實(shí)驗(yàn)五放線菌形態(tài)觀察第1頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四放線菌形態(tài)的觀察目的要求實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)程序思考題第2頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四目的要求學(xué)習(xí)觀察放線菌的基本方法加深理解放線菌的形態(tài)特征第3頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)材料放線菌培養(yǎng)物：費(fèi)氏鏈霉菌（Streptomycesfradiae）或“5406”產(chǎn)生菌（St.microflacus）細(xì)黃鏈霉菌四天培養(yǎng)物。顯微鏡、載玻片、接種環(huán)、解剖針、解剖刀、酒精燈、鑷子等。酒精、蒸餾水等。第4頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四G＋GC含量高（和另一類陽性菌——厚壁菌門相比）好氧、少部分寄生兼性厭氧放線菌重要的屬有：放線菌屬(Actinomyces)節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)棒桿菌屬(Corynebacterium)弗蘭克氏菌屬(Frankia)微球菌屬(Micrococcus)微單孢菌屬(Micromonospora)分枝桿菌屬(Mycobacterium)諾卡氏菌屬(Nocardia)丙酸桿菌屬(Propionibacterium)鏈霉菌屬(Streptomyces)第5頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四(1)鏈霉菌屬（Streptomyces）分枝菌絲孢子體或氣生菌絲菌絲無橫隔好氧原核生物降解高分子底物生長條件簡單抗生素第6頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四(2)棒狀桿菌屬（Corynrbacterium）谷氨酸棒桿菌（C.glutamicum）味精生產(chǎn)菌氨基酸生物合成調(diào)節(jié)機(jī)制白喉棒狀桿菌（C.diphtheriae）第7頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四(3)分枝桿菌屬(Mycobacterium)不規(guī)則桿狀菌抗酸性染色細(xì)胞壁含有大量的脂類和分枝菌酸結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌第8頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四抗生素鏈霉素灰色鏈霉菌（Streptomycesgriseus）四環(huán)素紅霉素新霉素慶大霉素第9頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四FilamentousActinomycetesTypicalappearanceofastreptomycetegrowingonagarslantsThecolorsareduetotheproductionofpigments第10頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四FilamentousActinomycetesAntibioticactionofsoilmicroorganismsonacrowdedplatestreptomycetesBacillus第11頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四插片法1.倒平板2.接種：劃線培養(yǎng)3.插片：無菌操作將蓋玻片以大約45度角插入培養(yǎng)基4.培養(yǎng)倒置培養(yǎng)28℃，通常4－6天5.鏡檢第12頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四插片法28℃插片培養(yǎng)4-6d，輕輕取出蓋玻片，直接觀察鏡檢。觀察菌絲和孢子絲自然生長的性狀，其中包括氣生菌絲（較粗）、基內(nèi)菌絲（較細(xì)）和孢子絲的形狀，如分枝狀況及孢子絲的卷曲等，并繪圖說明（本實(shí)驗(yàn)采用費(fèi)氏輪生菌接種后觀察

）。首先尋找插在培養(yǎng)基的界面分界線，觀察營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲形態(tài)及分枝情況。調(diào)節(jié)亮度直接鏡檢

第13頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四第14頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四FilamentousActinomycetesStagesintheconversionofastreptomycete’s(鏈霉菌)aerialhyphaintospores(conidia)第15頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四第16頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四Varioustypesofspore-bearingstructuresinthestreptomycetes第17頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四FilamentousActinomycetesSeveralspore-bearingstructuresofactinomycetes:Streptomyces第18頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四第19頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四第20頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四浸染法放線菌形態(tài)觀察插片培養(yǎng)(高氏1號培養(yǎng)基)，取片浸染：把蓋玻片上長有放線菌的部分，放入石碳酸復(fù)紅染液池中浸染0.5-1min染色液：A液：堿性復(fù)紅0.3g,95%乙醇10ml；B液：石碳酸5.0g,蒸餾水95ml。染色時(shí)，混合A液及B液，再將混合液稀釋5倍即成。干燥：染色完畢，用吸水紙吸掉蓋玻片上多余的染液，將蓋玻片放于酒精燈火焰上部烘干，注意溫度不宜高，以免蓋玻片碎裂。鏡檢：取一潔凈載玻片，滴入適量蒸餾水，用鑷子將干燥好的蓋玻片放在滴有蒸餾水的地方，有菌的一面朝上，操作中盡量避免氣泡的產(chǎn)生。蓋玻片緊緊地貼附在載玻片上后，切勿隨意移動(dòng)，隨即進(jìn)行顯微觀察。第21頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四插片法放線菌菌絲（40×）插片法浸染法菌絲（40×）插片法浸染法放線菌孢子（100×）插片法浸染法放線菌孢子（100×）第22頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四印片染色法1.接種培養(yǎng)28℃培養(yǎng)4－7d2.印片：用鑷子取一小塊菌苔，置于載玻片上，取另外一潔凈玻片蓋在菌苔上，輕輕粘一下菌苔表面，使培養(yǎng)物（氣絲、孢子絲、孢子）粘附載玻片中央，過火焰2－3次固定3.染色：石炭酸復(fù)紅染色1min，水洗4.鏡檢（油鏡）.第23頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四印片法放線菌孢子（100×）印片法放線菌菌絲（100×）印片法放線菌孢子（100×）第24頁，共27頁，2023年，2月20日，星期四浸染法放線菌形態(tài)觀察取片－石碳酸復(fù)紅浸染0.5-1min－干燥：注意溫度不宜高－鏡檢：滴入適量蒸餾水，將蓋玻片放在滴有蒸餾水的地方，有菌的一面朝上，顯微觀察。載玻片－印片－固定－石炭酸復(fù)紅染色1min－水洗－晾干－油鏡