1、結(jié)合疫苗質(zhì)量把握和臨床爭辯技術(shù)指導(dǎo)原則前 言以蛋白為載體的細菌多糖類疫苗是指承受化學方法將多糖共價結(jié)合在蛋白載體上所制備成的多糖-蛋白結(jié)合疫苗，用于提高細菌疫苗多糖抗原的免GMP批準或認可。本原則適用于多糖-蛋白結(jié)合疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量把握和臨床爭辯。可最大限度地把握和避開危害人身和環(huán)境的安全。一、結(jié)合疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量把握原則一多糖抗原生產(chǎn)的質(zhì)量把握 列分析等特別鑒定方法。源性材料。細菌生長的均一性。劃線接種培育等。假設(shè)覺察染有雜菌應(yīng)廢棄。精制純化多糖：精制純化多糖應(yīng)逐批進展鑒別試驗、純度和分子大小測20以下儲存精制純化后的多糖，以維持其穩(wěn)定性。為把握精制純化多糖的質(zhì)量所進展的測定包括：鑒別試驗：通常

2、應(yīng)用血清學反響進展多糖鑒別試驗；分子大小分布：應(yīng)承受凝膠過濾或高效液相色譜HPLC等適宜方法測定純化多糖的分子大小分布，并建立相應(yīng)的KDKD 值應(yīng)保持全都；承受凍干保存的純化多糖,其水分含量應(yīng)合格；量測定和核糖含量測定等方法；BCA質(zhì)的含量，應(yīng)同時承受相應(yīng)的國家標準品作蛋白測定比照；質(zhì)含量；及內(nèi)毒素含量；修飾處理后的多糖：多糖與載體蛋白結(jié)合前通常需先經(jīng)化學修飾，即活例如可承受溴化氰活化多糖的分子大小分布，以確保多糖蛋白結(jié)合反響的批間全都性。二載體蛋白的質(zhì)量把握的質(zhì)控原則一樣。結(jié)合疫苗常用的載體蛋白包括有：破傷風類毒素、白喉毒素無毒變異蛋白B量指標應(yīng)符合現(xiàn)行版中國藥典的要求，尤其要留意確保載體蛋

3、白的純度。承受國外已通過臨床試驗驗證的安全有效的 CRM197 蛋白、B 群腦膜炎球菌1HPLCCRM19790% 以上；應(yīng)確保CRM197生產(chǎn)，應(yīng)建立能區(qū)分CRM197 蛋白和白喉毒素的方法，并應(yīng)符合中國藥品GMP2SDS-B8%；家兔熱原試驗應(yīng)合格。合其自身特點建立相應(yīng)的質(zhì)量標準，并進展嚴格的質(zhì)量檢測和復(fù)核。SDS- 圖譜分析、等電聚焦分析、HPLC法，以確保批與批之間的全都性。三多糖-蛋白結(jié)合物原液的質(zhì)量把握不同的結(jié)合疫苗可能承受不同的多糖-蛋白結(jié)合工藝，但均需要進展多步反響單價結(jié)應(yīng)進展多糖的鑒別試驗。此外，還應(yīng)對純化后的多糖-蛋白結(jié)合物進展以下檢測：應(yīng)承受適宜的檢測方法，確證多糖-蛋白

4、結(jié)合物原液經(jīng)過純化后，多糖- 假設(shè)化學結(jié)合反響產(chǎn)生了獨特的結(jié)合標志例如某一獨特的氨基酸，/蛋白比作為推斷結(jié)合反響的一個間接標志； 未結(jié)合的功能基團； 方法包括沉淀、凝膠過濾、超濾或超離等方法；未結(jié)合蛋白的含量；多糖/蛋白比：分別測定結(jié)合物中結(jié)合多糖和結(jié)合蛋白的含量；結(jié)合的多糖、蛋白區(qū)分開；無菌試驗應(yīng)合格；結(jié)合物中載體蛋白的毒性試驗：假設(shè)承受破傷風類毒素和白喉類毒素作類毒素和白喉類毒素的毒性試驗；可對結(jié)合物進展熱原試驗及內(nèi)毒素含量測定。合格。五成品的質(zhì)量檢定 無菌試驗：成品中不得檢出細菌或真菌等微生物；多糖含量：可承受化學顯色、色譜分析包括HPLC或符合國家規(guī)定的免疫學方法ELISA進展測定；水

5、分應(yīng)不超毒素含量：可承受家兔熱原試驗或鱟試驗定量測定內(nèi)毒素含量；佐劑含量：假設(shè)疫苗使用了佐劑，應(yīng)承受適宜的方法檢測成品中佐劑的1.25mg；防腐劑含量：選擇防腐劑時應(yīng)當考慮防腐劑的穩(wěn)定性，應(yīng)避開選擇可能不會損害人體安康；特別毒性試驗，應(yīng)符合現(xiàn)行版 中國藥典的要求；pHpHpH外觀檢查應(yīng)符合規(guī)定要求；稀釋劑：應(yīng)對復(fù)溶疫苗用稀釋劑進展檢定。必需承受疫苗生產(chǎn)廠家供給的、符合國家規(guī)定的稀釋劑。六其他GMP家有關(guān)規(guī)定。血清群、型別和載體蛋白；每一人用劑量中每一結(jié)合物的含量；儲存和運輸?shù)倪m宜溫度2-8；假設(shè)疫苗為凍干疫苗，應(yīng)標明疫苗復(fù)溶后應(yīng)快速接種；凍干疫苗應(yīng)方法進展驗證。二、結(jié)合疫苗的臨床爭辯尤其是多價結(jié)合疫苗生產(chǎn)工藝相對簡單，影響因素的組分時，應(yīng)考慮重進展臨床爭辯。監(jiān)視治理局報告，由國家食品藥品監(jiān)視治理局依據(jù)具體狀況組織專家進展再評完整性和免疫原性。應(yīng)考慮到多個微