1、課前復習1.天然藥物化學研究內容（ ）A 化學成分物理化學性質B 提取分離方法C 結構類型及特點D 結構鑒定E 生物合成的途徑多選ABCDE2.生物合成的基本結構單元有（）A C2B C5C C6C3D 吲哚C2NE C5NABCDE3.生物合成的途徑有（）A AA-MA途徑B MVA和DXP途徑C 莽草酸途徑D 氨基酸途徑E 復合途徑ABCDE4.天然藥物主要成分生物堿通過何種途徑合成（ ）A AA-MA途徑B MVA和DXP途徑C 莽草酸途徑D 氨基酸途徑E 復合途徑D單選第三節 提取分離方法（Extract and isolate）提取分離提取分離前準備所用材料基源（動、植物拉丁學名）產

2、地藥用部位采集時間與方法系統查閱文獻樣品性質方法的選擇溶劑的性質一、天然藥物有效成分的提取溶劑提取法 水蒸氣蒸餾法 升華法提取溶劑選取原則對所提取成分溶解度大，對雜質溶解度小不與提取成分起化學變化經濟、易得、使用安全 石油醚二硫化碳四氯化碳三氯乙烯苯二氯甲烷乙醚三氯甲烷乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇甲醇乙腈水吡啶乙酸溶劑極性：（2）滲濾法優點： 新鮮溶劑缺點： 溶劑消耗量大（3）煎煮法（4）回流提取法缺點： 溶劑消耗量大（6）超臨界流體萃取技術（supercritical fluid extraction SFE)超臨界流體： 物質處于臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上狀態時，成為單一相態，此種單

3、一相態稱為超臨界流體。（6）超臨界流體萃取技術（supercritical fluid extraction SFE) 在超臨界狀態下，將超臨界流體與待分離的物質接觸，通過控制不同的溫度、壓力下以及不同種類及含量的夾帶劑，使超臨界流體有選擇地把極性大小、沸點高低和分子量不同成分依次萃取出來。（6）超臨界流體萃取技術（supercritical fluid extraction SFE) 超臨界流體 CO2、N2O、C2H6 夾帶劑：甲醇、乙醇、乙腈、丙酮 優點及局限性無殘留安全低溫溶解性夾帶劑極性成分循環利用連用31萃取柱玻璃珠脫脂棉CO2鋼瓶PCO2冷溫槽恒溫箱流量計接收瓶小試實驗裝置圖（7

4、）超聲波提取技術超聲波提取: 采用超聲波輔助提取溶劑進行提取的方法。空化現象（7）超聲波提取技術 薯蕷皂苷 70%乙醇 48h 20kHz 30min（8）微波提取法 波長：0.1-100cm1）原理：吸收性、反射性、穿透性 極性物質吸收與非極性物質穿透性2）影響因素 溶劑、粒度、用量（二）水蒸氣蒸餾法 揮發油多用此法，要求能揮發、與水不混溶、遇熱穩定。（三）升華法： 氣態 固態 如樟木中樟腦的提取。 *二、分離與精致方法（一）根據物質溶解度差別 1.結晶與重結晶2.改變混合溶劑的極性水/醇法：水提液+醇（數倍） 多糖、蛋白質除去。醇/水法：醇提液+水（數倍） 葉綠素、油脂除去。醇/醚法 醇/

5、丙酮 ： 皂苷除去3.改變pH值酸性化合物 + 加堿 成鹽 加酸 沉淀（堿提酸沉）堿性化合物 + 加酸 成鹽 加堿 沉淀（酸提堿沉）黃酮、蒽醌、香豆素、酚酸類生物堿類4142 4.金屬鹽絡合法： pb2+、 Ca2+ 等金屬離子可與酸、堿性化合物生成不溶于水的沉淀。 苦味酸、苦酮酸與生物堿成鹽加無機酸分解專屬試劑沉淀法雷氏銨鹽生物堿類分級沉淀法分次加入乙醇，逐級蛋白質、多糖、多肽等。鹽析法加入易溶于水的無機鹽46（二）根據化合物在兩相溶劑間分配比差別：1.液-液萃取法與分配系數 K：K=Cu/CLK ：分配系數Cu：溶質在上相中濃度CL：溶質在下相中濃度例： 假定A、B兩種溶質用CHCI3及H

6、2O進行分配，MA=MB=1.0g,KA=10KB=0.1,V CHCI3/VH2O=1。91%分配在H2O中，9%分配在CHCI3一次分配達到91%的分離2.分離難易與分離因子：1001001021一次10-12次100次以上無法分離：A、B兩種溶質在同一溶劑系統中分配系數的比值。3.分配比與pH 對于酸、堿及兩性化合物，pH改變可使存在狀態改變，如酸性化合物： HA H2O H30+ +A- Ka=H30+ A- /HA兩邊取負對數 pH= pKa + log A- /HA 若全部解離，則 pH= pKa+2 若全部游離，則 pH= pKa2同理，對于堿性化合物：B+H20 BH+ +OH-Kb=BH+ OH- /BPKb=-lgKbPKb= lgKb+ BH+ /BBH+ +H2O B+H30+Ka=BH30+/BH+pH=pKa+B/BH+討論：若全部解離，則 pH= pKa 2若全部游離，則 pH= pKa + 2 共軛酸的解離：一般 pH12，酸性物質解離狀態(A-)， 堿性物質呈非解離狀態(B)。4.液-液萃取與紙色譜確定分離因子K有機相/水相 = 分離因子= 5. CCD法（Counter current distribution， 逆流分溶法）：0 1 2 3 n CCD法的分離過程示意圖適宜于中等極性、不穩定物質的分離。 6.DCCC（液滴逆流色譜）多