操作環境：操作對象：操作水平：實質：結果：生物體外基因DAN分子水平基因重組新的生物類型或生物產品操作環境：生物體外基因DAN分子水平基因重組新的生物類型或生11.1DNA重組技術的基本工具1.需要基因的剪刀——限制性核酸內切酶。2.需要基因的針線——DNA連接酶。3.需要基因的運輸工具——運載體。1.1DNA重組技術的基本工具1.需要基因的剪刀——限制2識別______________________________序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的__________斷開。主要是從原核生物中分離純化出來的一類酶。4000種。1.來源：2.種類：3.作用：5.結果：形成兩種末端黏性末端平末端一、限制性核酸內切酶----“剪刀”：雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸磷酸二酯鍵4.識別的序列：大多由____個核苷酸組成，少數由

4、5或8個核苷酸組成6識別____________________________3限制酶同種限制酶切出的黏性末端相同限制酶同種限制酶切出的黏性末端相同4同種限制酶切出的平末端也相同同種限制酶切出的平末端也相同5-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-下列黏性末端是否屬于同一種限制酶切割形成的？-C-A--G-T-T-C-C61、種類：2、作用部位：兩類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶

磷酸二酯鍵

DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來。二、DNA連接酶－－“針線”氫鍵—自動生成1、種類：兩類E·coliDNA連接酶磷酸二酯鍵7三、基因的運載體2、運載體的種類：（1）質粒質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于核DNA之外能自我復制的很小的雙鏈環狀DNA分子。

（2）噬菌體（3）某些動植物病毒將外源基因送入受體細胞1、運載體的作用：天然質粒能否直接用于基因工程操作中？三、基因的運載體2、運載體的種類：將外源基因送入受體細胞1、8復制原點：能復制并帶著插入的目的基因一起復制限制酶切位點：有一至多個種標記基因：用來檢測目的基因是否導入受體細胞，將含有目的基因的受體細胞篩選出來。P11以質粒為例，了解運載體的特點天然質粒一般不能直接用于基因工程操作中??！復制原點：能復制并帶著插入的目的基因一起復制限制酶切位點：有9以質粒為例，了解運載體的特點1、小型、裸露DNA2、有一個至多個限制酶切割位點3、能在受體細胞內穩定存在并復制4、有標記基因天然質粒一般不能直接用于基因工程操作中??！以質粒為例，了解運載體的特點1、小型、裸露DNA天然質粒一般101.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取11①、從基因文庫中獲得1.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲?、?、利用PCR技術擴增目的基因變性復性延伸③、人工合成①、從基因文庫中獲得1.2基因工程的基本操作程序1、目的121.2

基因工程的基本操作程序2、基因表達載體的構建1、目的基因的獲取【點撥】啟動子、終止子與起始密碼子、終止密碼子不同：啟動子、終止子在DNA上,在遺傳信息轉錄時起調控作用；而起始密碼子、終止密碼子在mRNA上,在翻譯時起作用,決定翻譯的開始和結束。1.2基因工程的基本操作程序2、基因表達載體的構建1、目131.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化固定吸管1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表141.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表15雜交帶：將待測的DNA樣品酶切后，電泳處理，不同大小的片段分離，形成一條條層帶（看不見），然后用醋酸纖維膜吸附，通過化學處理，再用放射性探針涂布、洗脫。探針就保留在該片段所在的層帶。然后采用放射自顯影技術，即含溴化銀的乳膠（好像和膠卷顯影一個原理）涂布，黑暗擺放，放射性元素衰變放射出的伽馬射線使探針存在的層帶呈現黑色，這些黑色層帶即雜交帶。雜交帶：將待測的DNA樣品酶切后，電泳處理，不同大小的片段分161.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表171.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定如何讓一頭奶牛產生含有人的生長激素的牛奶，說出相關步驟提取人的生長激素基因——構建人的生長激素基因表達載體——將人的生長激素基因導入奶牛的受精卵——人生長激素基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表18【高考警示鐘】1.目的基因的插入位點不是隨意的基因表達需要啟動子與終止子的調控，所以目的基因應插入到啟動子與終止子之間的部位。2.基因工程操作過程中只有第三步(將目的基因導入受體細胞)沒有堿基互補配對現象第一步存在逆轉錄法獲得DNA，第二步存在黏性末端連接現象，第四步檢測存在分子水平雜交方法。【高考警示鐘】196.關于現代生物技術相關知識的敘述，正確的是：A、限制酶只能識別并作用于特定的DNA分子，體現了酶的專一性B、基因工程的設計和施工都是在細胞水平上進行的C、用限制酶切割一個DNA分子，獲得一個目的基因，同時有兩個磷酸二酯鍵被水解D、在構建基因表達載體的過程中，通常要用同種限制酶切割質粒和目的基因，以得到相同的黏性末端，便于目的基因與運載體的結合√6.關于現代生物技術相關知識的敘述，正確的是：√20專題基因工程課件211.3

基因工程的應用★用轉基因動物生產藥物乳腺生物反應器★用轉基因動物作器官移植供體避免免疫排斥★工程菌生產藥物干擾素★基因治療1.3基因工程的應用★用轉基因動物生產藥物乳腺生物反應器222.下列關于基因工程應用的敘述，正確的是()A.我國的轉基因抗蟲棉轉入的抗蟲基因是Bt毒蛋白基因B.利用乳腺生物反應器能夠獲得一些重要醫藥產品，如人的血清白蛋白，這是因為將人的血清白蛋白基因轉入了動物的乳腺細胞中C.由大腸桿菌工程菌獲得人的干擾素后可直接應用D.為培育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體√受精卵糖蛋白無內質網和高爾基體植物細胞都具有全能性2.下列關于基因工程應用的敘述，正確的是()√受精卵糖2310.下列有關基因工程的相關敘述中，正確的是(雙選)A.基因治療就是去除生物體細胞中有缺陷的突變基因B.運載體上抗性基因的存在有利于對運載體是否導入受體細胞進行檢測C.在基因工程操作中，必須用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和質粒D.轉基因技術造成的變異，實質上相當于人為的基因重組，卻產生了定向變異基因治療:將外源正常基因導入靶細胞，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療目的標記基因只要目的基因和質粒獲得的末端能互補就能連接-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-√√10.下列有關基因工程的相關敘述中，正確的是(雙選)基因治療241.4

蛋白質工程的崛起一、蛋白質工程崛起的緣由改造干擾素（半胱氨酸）體外很難保存干擾素（絲氨酸）體外可以保存半年玉米中賴氨酸含量比較低天冬氨酸激酶（352位的蘇氨酸）二氫吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）改造改造天冬氨酸激酶（異亮氨酸）二氫吡啶二羧酸合成酶（異亮氨酸）玉米中賴氨酸含量可提高數倍基因工程只能生產自然界已存在的蛋白質。天然蛋白質的結構和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類生產和生活的需要。1.4蛋白質工程的崛起一、蛋白質工程崛起的緣由改造干擾素252、蛋白質工程的原理：基因改造2、蛋白質工程的原理：基因改造26【典例訓練2】(2011·茂名模擬)下列關于蛋白質工程和基因工程的比較，不合理的是A.基因工程原則上只能生產自然界已存在的蛋白質，而蛋白質工程可以對現有蛋白質進行改造，從而制造一種新的蛋白質B.蛋白質工程是在基因工程的基礎上發展起來的，蛋白質工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成C.當得到可以在-70℃條件下保存半年的干擾素后，在相關酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下，干擾素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白質工程產生的變異都是可遺傳的√【典例訓練2】(2011·茂名模擬)下列關于蛋白質工程和基因27例題.(雙選)下列有關蛋白質工程的說法正確的是()A.蛋白質工程也需構建基因表達載體B.通過蛋白質工程改造后的蛋白質有的仍是天然的蛋白質C.蛋白質工程需要限制酶和DNA連接酶D.蛋白質工程是在蛋白質分子水平上改造蛋白質的√√例題.(雙選)下列有關蛋白質工程的說法正確的是()√√282.如圖表示蛋白質工程的操作過程，下列說法不正確的是()A.蛋白質工程中對蛋白質分子結構的了解是非常關鍵的工作B.蛋白質工程是完全擺脫基因工程技術的一項全新的生物工程技術C.a、b過程分別是轉錄、翻譯D.蛋白質工程中可能構建出一種全新的基因√2.如圖表示蛋白質工程的操作過程，下列說法不正確的是(292.(2011·茂名模擬)科學家為提高玉米中賴氨酸的含量，計劃將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶的第104位的天冬酰胺變成異亮氨酸，變化后就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍，該生物技術為()A.基因工程B.蛋白質工程C.誘變育種D.細胞工程【解析】選B。2.(2011·茂名模擬)科學家為提高玉米中賴氨酸的含量，計30（2011海南生物卷）回答有關基因工程的問題：構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生粘性末端，也可能產生_平__末端。若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生_相同_（相同，不同）粘性末端的限制酶。（2011上海生命科學卷)57．基因工程中使用的限制酶，其特點是:特異性地識別和切割DNA序列（1分）（2011海南生物卷）回答有關基因工程的問題：31利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是提供RNA聚合酶特異性識別結合位點，驅動基因轉錄。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用Ca2+處理大腸桿菌，以利于表達載體進入：為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為DNA—RNA分子雜交。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素原（蛋白質）_，常用抗原-抗體雜交技術。如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T—DNA_中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA_上。利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及32基因工程基本工具分子手術刀：分子縫合針：分子運輸車：限制性核酸內切酶（來源、作用、結果）DNA連接酶（分類、作用）運載體（載體類型、條件）基因操作程序目的基因的獲取從基因文庫中獲取用PCR技術擴增基因組文庫cDNA文庫原理大致過程基因表達載體的構建構建目的構建零件及作用目的基因導入受體細胞導入植物細胞的方法導入動物細胞的方法導入微生物細胞的方法應用目的基因的檢測與鑒定分子水平的檢測個體生物學水平的鑒定基因工程基本工具分子手術刀：分子縫合針：分子運輸車：限制性核33專題基因工程課件34專題基因工程課件352.限制酶的作用實際上就是使DNA上某些化學鍵斷開，一種能對GAATTC專一識別的限制酶，斷開的化學鍵是()A.G與A之間的鍵B.G與C之間的鍵C.A與T之間的鍵D.磷酸與脫氧核糖之間的鍵TA12345123452.限制酶的作用實際上就是使DNA上某些化學鍵斷開，一種能對362.(2011·福州模擬)據圖所示，有關工具酶功能的敘述不正確的是()A.限制性內切酶可以切斷a處，DNA連接酶可以連接a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開D.連接c處的酶可以為DNA連接酶2.(2011·福州模擬)據圖所示，有關工具酶功能的敘述不正374.(雙選)質粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細菌體內。某細菌質粒上的標記基因如圖所示，通過標記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉移成功。外源基因插入的位置不同，細菌在培養基上生長情況也不同，圖示外源基因在質粒中可插入的位置有a、b、c三點。某同學根據實驗現象對其插入的位點進行分析，其中分析正確的是()4.(雙選)質粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細菌體38氨四氨四393.(2010·江蘇高考)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：金榜1803.(2010·江蘇高考)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其401.下列關于基因工程的說法中，正確的是()A.基因工程的設計和施工都是在細胞水平上進行的B.目前基因工程所有的目的基因都是從供體細胞中直接分離得到的C.只要檢測出受體細胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功表達D.基因工程能使科學家打破物種界限，定向改造生物性狀1.下列關于基因工程的說法中，正確的是()41操作環境：操作對象：操作水平：實質：結果：生物體外基因DAN分子水平基因重組新的生物類型或生物產品操作環境：生物體外基因DAN分子水平基因重組新的生物類型或生421.1DNA重組技術的基本工具1.需要基因的剪刀——限制性核酸內切酶。2.需要基因的針線——DNA連接酶。3.需要基因的運輸工具——運載體。1.1DNA重組技術的基本工具1.需要基因的剪刀——限制43識別______________________________序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的__________斷開。主要是從原核生物中分離純化出來的一類酶。4000種。1.來源：2.種類：3.作用：5.結果：形成兩種末端黏性末端平末端一、限制性核酸內切酶----“剪刀”：雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸磷酸二酯鍵4.識別的序列：大多由____個核苷酸組成，少數由

4、5或8個核苷酸組成6識別____________________________44限制酶同種限制酶切出的黏性末端相同限制酶同種限制酶切出的黏性末端相同45同種限制酶切出的平末端也相同同種限制酶切出的平末端也相同46-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-下列黏性末端是否屬于同一種限制酶切割形成的？-C-A--G-T-T-C-C471、種類：2、作用部位：兩類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶

磷酸二酯鍵

DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來。二、DNA連接酶－－“針線”氫鍵—自動生成1、種類：兩類E·coliDNA連接酶磷酸二酯鍵48三、基因的運載體2、運載體的種類：（1）質粒質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于核DNA之外能自我復制的很小的雙鏈環狀DNA分子。

（2）噬菌體（3）某些動植物病毒將外源基因送入受體細胞1、運載體的作用：天然質粒能否直接用于基因工程操作中？三、基因的運載體2、運載體的種類：將外源基因送入受體細胞1、49復制原點：能復制并帶著插入的目的基因一起復制限制酶切位點：有一至多個種標記基因：用來檢測目的基因是否導入受體細胞，將含有目的基因的受體細胞篩選出來。P11以質粒為例，了解運載體的特點天然質粒一般不能直接用于基因工程操作中??！復制原點：能復制并帶著插入的目的基因一起復制限制酶切位點：有50以質粒為例，了解運載體的特點1、小型、裸露DNA2、有一個至多個限制酶切割位點3、能在受體細胞內穩定存在并復制4、有標記基因天然質粒一般不能直接用于基因工程操作中！！以質粒為例，了解運載體的特點1、小型、裸露DNA天然質粒一般511.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取52①、從基因文庫中獲得1.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲?、?、利用PCR技術擴增目的基因變性復性延伸③、人工合成①、從基因文庫中獲得1.2基因工程的基本操作程序1、目的531.2

基因工程的基本操作程序2、基因表達載體的構建1、目的基因的獲取【點撥】啟動子、終止子與起始密碼子、終止密碼子不同：啟動子、終止子在DNA上,在遺傳信息轉錄時起調控作用；而起始密碼子、終止密碼子在mRNA上,在翻譯時起作用,決定翻譯的開始和結束。1.2基因工程的基本操作程序2、基因表達載體的構建1、目541.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化固定吸管1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表551.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表56雜交帶：將待測的DNA樣品酶切后，電泳處理，不同大小的片段分離，形成一條條層帶（看不見），然后用醋酸纖維膜吸附，通過化學處理，再用放射性探針涂布、洗脫。探針就保留在該片段所在的層帶。然后采用放射自顯影技術，即含溴化銀的乳膠（好像和膠卷顯影一個原理）涂布，黑暗擺放，放射性元素衰變放射出的伽馬射線使探針存在的層帶呈現黑色，這些黑色層帶即雜交帶。雜交帶：將待測的DNA樣品酶切后，電泳處理，不同大小的片段分571.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表581.2

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建3、將目的基因導入受體細胞轉化4、目的基因的檢測與鑒定如何讓一頭奶牛產生含有人的生長激素的牛奶，說出相關步驟提取人的生長激素基因——構建人的生長激素基因表達載體——將人的生長激素基因導入奶牛的受精卵——人生長激素基因的檢測與鑒定1.2基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表59【高考警示鐘】1.目的基因的插入位點不是隨意的基因表達需要啟動子與終止子的調控，所以目的基因應插入到啟動子與終止子之間的部位。2.基因工程操作過程中只有第三步(將目的基因導入受體細胞)沒有堿基互補配對現象第一步存在逆轉錄法獲得DNA，第二步存在黏性末端連接現象，第四步檢測存在分子水平雜交方法?！靖呖季剧姟?06.關于現代生物技術相關知識的敘述，正確的是：A、限制酶只能識別并作用于特定的DNA分子，體現了酶的專一性B、基因工程的設計和施工都是在細胞水平上進行的C、用限制酶切割一個DNA分子，獲得一個目的基因，同時有兩個磷酸二酯鍵被水解D、在構建基因表達載體的過程中，通常要用同種限制酶切割質粒和目的基因，以得到相同的黏性末端，便于目的基因與運載體的結合√6.關于現代生物技術相關知識的敘述，正確的是：√61專題基因工程課件621.3

基因工程的應用★用轉基因動物生產藥物乳腺生物反應器★用轉基因動物作器官移植供體避免免疫排斥★工程菌生產藥物干擾素★基因治療1.3基因工程的應用★用轉基因動物生產藥物乳腺生物反應器632.下列關于基因工程應用的敘述，正確的是()A.我國的轉基因抗蟲棉轉入的抗蟲基因是Bt毒蛋白基因B.利用乳腺生物反應器能夠獲得一些重要醫藥產品，如人的血清白蛋白，這是因為將人的血清白蛋白基因轉入了動物的乳腺細胞中C.由大腸桿菌工程菌獲得人的干擾素后可直接應用D.為培育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體√受精卵糖蛋白無內質網和高爾基體植物細胞都具有全能性2.下列關于基因工程應用的敘述，正確的是()√受精卵糖6410.下列有關基因工程的相關敘述中，正確的是(雙選)A.基因治療就是去除生物體細胞中有缺陷的突變基因B.運載體上抗性基因的存在有利于對運載體是否導入受體細胞進行檢測C.在基因工程操作中，必須用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和質粒D.轉基因技術造成的變異，實質上相當于人為的基因重組，卻產生了定向變異基因治療:將外源正?；驅氚屑毎约m正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療目的標記基因只要目的基因和質粒獲得的末端能互補就能連接-C-A--G-T-T-C-C-AA-G-G-T-T-G-A-C-√√10.下列有關基因工程的相關敘述中，正確的是(雙選)基因治療651.4

蛋白質工程的崛起一、蛋白質工程崛起的緣由改造干擾素（半胱氨酸）體外很難保存干擾素（絲氨酸）體外可以保存半年玉米中賴氨酸含量比較低天冬氨酸激酶（352位的蘇氨酸）二氫吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）改造改造天冬氨酸激酶（異亮氨酸）二氫吡啶二羧酸合成酶（異亮氨酸）玉米中賴氨酸含量可提高數倍基因工程只能生產自然界已存在的蛋白質。天然蛋白質的結構和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類生產和生活的需要。1.4蛋白質工程的崛起一、蛋白質工程崛起的緣由改造干擾素662、蛋白質工程的原理：基因改造2、蛋白質工程的原理：基因改造67【典例訓練2】(2011·茂名模擬)下列關于蛋白質工程和基因工程的比較，不合理的是A.基因工程原則上只能生產自然界已存在的蛋白質，而蛋白質工程可以對現有蛋白質進行改造，從而制造一種新的蛋白質B.蛋白質工程是在基因工程的基礎上發展起來的，蛋白質工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成C.當得到可以在-70℃條件下保存半年的干擾素后，在相關酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下，干擾素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白質工程產生的變異都是可遺傳的√【典例訓練2】(2011·茂名模擬)下列關于蛋白質工程和基因68例題.(雙選)下列有關蛋白質工程的說法正確的是()A.蛋白質工程也需構建基因表達載體B.通過蛋白質工程改造后的蛋白質有的仍是天然的蛋白質C.蛋白質工程需要限制酶和DNA連接酶D.蛋白質工程是在蛋白質分子水平上改造蛋白質的√√例題.(雙選)下列有關蛋白質工程的說法正確的是()√√692.如圖表示蛋白質工程的操作過程，下列說法不正確的是()A.蛋白質工程中對蛋白質分子結構的了解是非常關鍵的工作B.蛋白質工程是完全擺脫基因工程技術的一項全新的生物工程技術C.a、b過程分別是轉錄、翻譯D.蛋白質工程中可能構建出一種全新的基因√2.如圖表示蛋白質工程的操作過程，下列說法不正確的是(702.(2011·茂名模擬)科學家為提高玉米中賴氨酸的含量，計劃將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶的第104位的天冬酰胺變成異亮氨酸，變化后就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍，該生物技術為()A.基因工程B.蛋白質工程C.誘變育種D.細胞工程【解析】選B。2.(2011·茂名模擬)科學家為提高玉米中賴氨酸的含量，計71（2011海南生物卷）回答有關基因工程的問題：構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生粘性末端，也可能產生_平__末端。若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生_相同_（相同，不同）粘性末端的限制酶。（2011上海生命科學卷)57．基因工程中使用的限制酶，其特點是:特異性地識別和切割DNA序列（1分）（2011海南生物卷）回答有關基因工程的問題：72利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是提供RNA聚合酶特異性識別結合位點，驅動基因轉錄。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用Ca2+處理大腸桿菌，以利于表達載體進入：為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為DNA—RNA分子雜交。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素原（蛋白質）_，常用抗原-