1、第十二章 臨床即時檢測儀器首 頁基本要求重點難點講授學時內容提要1基本要求1.1了解（1）即時檢測儀器的發展前景（2）即時檢測常用儀器的分型（3）即時檢測儀器的臨床應用1.2 熟 悉（1）即時檢測的特點及原理（2）即時檢測的主要技術（3）即時檢測發展中存在的問題及相應對策1.3 掌 握（1）即時檢測的概念（1）即時檢測儀器的特點（2）即時檢測儀器常用的檢測技術2重點難點2.1重 點（1）即時檢測的概念及特點（2）即時檢測儀器的優缺點（3）即時檢測儀器常用的檢測技術（4）即時檢測儀器的臨床應用實例2.2 難點（1）即時檢測主要技術（2）即時檢測儀器的臨床應用（3）即時檢測發展中存在的問題相應對策

2、3講授學時建議2學時4內容提要即時檢測（Point-of-care Testing，POCT）也稱床邊檢測，是檢驗醫學發展的新領域。關于POCT有多種解釋，指在患者身邊，由非檢驗專業人員（臨床人員或病人）利用便攜式儀器快速分析患者標本并準確獲取結果的分析技術，或者說測試不在主實驗室而在一個可移動的系統內進行。它以作為大型自動化儀器的補充，節省分析前、后標本處理步驟，縮短標本檢測周期，快速準確報告檢驗結果，節約綜合成本等優勢得到人們青睞。4.1POCT的基本原理及主要技術POCT的基本原理POCT技術的基本原理大致可分為四類：把傳統方法中的相關液體試劑浸潤于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合

3、的干燥試劑塊，然后將其固定于硬質型基質上，成為各種形式的診斷試劑條；把傳統分析儀器微型化，操作方法簡單化，使之成為便攜式和手掌式的設備；將上述兩者整合為統一的系統；應用生物感應技術，利用生物感應器檢測待測物。POCT的主要技術簡單顯色（干化學法測定）技術 將多種反應試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗標本后產生顏色反應，用肉眼觀察定性或儀器檢測(多為半定量)。多層涂膜（干化學法測定）技術 將多種反應試劑依次涂布在片基上，制成干片，用儀器檢測，可準確定量。免疫金標記技術 膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標蛋白結合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當這些標記物在相應的標記處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅

4、色斑點，這一反應可通過銀顆粒的沉積被放大。免疫熒光技術通過檢測板條上激光激發的熒光，定量檢測以pg/ml為單位的檢測板條上單個或多個標志物。生物傳感器技術 利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導傳感器等特定的生物檢測器進行分析檢測。生物芯片技術其特點是在小面積的芯片上同時測定多個項目。紅外和遠紅外分光光度技術 此類技術常用于無創性檢測儀器。其他技術 POCT的特點表12-1 臨床實驗室檢測與POCT的主要不同點比較項目臨床實驗室檢測POCT周轉時間慢快標本鑒定復雜簡單標本處理通常需要不需要血標本血清、血漿多為全血校正頻繁不頻繁試劑需要配制隨時可用消耗品相對少相對多檢測儀器復雜簡單對操作者的要求

5、專業人員普通人亦可以每個試驗花費低高試驗結果質量高一般4.2常用的即時檢測儀器介紹常用即時檢測儀器分類按照其用途分類 快速血糖檢測儀、電解質分析儀、血液分析儀等。根據其體積大小和重量分類 便攜型；桌面型；手提式；手提式一次性使用型等。 根據所用的一次性裝置分類 卡片式裝置；單一或多墊試劑條；微制造裝置；生物傳感器裝置；其他多孔材料等多種裝置。基于相關技術的即時檢測儀器多層涂膜技術相關POCT儀器：多層涂膜技術采用干化學技術，將液體樣本直接加到固定于特定載體的干試劑上，樣本中的水作為溶劑，樣本中的待測成分與試劑進行化學反應，然后進行分析檢測。它包括采用化學涂層技術和差示電位多層膜法(其結構如圖1

6、2-1、12-2)。化學涂層技術多用于全自動生化分析儀，采用差示電位多層膜法的儀器多用于電解質的測定。圖12-1 多層涂膜技術化學法結構示意圖 圖12-2 多層涂膜技術差示電位法結構示意圖免疫金標記技術相關的POCT儀器：免疫金標記技術是將膠體金顆粒與標記的抗原、抗體形成免疫金復合物的一種技術，它包括免疫滲濾和免疫層析技術。其免疫滲濾裝置及操作見圖12-3，免疫層析實驗原理見圖12-4。用該類技術的即時檢測儀器有HCG、FSH等金標定量檢測儀。圖12-3 免疫滲濾裝置及操作示意圖 圖12-4 免疫層析實驗原理示意圖免疫熒光測定技術相關POCT儀器：免疫熒光技術是以熒光物質標記抗體而進行抗原定位

7、或抗原含量檢測的技術，又稱為熒光抗體技術（fluorescent antibody technique），其技術原理如圖12-5所示。它具有特異性強、敏感性高、速度快等特點。采用該類技術的即時檢測儀器有i-CHROMATM Reader全定量免疫熒光檢測儀等。基于新的時間分辨熒光免疫測定（time resolved fluorescence immunoassay，TR-FIA）技術的有時間分辨熒光免疫測定。圖12-5 免疫熒光技術原理示意圖 生物傳感器技術相關的POCT儀器：生物傳感器是對生物物質敏感并能將其濃度轉換成電信號進行檢測的儀器，由感受器和換能器組成。采用該類技術的即時檢測儀器有葡

8、萄糖酶電極傳感器相關的血糖儀和熒光傳感器相關血氣分析儀。 生物芯片技術的相關POCT儀器：生物芯片以微電加工技術為基礎，具有高效、高信息量，有在小面積的芯片上同時測定多個項目等突出優點。生物芯片檢測儀器是利用強光照明生物芯片上的生物樣品以激發熒光，并通過靈敏度高的光電探測器探測熒光強度，最后由計算機對探測結果進行分析處理以獲取相關的生物信息。 紅外和遠紅外分光光度技術相關的POCT儀器：多用于經皮檢測儀器，這類檢驗儀器可連續監測患者血液中的目的成分，無需抽血，還可避免抽血可能引起的交叉感染和標本間的污染，降低檢驗的成本和縮短報告時間。采用該類技術的即時檢測儀器有無創傷自測血糖儀、無創全血細胞測

9、定儀等。 POCT儀器的特點理想的POCT儀器應具備以下特點：儀器小型化，便于攜帶；操作簡單化、一般34個步驟即可完成檢測；縮短檢驗周期，報告即時；能獲得權威機構的質量認證；儀器和配套試劑中應配有質控品，可監控儀器和試劑的工作狀態；儀器檢驗項目具備臨床價值和社會學意義；儀器的檢測費用合理；儀器試劑的應用不會造成對病人和工作人員的健康損害或對環境污染等不利影響。4.3即時檢測儀器的臨床應用即時檢測儀器的臨床應用在糖尿病診治方面的應用在心血管疾病方面的應用在感染性疾病中的應用在發熱性疾病方面的應用 在ICU病房內的應用 在兒科診療中的應用 在循證醫學中的應用在醫院外的應用4.3.2幾種臨床常用的即

10、時檢測儀器快速檢測血糖儀：（1）檢測原理：目前快速檢測血糖儀多采用葡萄糖脫氫酶法，根據酶電極的響應電流與被測血樣中的葡萄糖濃度呈現線性關系計算血標本中的葡萄糖濃度值。當被測血樣滴在電極的測試區后，由于電極施加有一定的恒定電壓，電極上固定的酶與血中的葡萄糖發生酶反應，血糖儀顯示葡萄糖濃度值。（2）基本結構：快速血糖儀的基本結構主要包括設置鍵、顯示屏、試紙插口、試紙槽、密碼牌、標本測量室等。（3）使用與維護：血糖儀應定期進行清潔與校準。（4）常見故障和處理：表12-3 快速檢測血糖儀常見故障及排除方法常見故障排除方法插入錯誤的密碼牌或不能識別密碼牌取出密碼牌，重新插入與試紙配套的密碼牌檢測光路出現

11、錯誤或測量光路污染清潔光路，檢查試紙在插槽內是否平整和垂直。若顯示該信息，聯系客服服務中心。試紙插入有誤將檢測墊面朝上，沿箭頭方向插入試紙，直至其嵌入插槽。血糖儀暴露于強電磁場移至別處測定，不要靠近移動電話。（5）檢測結果的質量控制：嚴格按照儀器要求進行維護；測定方法要正確；注意某些藥物對檢測結果的影響；對于臨床護理中的一些末梢部位不適合采血者（如：過度水腫；角質層過厚），在需要緊急檢測的時候一定要因人而異，具體問題具體分析，以求結果的準確；要定期采用已知值的標本對儀器進行校正，對儀器的準確性做出評價。（6）臨床應用價值：快速檢測血糖儀具有小型化，便于攜帶，操作簡單，報告即時等優點，且檢測費用

12、合理，儀器試劑的正確應用不會對病人和工作人員的健康或對環境污染造成不利影響。快速血氣分析儀：（1）檢測原理：IRMA血氣分析儀由7.5V電池供電。血樣通過微型電極傳感器，由傳感器通過電化學的原理將各種電信號轉化為參數（ADC），最后由微處理機對這些數據處理后將結果存儲和顯示。（2）基本結構：IRMA血氣分析儀主要由IRMA分析儀、電池充電器、電源供給、兩個可充電的電池、溫度卡及兩卷熱敏打印機紙組成。（3）使用與維護：為了獲得最佳的電池性能，使用電池接近“空”時要及時充電，充完電的電池不要繼續留在充電器中；氣壓表要每年校準一次,確保分析儀的準確度；常需清潔的系統部件有打印機、觸摸屏、充電器、電源

13、供給器及分析儀表面，電池接觸點、紅外探頭、邊緣連接器等。（4）常見故障和處理：表12-4 IRMA血氣分析儀的常見故障及排除辦法常見故障排除方法TQC測試失敗(1) 清潔紅外探頭。(2) 清潔溫控卡的接口。(3) 驗證是否使用了正確的溫控卡的校準碼。(4) 驗證分析儀與溫控卡均已達到室溫。EQC測試失敗重復EQC 測試。傳感器出錯(1)驗證血盒已正確平衡。(2)用新血盒重新按程序進行測試。(3)如果出錯率一直很高, 清潔紅外探頭與邊緣連接器后再運行EQC 測試仍然不通過時, 這時就要按照清潔邊緣連接器順序更換電子接口。溫度出錯(1)血盒溫度超過工作溫度范圍 ( 15 30 /59 86 ) ,

14、 換一個新血盒在工作范圍內進行測試。(2)分析儀溫度超過工作溫度范圍 ( 12 30 /54 86 ) , 按退出鍵, 斷開分析儀電源, 讓分析儀平衡到工作溫度范圍內至30min再測試。（5）檢測結果的質量控制： 12500IU的肝素鈉用100ml生理鹽水稀釋做抗凝劑；不用抗凝劑，采血量僅為0.5ml，須在3min內檢測完畢；用抗凝劑，采血量需大于1.5ml，在30min內檢測完畢；測試片保存溫度在430，從冰箱取出后不可再放入冰箱；按保養規程菜單行儀器保養。（6）臨床應用價值：廣泛應用于手術室、化驗室及救護車等現場工作中，特別適用于ICU病房患者的血氣監測和急診病人的快速有效診斷。4.4即時

15、檢測儀器的展望4.4.1即時檢測儀器的發展前景由于準確、快速檢測方法的不斷問世、病人對立即獲取結果的要求以及家用檢測試劑需求的增多，未來幾年POCT市場將會保持均衡增長，POCT的增長將成為中心實驗室的有效補充。 微型芯片技術和非創傷性POCT檢測系統的應用；一些即時檢驗新技術（膠體金技術、時間分辨熒光、免疫層析、免疫斑點滲濾技術、生物傳感器技術以及生物芯片）不斷出現，將會給POCT的發展帶來新的突破。4.4.2即時檢測發展中存在的問題質量保證問題：各種POCT分析儀的準確度和精密度各不相同，且沒有統一的室內和室間質量控制。POCT主要由非檢驗人員（如醫師和護士等工作人員）進行檢測，他們沒有經

16、過適當的培訓，不熟悉設備的性能和局限性，缺乏臨床檢驗操作經驗，不懂質量控制和質量保證，是導致POCT產生質量不穩定的重要原因，將會影響POCT的開展和應用。質控措施的缺乏和儀器試劑科技含量的不足：POCT質量控制與傳統的生化大型儀器不同。POCT所用的試劑板、條、塊，每個檢測單位都是自成體系。大型生化儀所用的液體試劑，有標準品和曲線校正。而POCT所用的每塊試劑板，受保管條件等多種因素的影響，每塊試劑板間可能存在誤差，因而試劑板的要求比液體試劑要求更高。質量控制對于不同的對象應有所區別。醫院POCT應用者應參考傳統檢驗的模式，建立質量控制程序。接受臨檢中心室內質控的監督和室間質控，盲點現場檢測

17、的考核，質量控制應主要由檢驗科負責。POCT儀器試劑應用的終端客戶是病人，其質量管理的難度更大。這些使用者大都沒有醫學背景，而且年齡偏大者居多。這方面工作面廣、量多，質量控制只能由儀器和試劑供應商來完成。在購買儀器時作一次全面的培訓，要明確可能遇到的問題及解決的辦法。儀器的日常維護和校驗應通過使用者在試劑消耗品供應點校驗儀器，供應商應強化責任服務意識，確保儀器始終處于良好狀態。循證醫學評估問題 從疾病的診斷和治療來說，POCT縮短了檢驗周期，對中心實驗室有很好的補充，但對POCT儀器及檢測結果本身來說，尚缺乏循證醫學的評估。費用問題 在目前條件下，POCT單個項目的檢測費用高于常規性檢測。報告

18、書寫不規范問題 如使用熱敏打印紙直接發報告，報告單上患者資料填寫不完整，報告內容不規范（包括檢測項目或英文縮寫、檢測結果、計量單位等）和檢測報告者簽名不規范等。思想認識上的誤區人們對POCT沒有全面正確的認識，總認為POCT是定性的床邊檢測，結果的可靠性較差。4.4.3相應對策盡快建立POCT分析儀嚴格的質量保證體系和管理規范 目前，許多國家和地區已經或將要頒布適合本國或地區的POCT使用原則。我國已經出臺了關于POCT的管理辦法（試行草案）。對醫、護等非檢驗人員做POCT儀器使用的嚴格操作培訓 據調查，POCT大部分的不準確結果均由操作誤差或儀器使用不當導致。雖然POCT可允許非檢驗人員操作，但是嚴格操作培訓是保證質量的前提，應放在首位。培訓合格、上崗證確認后方可上崗操作。降低單個POCT檢測項目的高檢驗費用開展POCT的主要目的是方便病人盡快而又價