1、 由列文虎克揭示的多姿多彩的微生物世界吸引著各國學者去研究、探索，推動著微生物學的建立和發展，表1-1列出了發展過程中的重大事件。表1-1列出了發展過程中的重大事件時間重大事件1857巴斯德證明乳酸發酵是由微生物引起的1861巴斯德用曲頸瓶實驗證明微生物非自然發生，推翻了爭論已久的“自生說”1864巴斯德建立巴氏消毒法1867Lister他立了消毒外科，并首次成功地進行了石炭酸消毒試驗1867-1877柯赫證明炭疽病由炭疽桿引起1881柯赫等首創用明膠固體培養基分離細菌，巴斯德制備了炭疽菌苗1882哥赫·發現結核桿菌1884哥赫法則首次發表；Metchnikoff闡述吞噬作用；建立高

2、壓蒸汽菌和革蘭氏染色法1885巴斯德研究狂犬疫苗成功，開創了免疫學1887Richard Petri發明了雙層培養皿1888Beijerinck首次分離根瘤菌1890von Behring制備抗毒素治療白喉和破傷風1891Sternberg與巴斯德同時發現了肺炎球菌1892Ivanowsky提供煙草花葉病毒是由病毒引起的證據；Winogradsky發現硫循環1897Buchner用無細胞存在的酵母菌抽提液對萄萄糖進行酒精發酵成功1899Ross證實瘧疾病原菌由蚊子傳播19091910Ricketts發現立克次氏體；Ehrlich首次合成了治療梅毒的化學治療劑1928Griffith發現細菌轉化

3、1929Fleming發現青霉素1935Stanley首次提純國煙草花葉病毒，并獲得了它的“蛋白質結晶”1943Luria和Delbruck用波動試驗證明細菌噬菌體的抗性是基因自發突變所致；Chai和Florey形成青霉素工業化生產的工藝1944Avery等證實轉化過程中DNA是遺傳信息的載體；Waksman發現鏈霉素19461947Lederberg和Tatum發現的接合現象、基因連鎖現象1949Enders、Robbins和Weller在非神經的組織培養中，培養脊髓灰質炎病毒成功1952Hershey和Chase發現噬菌體將DNA注入宿主細胞；Lederberg發明了影印培養法；Zinde

4、r和Lederberg發現普遍性轉導1953Watson和Crick提出DNA雙螺旋結構1956Umbarger發現反饋阻遏現象1961Jacob和Monod提出基因調節的操縱子模型19611966Holley、Khorana、Nirenberg等闡明遺傳密碼1969Edelman測定了抗體蛋白分子的一級結構19701972Arber、Nathans和Smith發現并提純了限制性內切酶；Temin和Baltimore發現反轉錄酶1973Ames建立細菌測定法檢測致癌物；Cohen等首次將重組質粒轉入大腸桿菌成功1975Kohler和Milstein建立生產單克隆抗體技術1977Woese提出古

5、生菌是不同于細菌的真核性物的特殊類群；Sanger首次對X174噬菌體DNA進行了全序列分析19821983Cech和Altman發現具催化活性的RNA（ribozyme）；McClintock發現的轉座因子獲得公認；Prusiner發現朊病毒（prion）19831984Gallo和Montagnier分離和鑒定人免疫缺陷病毒；Mullis建立PCR技術1988Deisenhofer等發現并研究細菌的光合色素1989Bishop和Varmus發現癌基因1995第一個獨立生活的生物（流感嗜血桿菌）全基因組序列測定完成1996第一個自養生活的古生菌基因組測定完成1997第一個真核生物（啤酒酵母）

6、基因組測序完成 從表11列出的重大事件中，其發現或發明人就有30位獲得諾貝爾獎，據有關統計表明，20世紀諾貝爾生理學和醫學獎獲得者中，從事微生物問題研究的就占了13，這從另一個側面看到了微生物學舉足輕重的地位。也可見微生物學的發展對整個科學技術和社會經濟的重大作用和貢獻。 繼列文虎克發現微生物世界以后的200年間，微生物學的研究基本上停留在形態描述和分門別類的階段。直到19世紀中期，以法國的巴斯德(Louis Pasteur，18221895)和德國的柯赫(Roben Koch，18431910)為代表的科學家才將微生物的研究從形態描述推進到生理學研究階段，揭露了微生物是造成腐敗發酵和人畜疾病

7、的原因，并建立了分離、培養、接種和滅菌等一系列獨特的微生物技術，從而奠定了微生物學的基礎，同時開辟了醫學微生物學和工業微生物學等分支學科。巴斯德和柯赫是微生物學的奠基人。l 巴斯德 巴斯德(圖13)原是化學家，曾在化學上作出過重要的貢獻，后來轉向微生物學研究領域，為微生物學：酶建立和發展作出了卓越的貢獻。主要集中在下列三方面。 (1) 徹底否定了“自生說”學說 “自生說”是一個古老的學說，認為一切生物是自然發生的。到了17世紀，雖然由于研究植物和動物的生長發育和生活循環，使“自生說”逐漸削弱，但是由于技術問題，如何證實微生物不是自然發生的仍然是一個難題，這不僅是“自生說”的一個頑固陣地，同時也

8、是人們正確認識微生物生命活動的一大屏障。巴斯德在前人工作的基礎上，進行了許多試驗，其中著名的曲頸瓶試驗無可辯駁地證實，空氣內確實含有微生物，它們引起有機質的腐敗。巴斯德自制了一個具有細長而彎曲的頸的玻瓶，其中盛有有機物水浸液(圖14)，經加熱滅菌后，瓶內可一直保持無菌狀態，有機物不發生腐敗，因為彎曲的瓶頸阻擋了外面空氣中微生物直達有機物浸液內，一旦將瓶頸打斷，瓶內浸液中才有了微生物，有機質發生腐敗。巴斯德的實驗徹底否定了“自生說”，并從此建立了病原學說，推動了微生物學的發展。 (2) 免疫學預防接種 Jenner雖然早在1798年發明了種痘法可預防天花，但卻不了解這個免疫過程的基本機制，因此，

9、這個發現沒能獲得繼續發展。1877年，巴斯德研究了雞霍亂，發現將病原菌減毒可誘發免疫性，以預防雞霍亂病。其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，證實其免疫學說，為人類防病、治病作出了重大貢獻。 (3) 證實發酵是由微生物引起的酒精發酵是一個由微生物引起的生物過程還是一個純粹的化學反應過程，曾是化學家和微生物學家激烈爭論的問題。巴斯德在否定“自生離到了許多引起發酵的微生物，并證實酒精發酵是由酵母菌引起的。此外，巴斯德還發現乳酸發酵、醋酸發酵和丁酸發酵都是不同細菌所引起的。為進一步研究微生物的生理生化奠定了基礎。 (4) 其他貢獻 一直沿用至今天的巴斯德消毒法（60-65）作短時間

10、加熱處理，殺死有害微生物的一種消毒法)和家蠶軟化病問題的解決也是巴斯德的重要貢獻，他不僅在實踐上解決了當時法國酒變質和家蠶軟化病的實際問題，而且也推動了微生物病原學說發展，并深刻影響醫學的發展。l 柯赫 柯赫(圖15)是著名的細菌學家，由于他曾經是一名醫生，因此對病原細菌的研究作出了突出的貢獻：具體證實了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；發現了肺結核病的病原菌，這是當時死亡率極高的傳染性疾病，因此柯赫獲得了諾貝爾獎；提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則柯赫法則。由于柯赫在病原菌研究方面的開創性工作，自19世紀70年代至20世紀20年代成了發現病原菌的黃金時代，所發現的各種病原微生物不下百余種，其中還包括植物病原細菌。 柯赫除了在病原菌研究方面的傳大成就外，在微生物基本操作技術方面的貢獻更是為微生物學的發展奠定了技術基礎，這些技術包括：用固體培養基分離純化微生物的技，術，這是進行微生物學研究的基本前體，這項技術一直沿用至今；配制培養基(見第四章)，也是當今微生物學研究的基本技術之一。這兩項技術不僅是具有微生物學研究特色的重要技術，而且也為當今動植物細胞的培養作出了十分重要的貢獻。巴斯德和柯赫的杰出工作，使微生物學作為一門獨立的學科開始形成，并出現以他們為代表而建立的各分支學科，例如細菌學(巴斯德、柯赫等)、消毒外科技術(JLister)，免疫學(巴斯德、Metchni