1、本系 統(tǒng)由四元 低壓 梯度系統(tǒng)輸送泵、自云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼1/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)頒發(fā)部門質(zhì)量部文件編號SOP-03-015-00制定審核批準(zhǔn)制定日期年月日審核日期年月日批準(zhǔn)日期年月日分發(fā)部門質(zhì)量部、生產(chǎn)部實施日期年月日文件狀態(tài)修訂口新訂口原因：執(zhí)行2010年版藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范1 目的： 建立 島津LC-2030高效液相 色譜儀使 用、 維修 、 保養(yǎng)操作規(guī)程，確保儀器的正確 操作。2 范圍：本規(guī)程適用于島津 LC-2030高效液相色譜 儀使 用 、維修、保養(yǎng)。3 責(zé)任：化驗室負(fù)責(zé)人，化驗員

2、。4 內(nèi)容：4.1 概述動進(jìn) 樣 器、UV檢測器、柱 溫箱、 LabSolutions 色譜 數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成。4.2 原理儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng), 樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相, 被流動相載入色譜柱固定相內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出 , 通過檢測器時, 樣品 濃度 被 轉(zhuǎn)換 成電信號傳送到記錄儀 , 數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。4.3 技術(shù)參數(shù)流量設(shè)定范圍0.000110 mL/min流速精度 1%或 2 L/min最大操作壓

3、力44MPa進(jìn)樣數(shù)216個樣品外形尺寸mm410 500 605mm波長重現(xiàn)性 0.1nm溫控 精度 0.1波長范圍190 700nm噪聲 2.5 10-6AU漂移100 10-6AU/h云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼2/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-03-015-00設(shè)備 名稱放置 房間LC-2030型高 效液相色譜儀精密儀器室需的濃度比例。云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼3/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-0

4、3-015-004.5.3.3 設(shè)置好后，點擊 “下 載 ”系 統(tǒng)自動按照設(shè)置好的方法，進(jìn)行走基線 。4.5.3.4 基線平穩(wěn)后，方 可進(jìn) 樣 。可 以進(jìn)行單次分析或批處理分析。4.5.3.4.1 單次分析 :單擊 數(shù)據(jù) 采集 窗口助手欄上的“ 單次開 始” 圖標(biāo)； 設(shè) 置 “ 樣 品 名 ”“ 方 法 文 件 ”“ 數(shù) 據(jù) 文 件 ”“ 樣 品 瓶 ”“ 樣 品 架 ”“ 進(jìn) 樣 體 積 ” 等 信 息 ； 點擊確定，系統(tǒng)即 自動進(jìn)行 單次分析。4.5.3.4.2 批處理分 析 : 單擊 數(shù) 據(jù)采 集 窗口 助手欄上的“批處理 ”圖標(biāo) ；從 文件 菜單中選擇新建批處理文件； 設(shè) 置 “ 樣

5、品 名 ”“ 方 法 文 件 ”“ 數(shù) 據(jù) 文 件 ”“ 樣 品 瓶 ”“ 樣 品 架 ”“ 進(jìn) 樣 體 積 ” 等 信 息 ； 點擊保存，保存批處理文件 ；點 擊 批處 理 助 手 欄中 的“ 批處理開始”，系統(tǒng)即執(zhí)行批處理 程序。4.5.4 梯度 洗脫4.5.4.1 排氣 : 打開Purge， 點擊程序 中的 “自 動排 氣” ， 系 統(tǒng)自動進(jìn)行排氣，若使 用多通道或梯度 ，根據(jù)實際需要選擇通道進(jìn)行排氣；如果不出液，用針頭接上“p”的管路，進(jìn)行抽氣，至到有液體從“Purge”這個管路排出。4.5.4.2.1 波長設(shè)定 ： 在 數(shù)據(jù) 采集 窗口的 時間程序視圖中 檢測器A， 選擇波 長 （1

6、）輸入所需波4.5.4.2 參數(shù)設(shè)定4.5.4.3 梯度洗脫設(shè)置程序 : 在 數(shù)據(jù)采集 窗口的 時間程序視圖，選擇 時間程序 圖標(biāo)中的 LC時間程序 ；設(shè)置程序洗脫的時間及流 動 相比 例；設(shè)置完后應(yīng)以controllerstop （控制儀器停止）為結(jié)尾；點擊“時間程序”查看設(shè)置時間程序是否正確；點擊“泵”選擇泵，調(diào)節(jié)壓力限制 （ 最大壓力設(shè)為20.0MPa； ）4.5.4.4 設(shè)置 好后 ，點擊“下載 ”系 統(tǒng) 自動 按 照設(shè) 置好 的方法，進(jìn)行走基線。4.5.4.5 基線 平穩(wěn) 后，方可進(jìn)樣。可 以 進(jìn)行 單 次分 析或 批處理分析。4.5.4.5.1 單次分析 : 單擊 LC實時 分析

7、窗 口助 手欄上的“單次 開始” 圖標(biāo)；設(shè) 置 “ 樣 品 名 ”“ 方 法文 件 ”“ 數(shù) 據(jù) 文 件 ”“ 樣 品 瓶 ”“ 樣 品 架 ”“ 進(jìn) 樣 體 積 ” 等 信 息 ； 點擊 確定，系統(tǒng)即自動進(jìn)行單次分析 。云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼4/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-03-015-004.5.4.5.2 批處理分 析 : 單擊 數(shù) 據(jù)采 集 窗口 助手欄上的“批處理 ”圖標(biāo) ；從 文件 菜單中選擇新建批處理文件； 設(shè) 置 “ 樣 品 名 ”“ 方 法 文 件 ”“ 數(shù) 據(jù) 文 件 ”

8、“ 樣 品 瓶 ”“ 樣 品 架 ”“ 進(jìn) 樣 體 積 ” 等 信 息 ； 點擊保存，保存批處理文件 ；點 擊 批處 理 助 手 欄中 的“ 批處理開始”，系統(tǒng)即執(zhí)行批處理 程序。4.5.5 泵的 清洗檢測完畢后，如 流動 相無 鹽、 酸 及緩 沖液， 可直接用甲醇或乙腈沖 洗 30分鐘 即可， 如流 動 相含有鹽、酸及緩沖液，先 用甲 醇 : 水 =10:90沖流30分鐘，再用甲醇沖 洗 30分 鐘即可。4.5.6 樣品測 試完 畢后，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲 線 。方 法 如下 ：4.5.6.1 點擊“LabSolutions” 中的 再解析圖標(biāo)，LC再解析開始；4.5.6.2 單擊 再解 析 助 手欄

9、 中的LC數(shù)據(jù)分析 圖 標(biāo)， 出現(xiàn) LC數(shù)據(jù) 分析 窗口；4.5.6.3 選擇 文 件 菜 單 中 的 打 開 數(shù) 據(jù) 文 件 ， 然 后 選 擇 與 測 量 的 數(shù) 據(jù) 文 件 ， 數(shù) 據(jù) 文 件 打 開 ；4.5.6.4 單擊助手欄中的 向?qū)?圖標(biāo) ，出現(xiàn) 化合物向?qū)В?.5.6.5 請確保設(shè)置了正 確的 積 分參 數(shù)，然后單擊下一步 ；4.5.6.6 記錄要識別的峰 的保 留 時間 ，然后單擊下一步；4.5.6.7 指定定量計算方 法和 校 準(zhǔn)曲 線類型，然后單擊下一步 ；4.5.6.8 設(shè)置識別的方法 ，然 后 單擊 下一 步 ；4.5.6.9 提供化合物表的 詳細(xì) 設(shè) 置， 然后單擊

10、 完 成 ；4.5.6.10 單擊 LC數(shù)據(jù) 助手欄中 的 應(yīng) 用到 方 法 圖 標(biāo)；4.5.6.11 命名 方法 文件并單擊保存 ；4.5.6.12 單擊 確定 而不 進(jìn)行 任 何更 改 ；4.5.6.13 單擊 再解 析 助 手欄 中的 校 準(zhǔn) 圖標(biāo)；4.5.6.14 打開 用于 生成校準(zhǔn)曲線的方 法文件；云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼5/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-03-015-004.5.6.15 拖入 需要 作校準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù) ，即得出校準(zhǔn)曲線。4.5.7 使用 校準(zhǔn)曲線 計算 數(shù)據(jù) 濃 度

11、4.5.7.1 選擇文件菜單中的打開數(shù)據(jù)文件，然后指定數(shù)據(jù)文件名；4.5.7.2 選擇文件菜單中的加載方法參數(shù)，然后指定方法文件名，出現(xiàn)方法 參數(shù) 屏幕；4.5.7.3 使用方法文件中的校準(zhǔn)曲線計算數(shù)據(jù)的濃度。4.5.8 出具 報告4.5.8.1 根據(jù)需要設(shè)置相應(yīng)的報告格式；4.5.8.2 把測定的數(shù)據(jù)拖入設(shè)置好的報告模塊中，即得報告。4.5.9 關(guān)機(jī)全部 分析完畢 后， 先關(guān)檢測器和柱溫 箱 電源 ， 再用適宜的溶劑清洗色譜 系統(tǒng)。 依次關(guān)閉系統(tǒng)控制器、泵和微機(jī)電源，拔 下各 插 頭， 做好使用記錄。4.6 泵的使 用和維護(hù)注意事項4.6.1 為了 延長泵的使用壽命和 維持 其輸液的穩(wěn)定性，

12、必須按照下列 注意事項進(jìn)行操作：4.6.1.1 防 止 任何 固 體 微 粒 進(jìn) 入 泵 體 ， 因 為 塵 埃 或 其 它任何雜質(zhì)微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、 缸體 和單 向 閥 ， 因 此 應(yīng)預(yù) 先 除 去 流 動 相 中 的 任 何 固 體 微 粒 ， 而常用的方法是濾過，可采用微孔濾膜（0.2 m或 0.45 m） 等濾 器 。 泵 的 入 口 都 應(yīng) 連 接 砂 濾 棒 （ 或 片） 。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。4.6.1.2 流動相不應(yīng)含有 任何 腐 性物 質(zhì)，含有緩沖液的流動相不應(yīng)保 留在柱內(nèi)，尤其是在停泵過 夜或更長時間的情況下。 如果將含 緩沖 液的流動 相留 在泵 內(nèi) ，

13、 由 于蒸發(fā)或泄漏，甚至 是由于 溶液 的 靜置， 就可 能析出鹽 的微 細(xì)晶體， 這 些晶體將和上述固體 微 粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。 因此， 必 須泵入加入少量甲醇或乙腈 和純 水 將泵 充分清洗后，再換 成 適合于色譜柱保存和有利于泵維 護(hù)的 溶 劑（對于反相鍵合硅膠固定 相， 可 以是 甲醇或甲醇水）。4.6.1.3 泵工作時要留心 防止 溶 劑瓶內(nèi) 的流 動相被用完，否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會 磨損柱塞、缸體或密 封環(huán)，最終產(chǎn)生漏液。云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼6/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-0

14、3-015-004.6.1.4輸 液 泵 的 工 作 壓 力 決 不 要 超 過 規(guī) 定 的 最 高 壓 力 ， 否 則 會 使 高 壓 密 封 環(huán) 變 形 ， 產(chǎn) 生 漏 液 。4.6.1.5 流動相應(yīng)該先脫 氣， 以 免在 泵內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響流量的穩(wěn)定 性如果有大量氣泡，泵就無 法正常工作。4.6.2 如果 輸液泵產(chǎn) 生故 障， 須 查明 原因，采取相應(yīng)措施排除故障。4.6.2.1 沒有流動相流出，又無壓力指示。原因可能是泵內(nèi)有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量下運(yùn)轉(zhuǎn)，將氣 泡排 盡 ，也 可用一個 50ml針筒在泵出口處幫助抽 出氣體。另一個可能原因是密封環(huán)磨損，需更換。4.6.

15、2.2 壓力和流量不穩(wěn)。原因可能是氣泡，須要排除；或者是單向閥內(nèi)有異物，可卸下單向閥，進(jìn)入丙酮內(nèi)超聲清洗。有時可能 是砂 濾棒內(nèi)有氣泡，或被鹽的微 細(xì)晶粒或滋生的微生物部分堵 塞 ，這時， 可卸下砂濾棒浸入 流動 相內(nèi)超聲除氣泡， 或 將紗 濾棒浸 入稀酸內(nèi)迅速除去微生物， 或?qū)?鹽 溶解，再立即清洗。4.6.2.3 壓力過高的原因 是管 路 被堵 塞，需要清除和清洗。壓力降低 的原因則可能是管路有泄漏 。檢查堵塞或泄漏時應(yīng)逐段 進(jìn)行 。4.6.3 關(guān)于 試劑4.6.3.1 試劑類別：有機(jī) 溶劑 、 無機(jī) 化合物、水4.6.3.2 試劑的要求：4.6.3.2.1有機(jī)溶劑 的級 別優(yōu) 級 純以

16、上專用試劑。4.6.3.2.2無機(jī)化合 物要 求分 析 純以 上。4.6.3.2.3水要求是 去離 子純 凈 水。4.6.3.3 流動 相4.6.4.1 無氣泡，通過超 聲脫 氣 ，通 氦氣等方法進(jìn)行脫氣。4.6.4.2 純凈無雜質(zhì)，常 用方 法 為用0.45 m微孔過濾膜 進(jìn)行過 濾。4.6.5 色譜 柱的注意 事項云南品斛堂生物科技有限公司文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼7/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-03-015-004.6.5.1 壓力：注意每根柱的耐壓（最大使用壓力）。4.6.5.2 pH的范圍： 不同 柱子 的 p

17、H值 范圍 有所不同。4.6.5.3 清洗：柱子需要必要的清洗，請用戶參考柱子的說明書。4.6.5.4 保存：長時間不 使用 柱 子時 需要用合適的試劑進(jìn)行保存，請 參考柱子的說明書。4.6.6 關(guān)于 吸濾過濾 器堵 塞4.6.6.1 現(xiàn)象：塞吸現(xiàn)象 、管 路 中不 斷產(chǎn)生氣泡4.6.6.2 處理方式：將吸濾頭1 從溶劑 管中 拔 出， 放在 正己烷或稀硝酸（一般10%中超聲清洗 。4.6.7 在線 過濾器堵 塞4.6.7.1 現(xiàn)象：不連接柱子及管路、混合器（松開泵進(jìn)混合器或柱子的管路接頭），設(shè)定泵流速為1ml/min，泵壓力大于0.3MP，a 說明在線過濾器堵塞。4.6.7.2 處理方式：一

18、般 建議 用 戶更 換新的過濾器，也可以將在線過 濾器拆下，用稀硝酸（濃度 小10%） ，進(jìn)行超聲清 洗。4.6.8 壓力 波動的原 因及 處理 方 法4.6.8.1 產(chǎn)生波動的原因 ：有 氣 泡； 密封圈有磨損，產(chǎn)生微量的泄液 ；進(jìn)口單向閥中有異物（較 常；在線過濾器，管路 ， 柱子 進(jìn)口處有鹽析出或雜 物 ；4.6.8.2 處理方法：流動 相進(jìn) 行 脫氣 ，排除流路中的氣泡；更換密封 圈；清洗 進(jìn)出口 單向閥， 將用異 丙醇 進(jìn) 行超 聲清洗；檢查并清 洗過濾器及流路。4.6.9 引起 柱壓升高 的原 因4.6.9.1 色 譜 柱 長 時 間 使 用 后 用 戶 發(fā) 現(xiàn) 柱 壓 比 以 往

19、 要 高 出 許 多 ， 造 成 此 情 況 可 能 由 以 下 幾 個 因 素 引 起 。在線過濾器堵；高壓混合器堵；進(jìn)樣器堵；流路中部分細(xì)管堵；流通池堵；柱子內(nèi)部吸附樣堵。4.6.9.2 確 認(rèn) 方 法 ： 進(jìn) 行 分 段 檢 測 ， 確 認(rèn) 的 確 是 柱 子 壓 力 高 還 是 以 上 5點 原 因 中 某 個 引 起 的 。云南品斛堂生物科技有限公司4.6.10.2 柱的 出口 到檢測池的管路偏 長或管路內(nèi)徑寬所致（常用內(nèi)徑0.3mm以下）, 導(dǎo)致樣品擴(kuò)散 ,4.6.12 造成檢測池能 量低 的原 因說明：檢測池能量 高 低以 參比 池為準(zhǔn)。4.6.12.2 光路 系統(tǒng) 受到污染或老

20、化。出口 1 處加一個 背壓管 ， 池中造成峰分叉。文件名稱島 津 LC-2030 高 效 液 相 色 譜 儀 使 用 、 維修、保養(yǎng)操作規(guī)程頁碼8/9文件類別工作標(biāo)準(zhǔn)文件編號SOP-03-015-004.6.10 進(jìn)樣峰分叉的 原因4.6.10.1 流路 及柱 子等沒有做任何改 變的情況下， 分析 樣 品時， 被檢測峰產(chǎn)生分叉 ， 則說明保護(hù)柱或分析柱柱效下降，需再 生保 護(hù) 柱或 分析柱。4.6.11 什么情況下需 更換D2Lam（氘p 燈 ）4.6.11.1 顯示D2LampERR時，OR 一般情況下認(rèn) 為氘 燈不 良 需更換。4.6.11.2 氘燈 超過 使用時間（理論為2000小時） ，需要更換氘燈4.6.13 檢測池中有氣泡如何排除情況下， 很小的氣泡會停留在檢 測 池中 ， 所以需要在池管路氣泡不易在池中產(chǎn)生。 （ 加背壓： 出口 處加上一段阻尼管增加壓力）4.6.14 如何清洗流通 池- 甲醇，或再用稀硝酸沖洗池流路 。4.6.15 基線漂移，噪 音