色譜法的分類及其原理色譜法的分類及其原理〔一〕按兩相狀態(tài)氣相色譜法:1、氣固色譜法 2、氣液色譜法液相色譜法:1、液固色譜法 2、液液色譜法〔二〕按固定相的幾何形式1、柱色譜法(columnchromatography) 固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細管內壁上做法2、紙色譜法〔paperchromatography〕：紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點在濾紙上，然后用溶劑開放，各組分在濾紙的不同位置以斑點形式顯現，依據濾紙上斑點位置及大小進展定性和定量分析。3、薄層色譜法(thin-layerchromatography,TLC) 法是將適當粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以到達分別目的。〔三〕按分別原理其分為：1、吸附色譜法：利用吸附劑外表對不同組分物理吸附性能的差異合物〔例如，分別醇類與芳香烴〕。2、安排色譜法：利用固定液對不同組分安排性能的差異而使之分別的色譜法稱為安排色譜法。3、離子交換色譜法：利用離子交換原理和液相色譜技術的結合基酸、核酸、蛋白質等的分別。4、尺寸排阻色譜法：是按分子大小挨次進展分別的一種色譜方對分子質量的分布。5、親和色譜法：相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作〕、抗原與抗體，激素性病毒及細胞。或用于對特異的相互作用進展爭論。〔四〕按原理色譜過程的本質是待分別物質分子在固定相和流淌相之間別。1、吸附色譜:吸附色譜利用固定相吸附中心對物質分子吸附力量的差異實現對混合物的分別，吸附色譜的色譜過程是流淌相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程K_a=\frac{[X_a]}{[X_m]}其中[Xa][Xm]表示游離于流淌相中的組分分子含量。安排系數對于計算待分別物質組分的保存時間有很重要的意義。2、安排色譜：安排色譜利用固定相與流淌相之間對待分別組分溶解度的差異來實現分別。安排色譜的固定相一般為液相的溶溶解平衡的過程。K=\frac=\frac{X_s/V_s}{X_m/V_m}式中Cs代表組分分子在固定相液體中的溶解度，Cm代表組分分子在流淌相中的溶解度。3、離子交換色譜：離子交換色譜利用被分別組分與固定相之間固有離子與待分別組分中的離子之間相互爭奪固定相中的離子交換中心，并隨著流淌相的運動而運動，最終實現分別。K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}其中[RX+[X4、凝膠色譜：凝膠色譜的原理比較特別，類似于分子篩。待分別大小，獲得不同的分別效果。5、吸附色譜：吸附色譜利用固定相吸附中西對物質分子吸附力量子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程。〔五〕按操作方式吸附薄層色譜法是指依據各成分對同一吸附劑吸附力量不〔吸附劑〕的過程中，連續(xù)分別的目的。效液相色譜法等。1、柱色譜：柱色譜法是最原始的色譜方法，這種方法將固定相物、自然提取物以及生物大分子的分別。2、薄層色譜：薄層色譜法是應用格外廣泛的色譜方法，這種色進程的檢測等用途。3GC主要是利用物質的沸點、極性及吸附性質的差異來實現混合物的分別，其過程如圖氣相分析流程圖所示。待分析樣品在汽化室汽化后被惰性氣體〔即載氣，也叫流淌相〕帶入色譜柱，柱內含有液體或固體流淌相，由于樣品中各組分的沸點、極性或吸附性能不同，每種組分都傾向于在流淌相和固定相之間形成安排或吸附平衡。但由于載氣是流淌的，這種平衡實際上很難建立起來。也正是由于載氣的流淌，使樣品組分在運動中進展反復屢次的安排或吸附/解吸附，結果是在載氣中濃度大的組分先流精彩譜柱，而在固定相中安排濃度大的組分后流出。當組分流精彩譜柱后，馬上進入檢測器。檢測器能夠將樣品組分的與否轉變?yōu)殡娦盘枺娦盘柕拇笮∨c被測組分的量或濃度成正比。當將這些信號放大并記錄下來時，就是氣相色譜圖了。氣相色譜被廣泛應用于小分子量簡單組分物質的定量分析。4、高效液相色譜：高效液相色譜法是在經典色譜法的根底上，引〔最高輸送壓力可達4.9′107Pa〕;色譜柱是以特別的方法用小粒徑的填料填充而成〔高效液相色譜〔HPLC〕是目前應用最多的色譜分析方法，高效液相色譜系統(tǒng)由流淌相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流淌HPLC平穩(wěn)；進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴密；由于液體流淌相