1、生物材料中有害物質生物材料中有害物質生物標志物監(jiān)測的質量保證生物標志物監(jiān)測的質量保證Quality assurance for detecting biomaker in the biomaterials中南大學湘雅公共衛(wèi)生學院中南大學湘雅公共衛(wèi)生學院 熊敏如熊敏如 一一、可供職業(yè)衛(wèi)生研究和實際工作、可供職業(yè)衛(wèi)生研究和實際工作的生物材料的生物材料 尿液、血液、呼出氣、毛發(fā)、指甲、汗液尿液、血液、呼出氣、毛發(fā)、指甲、汗液唾液及各種生物組織等。唾液及各種生物組織等。最常用的是最常用的是尿液尿液血液血液呼出氣呼出氣二、生物標志物及其分二、生物標志物及其分類類 能反映生物體與環(huán)境因素（理化生社心等）相

2、互作能反映生物體與環(huán)境因素（理化生社心等）相互作用所致的一切生理、病理生理學和病理學改變，稱為：用所致的一切生理、病理生理學和病理學改變，稱為：生物標志物（生物標志物（biomaker）接觸生物標志物接觸生物標志物（biomaker of exposure效應生物標志物效應生物標志物(biomaker of effect)易感生物標志物易感生物標志物（biomaker of susceptibility) 1、接觸生物標志物（、接觸生物標志物（biomaker of exposure） 生物材料中含有的化學物或其代謝產(chǎn)物生物材料中含有的化學物或其代謝產(chǎn)物（內(nèi)劑量內(nèi)劑量） 與靶細胞、靶組織結合的

3、外源性化學物與靶細胞、靶組織結合的外源性化學物（生物有效劑量、靶劑量生物有效劑量、靶劑量）血鉛、尿汞、尿酚等血鉛、尿汞、尿酚等DNA加合物、蛋白質加合物等加合物、蛋白質加合物等 2、效應生物標志物、效應生物標志物(biomaker of effect) 外源性有害因素與機體相互作用所致的生外源性有害因素與機體相互作用所致的生理、生化、免疫、遺傳學等改變而形成的物質。理、生化、免疫、遺傳學等改變而形成的物質。 各種生理病理學指標的改變各種生理病理學指標的改變 酶活性的改變酶活性的改變 DNA突變突變 染色體畸變等染色體畸變等 3、易感生物標志物、易感生物標志物（biomaker of susce

4、ptibility) 反映機體先天具有或后天獲得的對外源性反映機體先天具有或后天獲得的對外源性有害因素較敏感的生物學指標。有害因素較敏感的生物學指標。 G6PD缺陷者對溶血性毒物敏感；缺陷者對溶血性毒物敏感； 攜有攜有ALAD2 等位基因個體鉛中毒高危人群；等位基因個體鉛中毒高危人群； 攜帶攜帶XQ01c609TT基因型而又同時吸基因型而又同時吸煙或飲酒的個體對苯中毒易感煙或飲酒的個體對苯中毒易感 -1-抗胰蛋白酶缺乏者，接觸呼吸道刺激物抗胰蛋白酶缺乏者，接觸呼吸道刺激物易致肺水腫；易致肺水腫； 紅細胞卟啉代謝酶缺陷者接觸鉛、六氯苯等紅細胞卟啉代謝酶缺陷者接觸鉛、六氯苯等易致貧血易致貧血 職業(yè)

5、環(huán)境監(jiān)測職業(yè)環(huán)境監(jiān)測職業(yè)性有害因素的接觸評定及危險度評定職業(yè)性有害因素的接觸評定及危險度評定建設項目職業(yè)病危害預評價建設項目職業(yè)病危害預評價職業(yè)病危害控制效果評價職業(yè)病危害控制效果評價作業(yè)場所空氣中化學物質接觸限值的制定作業(yè)場所空氣中化學物質接觸限值的制定職業(yè)病鑒定（病因學研究）職業(yè)病鑒定（病因學研究） 確保檢測結果的準確性、可比性和公證性確保檢測結果的準確性、可比性和公證性才能準確識別和評價有害因素的危害性質和程才能準確識別和評價有害因素的危害性質和程度，有效地控制職業(yè)性有害因素的危害。度，有效地控制職業(yè)性有害因素的危害。 三、三、生物材料中有害物質的監(jiān)測是生物材料中有害物質的監(jiān)測是識別、評

6、價和控制職業(yè)性有害因素的重識別、評價和控制職業(yè)性有害因素的重要基礎工作要基礎工作生物監(jiān)測過程生物監(jiān)測過程 四、生物監(jiān)測的質量控制四、生物監(jiān)測的質量控制樣品采集樣品采集樣品預處理樣品預處理分析測定分析測定數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理生物監(jiān)測的質量控制生物監(jiān)測的質量控制 使監(jiān)測質量達到預期的最佳水平（誤使監(jiān)測質量達到預期的最佳水平（誤差極小）要求，生物監(jiān)測全過程必需采取差極小）要求，生物監(jiān)測全過程必需采取的措施。的措施。一、樣品的代表性一、樣品的代表性1、監(jiān)測群體和個體的代表性、監(jiān)測群體和個體的代表性2、樣品種類和采樣時機的代表性、樣品種類和采樣時機的代表性盡可能反應不同群體或個體實際接觸盡可能反應不同群體或

7、個體實際接觸水平（濃度、時間）水平（濃度、時間） 依據(jù)有害物質的吸收、分布（蓄積）、作依據(jù)有害物質的吸收、分布（蓄積）、作用機制和排泄途徑選定，例如用機制和排泄途徑選定，例如 尿鉛尿鉛 反映人體接觸鉛的水平，但不能代反映人體接觸鉛的水平，但不能代表體內(nèi)鉛的負荷量（表體內(nèi)鉛的負荷量（驅鉛后尿鉛驅鉛后尿鉛） 尿汞尿汞排泄不規(guī)律，一次尿汞測定結果難以排泄不規(guī)律，一次尿汞測定結果難以代表接觸水平代表接觸水平 血樣分全血、血清、血漿和血細胞血樣分全血、血清、血漿和血細胞 ，血血鉛鉛測定常采集全血樣品，非全血樣品血鉛不能測定常采集全血樣品，非全血樣品血鉛不能代表體鉛負荷狀況代表體鉛負荷狀況 接觸揮發(fā)性有機

8、毒物的評價宜采集接觸揮發(fā)性有機毒物的評價宜采集終末終末呼出氣呼出氣，混合呼出氣中毒物濃度受接觸狀況，混合呼出氣中毒物濃度受接觸狀況影響較大，不能反映接觸水平影響較大，不能反映接觸水平二、防止樣品的污染和損失二、防止樣品的污染和損失 1、采樣、測試分析用試劑、玻璃器皿等、采樣、測試分析用試劑、玻璃器皿等應清洗干凈或經(jīng)特殊處理（驅鉛、驅汞）應清洗干凈或經(jīng)特殊處理（驅鉛、驅汞） 汞易被玻璃器皿吸附、采樣和儲存汞樣品時汞易被玻璃器皿吸附、采樣和儲存汞樣品時宜用塑料器皿，以防止或減少采樣器皿對被測物宜用塑料器皿，以防止或減少采樣器皿對被測物的吸附。的吸附。 樣品不能及時分析測定時，應冷藏、避光、樣品不能

9、及時分析測定時，應冷藏、避光、保存或經(jīng)脫水、灰化等預處理，嚴防滲漏、變質保存或經(jīng)脫水、灰化等預處理，嚴防滲漏、變質和污染和污染 2、測試分析過程中，萃取、離心操作，、測試分析過程中，萃取、離心操作，反應條件（反應條件（pH、溫度等）等的嚴格控制、溫度等）等的嚴格控制三、樣品的保存三、樣品的保存 樣品應及時分析，否則應選擇最佳的保存條樣品應及時分析，否則應選擇最佳的保存條件（容器、溫度、避光等），并在待測組分的穩(wěn)件（容器、溫度、避光等），并在待測組分的穩(wěn)定期內(nèi)測定完畢，避免樣品的分解而造成待測物定期內(nèi)測定完畢，避免樣品的分解而造成待測物量的降低，特別是血清酶樣品量的降低，特別是血清酶樣品 尿樣一

10、般置于尿樣一般置于4冰箱或冷凍保存，必要冰箱或冷凍保存，必要時需添加穩(wěn)定劑，如甲苯等時需添加穩(wěn)定劑，如甲苯等 血樣要求更嚴血樣要求更嚴四四、記錄和計算、記錄和計算 監(jiān)測全過程必須有準確詳細記錄監(jiān)測全過程必須有準確詳細記錄 溫浴、顯色、反應等起始時間等溫浴、顯色、反應等起始時間等 吸收液的用量、吸收液的用量、取樣量和稀釋倍數(shù)等取樣量和稀釋倍數(shù)等 五、執(zhí)行規(guī)范五、執(zhí)行規(guī)范血中鋅原卟啉測定血中鋅原卟啉測定 WS/T92-1996尿中汞的雙硫腙萃取分光光度測定方法尿中汞的雙硫腙萃取分光光度測定方法 WS/T24-1996WS/T24-1996尿中馬尿酸的分光光度測定方法尿中馬尿酸的分光光度測定方法 W

11、S/T52-1996呼出氣中甲苯的氣相色譜測定法呼出氣中甲苯的氣相色譜測定法WST110-1999 尿中尿中-氨基乙酸丙酸的測定氨基乙酸丙酸的測定 WS/T23-1996 一、尿樣的監(jiān)測質控一、尿樣的監(jiān)測質控 1 1、根據(jù)毒物在體內(nèi)的、根據(jù)毒物在體內(nèi)的半減期半減期確定尿樣采樣確定尿樣采樣時間時間 （機）（機） 迅速排出的毒物迅速排出的毒物班末尿班末尿尿酚尿酚 排泄較穩(wěn)定的毒物排泄較穩(wěn)定的毒物 排泄無規(guī)律的毒物排泄無規(guī)律的毒物晨尿晨尿尿汞尿汞 2、肌酐校正、尿比重校正，避免尿液稀、肌酐校正、尿比重校正，避免尿液稀釋、濃縮影響測定結果釋、濃縮影響測定結果一次尿一次尿尿鉛尿鉛二、血樣的監(jiān)測質控二、血樣的監(jiān)測質控 分光光度法測定血液碳氧血紅蛋白：取末梢分光光度法測定血液碳氧血紅蛋白：取末梢血血，肝素抗凝，置冰箱冰盒內(nèi)肝素抗凝，置冰箱冰盒內(nèi)( (8)8)保存，保存，一周內(nèi)分析完畢一周內(nèi)分析完畢 1、根據(jù)監(jiān)測目的采集全血、血漿、血清、根據(jù)監(jiān)測目的采集全血、血漿、血清或血細胞（或血細胞（ChE、血鉛等常采集全血，血常規(guī)、血鉛等常采集全血，血常規(guī)zpp等常