡棄4、進行胚胎移植費用高,人力和時間耗費多,需要的物質條件較嚴格,這也制約著它的開展和推廣5、羊、豬胚胎采集和移植大都采用手術方法,不僅易造成粘連,而且操作也不便第八章胚胎冷凍保存的意義:1、適應胚胎移植產業化2、便于胚胎運輸3建立動物基因庫抗凍保護劑:1滲透性抗凍保護劑(丙三醇、二甲基亞砜、丙三醇、乙二醇和乙酰胺)2、非滲透性抗凍保護劑(蔗糖、聚蔗糖、葡聚糖、牛血清蛋白、胎牛血清、聚乙烯乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮)胚胎的保存方法:1、異種活體保存2、低溫保存3、冷凍保存(慢速冷凍法、玻璃化冷凍法)4、常溫保存法卵母細胞的冷凍保存法:1、慢速冷凍法2玻璃化冷凍法(細管法、微滴法、電子顯微鏡銅網法、開放式拉長塑料細管法和玻璃微細管法、冷凍環法)體外受精:哺乳動物的精子和卵子置于適宜的培養的培養條件下使之完成受精的一種技術。體外受精過程:1、卵母細胞的采集與培養2、精子的采集與獲能3、受精4、胚胎的早期培養卵母細胞的采集方法:1、離體采集(卵泡抽吸法、卵巢解剖法)2、活體采集(腹腔鏡法、B型超聲波法)胚胎的體外培養系統:1、常規培養系統2、輸卵管的離體培養3、與體細胞共培養影響胚胎體外發育的其他因素:1、培養溫度2、氣象環境3、培養液體積與胚胎數量的比率性別:有遺傳信息交換和重組所決定的。它伴隨著有性生殖的出現而表現,并且在生物界同種個體之間普遍存在的一種形態和生理上的差異現象。性別控制:通過人為的干預并按人們地愿望使雌性動物繁殖出所需性別后代的一種繁殖新技術。性別決定:雌雄異體生物決定性別的方式,是遺傳、環境和生理因素相互作用的結果。性別決定存在著多種多樣的機制,一般可分為染色體決定和非染色決定兩種類型。流動細胞檢索分離法:1、分離精子的理論基礎2、精子分離效率3、精子分離后的人工授精4、精子分離后的體外受精5、精子分離技術在人臨床上的應用6、精子分離技術在畜牧業上的應用受精后的性別控制:1.、性染色質鑒定法2、染色體組型鑒定法3、雄性特異抗體鑒定法4、分子生物學方法嵌合體:由基因型不同的細胞構成的復合體。把在同一個體中由基因型不同的細胞和組織相互接觸,且各自獨立并存的狀態,稱為嵌合體嵌合體研究的意義:1、在發育生物學、細胞生理學和細胞遺傳學的研究中具有重要的作用2、可用于免疫反應或作為疾病模型,開展以治療遺傳疾病為目的的研究3、創造出自然條件下完全不能發育的異種間雜種4、獲得新的毛皮花色類型,以提高毛皮的商品價值嵌合體的應用前景:1、發育生物學領域2、生理機能的研究3、產業上應用展望胚胎干細胞的分離培養的基本程序:1、胚胎或胎兒材料的選擇和處理2、選擇抑制細胞分化的培養體系3、胚胎干細胞的分離4、胚胎干細胞的保存5、胚胎干細胞的鑒定胚胎干細胞的來源:1、囊胚2、胎兒性腺脊胚胎干細胞技術的發展方向:1、ES細胞維持自我更新和定向分化的分子機理2、ES細胞治療技術的研究3、ES細胞作工具探討基因功能和個體的發生發育4、ES細胞治療中的免疫排斥問題5、治療型克隆技術6、分離ES細胞新途徑的研究7、用ES細胞生產轉基因家畜克隆:即無性繁殖的意思。動物克隆是指動物不經過有性生殖的方式而直接獲得與親本具有相同遺傳物質的后代的過程,包括孤雌激活生殖、卵裂球分離與培養、胚胎分割以及核移植等胚胎分割的方法:1、Williams分割法(用顯微外科刀從固定點的對面切割,將胚胎一分為二,其中一枚半胚移入備用的透明帶內,隨后將分割胚胎移植給受體家畜)2、Willadsen分割法(將早期胚胎手術法取出后,用顯微吸管固定,用顯微玻璃針切開透明帶,分裂卵裂球,并分別移入準備好的透明帶內)3、徒手切割法4、酶消化透明帶顯微玻璃針分割法(用玻璃針直接分割)胚胎分割存在的問題:1、體重(如果在妊娠期間胚胎的細胞數或細胞大小不能得到正常修復,則生下的后代出生重可能會減半)2、毛色和斑紋(胚胎在發育過程中細胞不斷的增值分化,致使分割胚胎的細胞之間出現差異。這種差異將影響動物成形后的表型性狀)3、異常與畸形:把一個發育中的且每個胚胎細胞已明確定位的胚胎等分為二,會因為某種原因使其中的一方發生變性而死亡或成為高度畸形的胎兒胚胎分割的應用前景:1、生產同卵雙胎或多胎2、使可用胚胎數倍增3、便于后裔測定4、便于胚胎的性別鑒定細胞核移植的方法:1、供體細胞的準備2、受體卵母細胞的準備(盲吸法、“半卵法”、熒光引導去核法、微分干涉和極性顯微鏡去核法、功能性去核法、離心去核法化學試劑去核法、末期去核法)3、注核4、供體細胞與卵母細胞的融合5、重構胚的激活6、重構胚的培養、7、繼代細胞核移植轉基因技術:通過人為方法導入外源DNA或敲除受體基因組中的一段DNA,使動物的基因型和表現型發生變化,并且這種變化能遺傳給后代的一門生物技術轉基因技術的應用:1、在基礎生物學中的應用(借助轉基因動物模型人們有可能將分子、細胞、組織器官幾個體的發生、發育和衰老統一起來,從時間和空間的角度綜合研究基因的表達調控規律)2、在醫學研究中的應用(a、制備動物疾病模型,研究人類遺傳病的發生發展規律,制定最佳的治療方案b、研究癌基因的活動規律和腫瘤的發病機理c、研究淋巴細胞的發育規律和淋巴因子的作用機理,藥物毒性的檢測)3、在動物生產中的應用(a、把生長因素或生長因子基因導入家畜基因組中,加快生長速度,提高飼料報酬,改善酮
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