腦脊液常規檢查標準操作規程一.目的：規范腦脊液常規檢查。二.適用范圍：適用于本科室的腦脊液常規檢查。三.支持性文件：全國臨床檢驗操作規程第三版四.原理：球蛋白定性：潘氏試驗。五.儀器：OLYMPUSH20光學顯微鏡。細胞計數板。六.試劑：5%的苯酚溶液：取純苯酚25ml，加蒸餾水至500ml，用力振搖，置37oC溫箱內1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶內保存；1%冰醋酸。七.樣本要求：臨床醫生腰穿后取腦脊液于干凈的試管中,注明患者姓名,立即送檢。八.操作步驟：1.一般性狀檢查：主要觀察顏色（無色、白色、紅色、黃色、綠色、黑色等），透明度（透明、微渾、渾濁、膿樣等），凝塊（無、有或薄膜形成）。2.潘氏定性試驗：取潘氏試劑2至3ml，置試管中，滴入腦脊液1-2滴，襯以黑色背景，立即觀察結果。結果判斷:陰性：清晰透明，不顯霧狀。極弱陽性(土)；微呈白霧狀，在黑色背景下，才能看到。弱陽性(+)：灰白色云霧狀。陽性(2+)：白色渾濁。強陽性(3+)：白色濃絮狀沉淀。最強陽性(4+)：白色凝塊。3.細胞總數：澄清的腦脊液混勻后直接滴入計數池內，計數10個大方格內的細胞數。細胞數/L=10個大方格內的細胞數*106。混濁或帶血的標本可取標本20μl，加入含有紅細胞稀釋液0.38ml的小試管內,混勻后滴入計數池內,低倍鏡下計數4個大方格內的細胞數。細胞數/L=四個大方格內的細胞數×50×106。4.白細胞數：非血性標本：于小試管內滴入冰醋酸1-2滴，轉動試管，使壁內沾有冰醋酸后傾去，滴入標本3-4滴，數分鐘后充入計數池計數，計數四個大方格內的白細胞數。白細胞數/L=四個大方格內的白細胞數×50×106.血性標本用1%的冰醋酸稀釋后計數，并用以下公式校正：每升中白細胞數=每升中白細胞末校正數-每升中紅細胞數×每升血液中白細胞數/每升血液中紅細胞數。5.細胞分類（計數>50/L時）：白細胞計數后，將低倍鏡換為高倍鏡，直接在高倍鏡下根據細胞核的形態分別計數單個核細胞(包括淋巴細胞及單核細胞)和多核細胞，應數100個白細胞，并以百分率表示。若白細胞少于100個，應直接寫出單核、多核細胞的具體數字。若白細胞少于100個應直接寫出具體數字。如有可疑腫瘤細胞應送檢病理科。九.參考范圍：1.外觀：無色、透明、不凝固。2.潘氏試驗：陰性。3.正常人腦脊液中無紅細胞，僅有少量白細胞。成人：(0-8)×106/L兒童：(0一15)×106/L十.注意事項：1.標本及時送檢，收到標本后應立即檢驗。久置會使細胞破壞，葡萄糖分解，病原菌破壞或溶解。2.潘氏試驗不僅針對球蛋白。3.細胞計數應及時進行，以免腦脊液凝固，使結果不準確。4.細胞計數時，應注意新型隱球菌與白細胞的區別。前者不溶于乙酸，加優質墨汁后可見不著色的莢膜。5.計數池用后，應用75％乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒，因有損計數池的刻度。6.如標本為血性，為區別蛛網膜下腔出血或穿刺性損傷，應注意：(1)將血性腦脊液試管離心沉淀(1500r／min)，如上層液體呈黃色，隱血試驗陽性，多為蛛網膜下腔出血，且出血的時間已超過4h。如上層液體澄清無色，紅細胞均沉管底