微生物數量的測定方法微生物數量的測定方法微生物數量的測定方法V:1.0精細整理，僅供參考微生物數量的測定方法日期：20xx年X月微生物數量的測定1.計數器測定法：即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數器的計數室內，用顯微鏡觀察計數。由于計數室的容積是一定的(O.1mm3)，因而根據計數器刻度內的細菌數，可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行，可立即得出結果。本法不僅適于細菌計數，也適用于酵母菌及霉菌孢子計數。2、電子計數器計數法:電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞，當一個細胞通過這個小孔時，電阻明顯增加，形成一個脈沖，自動記錄在電子記錄裝置上。該法測定結果較準確，但它只識別顆粒大小，而不能區分是否為細菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。3、活細胞計數法常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。4、比濁法比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計測定菌液，用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數目，對顏色太深的樣品，不能用此法測定。5、測定細胞重量法此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養物經離心后將濕菌體進行稱重；干重法系單位體積培養物經離心后，以清水洗凈放人干燥器加熱烘干，使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。6、測定細胞總氮量或總碳量氮、碳是細胞的主要成分，含量較穩定，測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適于細胞濃度較高的樣品。7、顏色改變單位法（colourchangeunit,簡稱CCU）通常用于很小，用一般的比濁法無法計數的微生物，比如支原體等，因為支原體的液體培養物是完全透明的，呈現為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數，由于支原體固體培養很困難，用cfu法也不容易計數，因此需要用特殊的計數方法，即CCU法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標，來計數微生物的相對含量的，下面以解脲脲原體為例單介紹其操作：，簡（1）取12只無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。（2）在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液，充分混勻，從中吸取0.2ml加入第二管，依次類推，10倍梯度稀釋，一直到最末一管（3）于37度培養，以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的CCU，也就是支原體的最大代謝活力，比如第六管出現顏色改變，他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml.取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數器的計數室內，用顯微鏡觀察計數或做片在顯微鏡下數，均稱為顯微鏡直接計