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第1部分專題5課題1理解教材新知把握熱點考向應用創(chuàng)新演練知識點一知識點二考向一考向二DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!元貝駕考.

元貝駕考2016科目一科目四

金手指考試.

金手指駕駛員考試DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!如何將DNA進一步提純?提純后是否能得到純凈的DNA?提示:利用DNA不溶于冷酒精,而蛋白質(zhì)溶于冷酒精的原理進一步提純DNA。提純后的DNA中仍含有一定量雜質(zhì)。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液總結(jié)①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。在NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時,DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而逐漸降低;在0.14mol/L時,DNA溶解度最小;當NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時,DNA的溶解度又逐漸增大②選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!蒸餾水洗滌劑DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!1.可否選用哺乳動物成熟紅細胞作實驗材料,為什么?提示:不可以,因為哺乳動物成熟紅細胞無細胞核。

2.提純時,為什么要選用體積分數(shù)為95%的冷酒精?提示:冷酒精提純效果更好。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!2.實驗過程中的幾點注意事項

(1)兩次使用蒸餾水的作用:次用蒸餾水是使雞血細胞吸水漲破,提取核DNA;第二次用蒸餾水稀釋NaCl溶液,使DNA析出。

(2)實驗中三次過濾操作的比較:過濾次數(shù)過濾目的次過濾核外物質(zhì),除去不溶的雜質(zhì)第二次過濾除DNA外的其他核內(nèi)物質(zhì),尤其是核蛋白第三次過濾DNA濾液DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!③二苯胺最好現(xiàn)配現(xiàn)用,否則二苯胺變成淺藍色,影響鑒定效果。④析出含DNA的黏稠物時,蒸餾水要沿燒杯內(nèi)壁慢慢地加入,不能一次快速加入,否則會影響實驗結(jié)果。⑤實驗中有多次攪拌,但是其目的及操作方法是不同的,要注意區(qū)分,否則也會影響結(jié)果。

(2)分析DNA中的雜質(zhì):本實驗提取的DNA粗制品中有可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁![例2](2010·江蘇高考)某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,具體步驟如下:材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10g。剪碎后分成兩組,一組置于20℃、另一組置于-20℃條件下保存24h。

DNA粗提取:步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20℃++++++-20℃+++++++++注:“+”越多表示藍色越深。分析上述實驗過程,回答下列問題:(1)該探究性實驗的課題名稱是________________________。(2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少________。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁![解析]

如果DNA斷裂,就不容易被提取出來;溫度主要是通過影響酶的活性來影響生理過程。粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白質(zhì),可以通過氯仿的特殊功能來去除蛋白質(zhì),提高DNA純度。

[答案]

(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA斷裂

(3)①等質(zhì)量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的DNA量最多②低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢

(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!1.DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低。

2.DNA不溶于酒精,但是細胞中的某些蛋

白質(zhì)溶于酒精,可利用酒精將DNA和蛋

白質(zhì)分開。3.DNA對蛋白酶、高溫和洗滌劑有耐受性。4.在加熱條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色。5.哺乳動物成熟的紅細胞不含細胞核,不能作為提取DNA的實驗材料。若選取肝臟細胞或植物細胞,則必須充分研磨。6.實驗中加入檸檬酸鈉的作用:作為抗凝劑,防止血液凝固。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!

[自讀教材·夯基礎(chǔ)]1.原理

(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在

溶液中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)?/p>

就能使DNA充分溶解,而使

沉淀,或者相反,以達到分離目的。

(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精,這樣可將DNA和蛋白質(zhì)進一步分離。不同濃度的NaCl鹽濃度雜質(zhì)(3)DNA的鑒定:DNA+

。二苯胺藍色DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!2.DNA的耐受性

(1)蛋白酶不能水解

,能水解

(2)DNA在

變性,大多數(shù)蛋白質(zhì)在

就可以變性。

(3)洗滌劑不能分解

,但可以瓦解

。DNA蛋白質(zhì)80℃以上60℃~80℃DNA細胞膜DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁![跟隨名師·解疑難]溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液濃度從2mol/L降低的過程中,蛋白質(zhì)溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽

析沉淀溶解DNA的溶解度DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁![自讀教材·夯基礎(chǔ)]DNA含量相對較高DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!NaCl溶液嫩肉粉60℃~75℃木瓜蛋白DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!

[跟隨名師·解疑難]1.實驗材料的選取

(1)雞血適宜作為實驗材料的兩個原因:一是因為雞血細胞核中的DNA含量豐富,材料易得;二是因為雞血細胞易吸水漲破。

(2)材料的處理(以雞血為例):DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!(3)用玻璃棒攪拌時,動作要緩慢且沿同一方向進行,目的是防止DNA被破壞。

(4)實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管,可減少提取過程中DNA的損失。

3.結(jié)果分析及評價

(1)現(xiàn)象是否明顯及可能原因:若實驗結(jié)果不明顯,可能的原因是:①材料中核物質(zhì)沒有充分釋放出來,如研磨不充分或蒸餾水的量不夠。②加入酒精后搖動或攪拌時過猛,DNA被破壞。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁![特別提醒]①若選取肝臟細胞或植物細胞,則必須充分研磨。②檸檬酸鈉的作用是作為抗凝劑,防止血液凝固。③吸去上清液的原因是DNA主要存在于細胞核中。DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁![例1]關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”的實驗,該實驗依據(jù)的實驗原理不是 (

)A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,隨著NaCl溶液濃度的不同而不同

B.利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNAC.DNA是大分子有機物,不溶于水而溶于某些有機溶劑

D.在沸水中DNA遇二苯胺會出現(xiàn)藍色反應DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!第二步:先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液,再加入20mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步:取6支試管,分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。

DNA檢測:在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表:DNA的粗提取與鑒定共31頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!

(3)根據(jù)實驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1:與20℃相比,相同實驗材料在-20℃條件下保存,DNA的提取量較多。結(jié)論2:_________________________________________。②針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專?/p>

(4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼

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