參考文獻：1、 關松蔭等，編著.土壤酶及其研究法M].農業出版社，1986.2、 周禮凱，編著.土壤酶學M].科學出版社關松蔭等，1986蔗糖酶：比色法(1) P274-276脲酶：比色法P294-297蛋白酶：比色法9(1)P302-304磷酸酶：磷酸苯二鈉法(2)P312-313過氧化氫酶：容量法P323蔗糖酶比色法1、 試劑苯甲酸溶液0.25%3,5-二硝基水楊酸pH5.5磷酸緩沖液8%蔗糖溶液甲苯2、 操作步驟5克風干土f50mL三角瓶-15mL8%蔗糖溶液-5mLpH5.5磷酸緩沖液f5滴甲苯f搖勻放入恒溫箱f37°C培養24hf取出迅速過濾f吸取濾液1mLf流水冷卻3minf蒸餾水稀釋至50mLf508nm比色3、 結果計算蔗糖酶活性以24h后1g土壤葡萄糖的毫克數表示。葡糖糖(毫克)=aX4式中a——從標準曲線查得的葡萄糖毫克數4——換算成1g土的系數標準曲線：以光密度為縱坐標，以葡萄糖濃度為橫坐標。￥=0.229X(-0.0209)R2=0.9961注意：Y值為吸光度值，相當于表中的A平均X值為根據上述公式計算的結果，相當于a值葡萄糖含量為a*4(毫克)蛋白酶比色法(1)試劑1%酪素溶液0.1N硫酸20%硫酸鈉2%茚三酮液甲苯甘氨酸標準溶液操作步驟4g風干土f50ml三角瓶f20ml1%酪素液f1ml甲苯f30C恒溫箱24hf2ml0.1N硫酸f12ml20%硫酸鈉液f15min(6000轉/min)離心一上清液2ml50ml容量瓶flml茚三酮f沸水浴10minf蒸餾水稀釋至刻度f500nm比色結果計算蛋白酶活性，以24h后1g土壤中氨基氮的毫克數表示。NH2-N(mg)=a*5式中a——從標準曲線查得氨基氮毫克數b——換算成1g土的系數標準曲線：以光密度為縱坐標，以氨基氮濃度為橫坐標。Y=2.8236x+0.011R2=0.9968X=(y-0.011)/2.8236過氧化氫酶容量法試劑0.3%的過氧化氫溶液3N硫酸0.1N高錳酸鉀溶液操作步驟2g風干土一100ml三角瓶-40ml蒸餾水一5ml0.3%過氧化氫溶液一復式震蕩機震蕩20min-5ml3N硫酸一過濾一去25ml濾液-0.1N高錳酸鉀滴定至淡粉紅色計算土壤過氧化氫酶活力以及所消耗的高錳酸鉀的ml數來表示脲酶比色法試劑PH6.7檸檬酸鹽緩沖液苯酚鈉溶液次氯酸鈉溶液10%尿素液甲苯硫酸銨操作步驟5g風干土一50ml三腳瓶-1ml甲苯-10ml10%尿素液一20mlPH6.7檸檬酸鹽緩沖液一37°C恒溫箱24h—過濾取3ml濾液一50ml容量瓶一加蒸餾水至20ml4ml苯酚鈉一3ml次氯酸鈉液一20min后顯色定容一1h內578nm比色計算服酶活性以24h后1g土壤中NH3-N的毫克數表示。NH3-N(mg)=aX2式中a——從標準曲線查得的NH3-N毫克數z——換算成1g土的系數磷酸酶磷酸苯二鈉比色法（2）1、 原理：在堿性條件下，當存在氧化劑鐵氤化鉀時，酚被氧化成醍，醍又與4一氨基氨替比林絡合成玫瑰色，顏色深度與酚量相關，通過比色測定游離酚量。2、 試劑（1） PH9.8氯化銨一氫氧化銨緩沖液（2） 8%鐵氤化鉀液體（3） 3%4一氨基氨替比林液（4） 0.5%磷酸苯二鈉溶液（5） 酚的標準溶液（6） 甲苯3、 操作步驟稱5g風干土f50ml三角瓶f5滴甲苯f20ml0.5%磷酸苯二鈉^37度恒溫箱2hf濾液5mlf50ml容量瓶f20ml蒸餾水f0.25ml緩沖液f0.5ml4—氨基氨替比液f0.5ml鐵氤化鉀液f定容f15min內于510nm比色4、 結果計算磷酸酶的活性，以2h后100g土壤中P2O5的毫克數表示。P2O5（mg）=a*80*0.32*2.29式中 a——5ml濾液中酚的毫克數 80——換算為100g土