關于抗生素類藥物的分析第一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第一節概述抗生素的定義

在低微濃度下即可對某些生物（病原微生物）的生命活動有特異抑制作用的化學物質的總稱抗生素是細菌、放線菌和真菌等微生物的代謝產物，對各種病原微生物有強大的抑制或殺滅作用。第二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一一、抗生素類藥物的特點1.化學純度低同系物多、異構體多、降解物多2.活性組分易發生變異微生物菌株的變化、發酵條件改變3.穩定性差分子結構大多不穩定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用第三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、抗生素類藥物的質量分析（一）鑒別試驗1.化學方法利用某些官能團的特性，利用適當的試液與其反應顯色2.物理化學方法紫外分光光度法、紅外分光光度法3.生物學方法特異的酶反應第四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、抗生素類藥物的質量分析（二）雜質檢查1.影響產品穩定性的指標水分、酸堿度、干燥失重2.控制有機、無機雜質的指標溶液的澄清度與顏色、重金屬、殘留溶劑、熾灼殘渣3.與臨床安全性密切相關的指標熱源、細菌內毒素、無菌、降壓物質4.其他指標β-內酰胺類抗生素：聚合物第五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（三）含量測定或效價測定1.微生物檢定法以抗生素對微生物的殺傷或抑制程度為指標來衡量抗生素效價的一種方法。第六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（三）含量測定或效價測定1.微生物檢定法優點1、靈敏度高、需用量小、測定結果直觀2、測定原理與臨床一致，適用范圍廣3、同一類型的抗生素無需分離，一次測定總效價缺點1、操作繁瑣2、培養時間長3、測定誤差大第七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.理化方法適用于提純的以及化學結構已確定的抗生素優點1.操作簡單、省時、方法準確2.專屬性1.不一定代表生物效價缺點2.易受雜質干擾第八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3.抗生素活性表示方法效價：每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少第九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、抗生素的分類（按結構與性質）：

β–內酰胺類、氨基糖苷類、四環素類、大環內酯類、氯霉素類、其他抗生素類第十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第二節β–內酰胺類抗生素

青霉素類第十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一頭孢菌素類第十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一青霉素（青霉素G、芐青霉素）第十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一氨芐西林

（氨芐青霉素）第十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一阿莫西林

（羥氨芐青霉素）第十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一普魯卡因青霉素第十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一頭孢氨芐第十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一頭孢拉定第十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一頭孢羥氨芐第十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一頭孢噻吩鈉第二十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一一、結構與性質Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽1.酸性和溶解度易溶于水第二十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一與有機堿(普魯卡因)成鹽

難溶于水，易溶于甲醇普魯卡因青霉素第二十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.旋光性

頭孢菌素類C6C7青霉素類C3C5C6

﹡﹡﹡﹡﹡第二十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

3.紫外吸收特征頭孢菌素類母核有共軛體系青霉素類母核無明顯UV

多數有苯環取代基第二十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4.β-內酰胺環的不穩定性水溶液不穩定干燥純凈穩定不穩定性因素四元環張力大酰胺鍵易水解第二十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羥胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2第二十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（一）呈色反應1.羥肟酸鐵反應β-內酰胺類NaOH呈色硫酸鐵銨試液H+二、鑒別第二十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.茚三酮反應△α-氨基第二十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.雙縮脲反應β-內酰胺類（開環分解）似肽鍵第二十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3.與重氮苯磺酸反應（偶合）酚羥基頭孢哌酮第三十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）沉淀反應1.遇酸→↓在過量HCl或有機溶劑（乙醇、三氯甲烷、乙醚）中溶解第三十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.重氮化-偶合反應重氮化-偶合反應芳伯氨基第三十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一K+、Na+反應（三）

焰色→鮮黃色

+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色

+0.1%四苯硼鈉+Ac→↓白

K+第三十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一光譜法（四）1、UV法樣品、分解產物第三十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（五）IR法第三十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一色譜法（五）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法第三十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、特殊雜質的檢查高分子雜質檢查頭孢他啶、頭孢曲松鈉、頭孢哌酮鈉分子排阻色潽法、離子交換色譜法、反相色譜法吸光度檢查青霉素鈉吸光度：0.80-0.8第三十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四、含量測定微生物檢定法汞量法HPLC第三十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一汞量法（一）1.原理（水解）青霉素族ChP青霉素與汞鹽不反應降解產物與汞鹽反應巰基化合物與汞定量反應，可測得總青霉素含量第三十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.方法青霉素鈉含量測定

取本品約50mg，精密稱定，加水5ml溶解后，加1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置15分鐘，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸鹽緩沖(pH4.6)20ml及水20ml，搖勻，照電位滴定法，在35～40℃，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)緩慢滴定（控制滴定過程約為15分鐘）。每1ml硝酸汞滴定(0.02mol/L)相當于7.128mg的總青霉素

第四十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一另取本品約0.5g，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立即用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)滴定，終點判斷方法同上。每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當于7.128mg的降解物。總青霉素的百分含量與降解物的百分含量之差值即為青霉素的含量。第四十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4、計算第四十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

精密稱取含水量為0.5%的青霉素鈉0.0502g，按藥典方法測定總青霉素含量時，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)6.97ml。另精密稱取上述樣品0.5013g，按藥典方法測定降解物含量時，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)1.33ml。以干燥品計算，求樣品中青霉素的含量。例青霉素鈉含量測定第四十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一HPLC法（二）ChP頭孢菌素類內標法＋校正因子外標法特點快速、高效、靈敏專屬性強、重現性好一法多用（鑒別、檢查、含測）第四十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第三節氨基糖苷類抗生素常見藥物：硫酸鏈霉素硫酸阿米卡星新霉素卡那霉素硫酸慶大霉素妥布霉素氨基環醇與氨基糖縮合形成含有多羥基，又稱為多羥基抗生素第四十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一鏈霉素鏈霉胍+鏈霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺苷元糖鏈霉雙糖胺第四十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第四十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第四十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一慶大霉素

糖苷元絳紅糖胺+脫氧鏈霉胺+加洛糖胺

糖第四十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第五十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第五十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一慶大霉素C復合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3

慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3

慶大霉素C1aR、R1、R2=H

慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H慶大霉素C2bR=R1=HR2=CH3第五十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、性質多與硫酸成鹽鏈霉素3個慶大霉素5個堿性中心堿性1水溶性溶解性2.旋光性第五十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一鏈霉素pH4～7慶大霉素pH2～12穩定UV4.穩定性3.鏈霉素在230nm處有紫外吸收第五十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一坂口反應N-甲基葡萄糖胺反應麥芽酚反應水解產物第五十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、鑒別試驗

茚三酮反應（一）△羥基胺結構第五十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一鏈霉胍特有反應（或α-萘酚）坂口反應（二）方法：取本品0.5mg，加水4ml溶解，加氫氧化鈉試液2.5ml與0.1%8-羥基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至15℃，加次溴酸鈉試液3滴，即顯橙紅色第五十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一

麥芽酚反應（三）

鏈霉糖特有反應H+分子重排硫酸鏈霉素的反應：取本品約20mg，加水5ml溶解后，加氫氧化鈉溶液0.3ml，置水浴上加熱5分鐘，加硫酸鐵銨溶液0.5ml，即顯紫紅色第五十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一N-甲基葡萄糖胺反應（四）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+紅色（Elson-Morgan反應）第五十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（五）硫酸鹽的鑒別反應H+TLC法（六）第六十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、特殊雜質檢查及組分分析鏈霉素雜質鏈霉素B（水解后為甘露糖、鏈霉素）

方法TLC中的對照品法1.來源反應中間體第六十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一薄層色譜法檢查鏈霉素B取本品0.25g，精密稱定，置回流瓶中，加5ml新鮮配制的硫酸-甲醇溶液溶解，加熱回流1小時，冷卻，用甲醇沖洗冷凝管，合并沖洗液，并用甲醇定量稀釋成每1ml中含10mg的溶液，作為供試品溶液。第六十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一薄層色譜法檢查鏈霉素B精密稱取甘露糖對照品36mg，置回流瓶中，同法處理后定量制成每1ml中含72ug的溶液，作為對照溶液取上述溶液，點于同一薄層板上，展開，晾干，顯色供試品溶液所顯鏈霉素B斑點的顏色與對照溶液主斑點比較，不得更深第六十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四、含量測定鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法本法系利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用量反應平行線原理的設計，比較標準品與供試品兩者對接種的試驗菌產生抑菌圈的大小，以測定供試品效價的一種方法。第六十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第四節四環素類抗生素ABCD第六十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一123456789101112第六十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四環素（TC）tetracycline第六十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一金霉素(CTC)chlortetracycline氯四環素第六十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一土霉素(OTC)oxytetracycline氧四環素第六十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一多西環素(DOTC)doxycycline脫氧土霉素第七十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一美他環素（METC）metacycline第七十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一第七十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（二）性質酸堿性1.與酸、堿均能成鹽強酸或強堿中溶解度↑

酚羥基、烯醇型羥基弱酸性二甲胺基弱堿性第七十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2.溶解性和吸濕性pH4.5-7.2，難溶于水pH低于4或高于8，溶解度增大具引濕性，含有結晶水第七十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3.旋光性用于定性或定量4.紫外吸收和熒光性質第七十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一5.不穩定性（1）差向異構化淡黃→黑藍色熒光第七十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一差向四環素第七十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（土霉素、多西環素不易差向異構化）第七十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（2）酸性條件下的降解λmax=445nmλmax=435nm橙黃色第七十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一脫水四環素第八十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一（3）堿性條件下的降解（熒光）第八十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+與金屬離子絡合6.第八十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一二、鑒別試驗H2SO4反應（一）第八十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一FeCl3反應（二）第八十四頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一熒光法（三）UV綠色熒光H+UV第八十五頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一TLC法（四）正相分配薄層色譜HPLC法（五）EDTA克服痕量金屬造成的拖尾現象第八十六頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一三、檢查有關物質（一）HPLC法（2010版）第八十七頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一吸收度（二）第八十八頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一四、含量測定ChP、USPHPLC法（外標法）系統適用性試驗1.防護柱2.預試溶液

4-差向脫水四環素四環素3.RSD≤2.0%第八十九頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一1．下列哪個藥物會發生羥肟酸鐵反應

A.青霉素

B.慶大霉素

C.紅霉素

D.鏈霉素

E.維生素C第九十頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一2．中國藥典(2010年版)測定頭孢菌素類藥物的含量時，多數采用的方法是

A.微生物法

B.碘量法

C.汞量法

D.正相高效液相色譜法

E.反相高效液相色譜法第九十一頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一3．屬于-內酰胺類的抗生素藥物有

A.青霉素

B.紅霉素

C.頭孢菌素

D.慶大霉素

E.四環素第九十二頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一4．能和茚三酮發生呈色反應的物質有

A．鏈霉素

B．慶大霉素

C．土霉素

D．氨基酸

E．苯巴比妥第九十三頁，共一百頁，編輯于2023年，星期一5.青霉素類藥物可用下面哪些方法測定

A.三氯化鐵比色法

B.汞量法

C.碘量法

D.硫醇汞鹽法