1、海醫腸桿菌科海醫腸桿菌科 一、種類腸桿菌科細菌目前已有44個屬170多個種。臨床上常見的有 概述 埃希菌屬（Escherichia）沙門菌屬（Salmonella）志賀菌屬（Shigella）耶爾森菌屬（Yersinia）枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）克雷伯菌屬（Klebsiella） 腸桿菌屬、多源菌屬、哈夫尼亞屬 沙雷菌屬（Serratia） 變形桿菌屬、普羅菲登菌屬、摩根菌屬 腸桿菌科中的其他菌屬海醫腸桿菌科2 概述 埃希菌屬（Escherichia）海醫腸桿菌科2 第一節 埃希菌屬 （Escherichia） ( E.coli)(E.fergusonii)(E.hermanni

2、i)(E.vulneris)(E.blattae)不脫胺/凝聚埃希菌。( E.abecarboxylata/agglomerans) 代表菌：大腸埃希菌（Escherichia coli） 海醫腸桿菌科3 第一節 埃希菌屬 （E學習大腸埃希菌有何意義?1.大腸埃希菌為腸道正常菌群成員。2.又為條件致病菌,引起腸道外感染。3.一些血清型具有致病性。4.環境衛生學和食品衛生學常用作糞便污染的指標。5.用于基因工程研究。海醫腸桿菌科4學習大腸埃希菌有何意義?1.大腸埃希菌為腸道正常菌群成員。海 一、生物學性狀 （一）形態與染色1.G-兩端鈍圓的中等 大小的短桿菌。2.周鞭毛，無芽胞，電鏡 觀察有周身

3、菌毛 。 菌毛：普通菌毛、性菌毛 3. 某些菌株有包膜（K）。4.培養初期或分泌物中可形成球形。海醫腸桿菌科5 一、生物學性狀 （一）形態與染色海醫腸桿1.對營養要求不高，自身合成能力很強 。2.兼性厭O2 1545均可發育，最適溫度37，最適pH7.47.6。3.在普通瓊脂上可形成光滑、濕潤、灰白色半透明、凸起、邊緣整齊中等大小（23mm）的菌落。4.在血平板上生長更佳，某些菌株（溶血性菌株）可產生溶血。 （二）培養特點海醫腸桿菌科6（二）培養特點海醫腸桿菌科6（1）SSA指示劑為中性紅，分解乳糖產酸的細菌（大腸埃希菌）呈紅色菌落（2）中國藍 大腸埃希菌分解乳糖產酸形成大而渾濁的藍色菌落，其

4、他不分解乳糖的腸道菌為透明淡紅色菌落。 5.在腸道選擇性培養基上，因能分解乳糖產酸，使指示劑變色形成有色菌落。海醫腸桿菌科7 大腸埃希菌分解乳糖產酸形成大而渾濁的藍色菌落，5.在海醫腸桿菌科8海醫腸桿菌科8（三）生化反應 1.可分解多種糖（醇）類 葡、乳、麥、甘對蔗糖、衛矛醇、棉子糖、鼠李糖則因菌株而異。2.IMVC為+ + - -。3.尿素酶、苯丙氨酸、丙二酸鹽 -。 4.克氏雙糖鐵/ 海醫腸桿菌科9（三）生化反應 1.可分解多種糖（醇）類 葡、乳、麥、甘 I M V C I M V C + + - - - - + +海醫腸桿菌科10 I M V C (四)Ag構造復雜主要有O、H、K三種A

5、g1.O-Ag 本質是細菌細胞壁的成分，其化學組成是脂多糖組成其分子由3部分組成： 海醫腸桿菌科11 (四)Ag構 2.H-Ag本質其化學組成為鞭毛蛋白性質不耐熱其特異性取決于多肽鏈排列順序和空間構型 海醫腸桿菌科12 2.H-Ag海醫腸桿 3.K-Ag本質化學成分是多糖性質 細菌的種類不同，其名稱也不同 E.coliK-Ag S.typhi-不耐熱的作用與相應故可阻斷周圍因其包繞.bAbAgO，AgO.a 區別點 L A B破壞其本身的可凝集性 1001h 1202.5h 100 1h破壞其抑制O血清的凝集 1001h 1202.5h 100 1h與抗體結合力的破壞 1001h 1212.5

6、h不破壞 100 2.5h不破壞抗原性破壞 1001h 1202h 100 1h本質 菌毛抗原 莢膜 莢膜抗原表示法：上述3種抗原均用阿拉伯數字表示 其型別按O:K:H 例如：O111:K58:H2 簡寫： O111:58:2 O86:B7:H3簡寫： O86:7:3表示法：上述3種抗原均用阿拉伯數字表示 其型別按O:K:H 例如：O111:K58:H2 簡寫： O111:58:2 O86:B7:H3簡寫： O86:7:3Vi Ag海醫腸桿菌科13 3.（五）抵抗力不強1.10g/L石炭酸1530min被殺死;2.加熱6010min即死;3.對酸敏感海醫腸桿菌科14（五）抵抗力不強1.10g/

7、L石炭酸1530min被殺死; 二、致病性 (一)致病物質1.黏附素 使細菌緊密黏附于腸道泌尿道細胞上,避免尿液的沖刷和腸蠕動排除。 特點:具有高度的特異性 定植抗原、 ( CFA/、CFA/、CFA/) 集聚黏附菌毛和 ( AAF/、AAF/) 束形成菌毛(bundle forming pili,Bfp) 種類 緊密黏附素(intimin) P菌毛 侵襲質粒抗原(invasion plasmid antigen,Ipa)蛋白 Dr菌毛海醫腸桿菌科15 二、致病性 (一)致病物質 (1)志賀毒素和(Shiga toxins,Stx-,Stx-)（2）耐熱腸毒素a和b（heat stable e

8、nterotoxin,STa,STb） (3)不耐熱腸毒素和 （heat labile enterotoxin,LT-,LT-） (4)溶血素A2.外毒素 海醫腸桿菌科16 (1)志賀毒素和(Shiga toxins,Stx- (1)志賀毒素和 (Shiga toxins,Stx-,Stx-)產生菌株及作用 腸出血性大腸埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)可表達志賀毒素,引起上皮細胞微絨毛的破壞。性質 Stx-與志賀菌產生的志賀毒素基本相同。Stx-則有60%的同源。兩型毒素均由溶原性噬菌體介導。海醫腸桿菌科17 海醫腸桿菌科17結構及作用A亞單位可裂解60S核

9、糖體亞單位的28SrRNA阻止與氨酰tRNA的結合,終止蛋白質合成。Stx由1個A亞單位和5個B亞單位成。B亞單位與宿主細胞特異性糖脂受體結合(腸絨毛和腎上皮細胞均有高濃度的糖脂受體)海醫腸桿菌科18結構及作用A亞單位可裂解60S核糖體亞單位的28SrRNA作用機制A.絨毛結構的破壞引起吸收減低和液體分泌的相對增加。B.溶血性貧血的尿毒綜合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)在產生志賀毒素( Stx-)的 EHEC中較多 ,因Stx-能選擇性破壞腎小球內皮細胞,引起腎小球濾過減少和急性腎功能衰竭。C.志賀毒素( Stx)還能刺激炎癥細胞因子(腫瘤壞死因子-,白細胞介

10、素-6)的表達。D.還可加強糖脂受體的表達。海醫腸桿菌科19作用機制A.絨毛結構的破壞引起吸收減低和液體分泌的相對增加產生菌株及作用腸產毒素性大腸埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)產生耐熱腸毒素由質粒編碼。STb與人類疾病無關 。STa 的性質 : A.低分子量多肽; B熱穩定(10020min不失活) C.免疫原性差。STa的作用機制:與LT-不同。是通過激活腸黏膜細胞的鳥苷環化酶使cGMP水平引起腹瀉，細菌產生腸毒素的能力與 兩種Plasmid有關。應當指出的是:STa陽性菌株同時產生LT,具有更強的致病性。（2）耐熱腸毒素a和b（heat stable en

11、terotoxin,STa,STb）海醫腸桿菌科20產生菌株及作用（2）耐熱腸毒素a和b海醫腸桿菌科20 (3)不耐熱腸毒素和 （heat labile enterotoxin,LT-,LT-）產生菌株及作用腸產毒素性大腸埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)產生耐熱腸毒素由質粒編碼。 LT-與人類疾病無關LT- 是引起人類胃腸炎的致病物質,在結構和功能上與霍亂弧菌產 生的腸毒素密切相關。 特點:不耐熱 結構:A亞單位(毒素的活性部位)B亞單位與腸黏膜上皮細胞表面的GM1神經節苷脂結合后,使A亞單位穿過細胞膜與腺苷環化酶作用海醫腸桿菌科21 (3)不耐熱腸毒素和A亞單

12、位(毒素的 LT- 小腸上皮C的腺苷環化E 刺激前列腺素 的釋放和炎癥因子 的產生ATPcAMP 促進腸粘膜分泌功能 進一步導致水 分的喪失 引起腹瀉致病作用海醫腸桿菌科22致病作用海醫腸桿菌科22 (4)溶血素A在尿路致病性大腸埃希菌所致疾病中有重要作用。海醫腸桿菌科23 海醫腸桿菌科233.侵襲力（1）K-Ag抗吞噬有抵抗抗體和補體（2）菌毛幫助細菌粘附于粘膜表面。 4.內毒素 5. 型分泌系統是一種向真核靶細胞內輸送毒性基因產物的細菌效應系統。海醫腸桿菌科243.侵襲力海醫腸桿菌科24 （二）所致疾病(一)1.腸外感染（1）尿路感染常見的有O1、O2、O6、O7、O11、O25、O75，

13、這些大腸埃希菌具有K-Ag （抗吞噬）和菌毛（粘附泌尿道抗沖洗）。（2）敗血癥如燒傷引起G-敗血癥（3）膽囊炎、肺炎以及新生兒或嬰幼兒腦膜炎。 海醫腸桿菌科25 （二）所致疾病(一)1.腸外感染海（二）所致疾病(二)2.胃腸炎（1）產毒素大腸埃希菌(ETEC)引起嬰幼兒及旅游者腹瀉。（2）致病性大腸埃希菌(EPEC)主要引起嬰兒腹瀉。（3）侵襲性大腸埃希菌(EIEC)引起較大兒童和成年人腹瀉，有時可形成暴發性流行。 （4）腸出血性大腸埃希菌(EHEC)：由O157:H7引起的腹瀉，有27發展成溶血性尿毒綜合征，出現溶血性貧血，血小板減少性紫癜和急性腎衰竭。（5）腸凝聚性大腸埃希菌(EAEC)：

14、成人慢性腹瀉，兒童急性腹瀉。海醫腸桿菌科26（二）所致疾病(二)2.胃腸炎海醫腸桿菌科26 三、微生物學檢查法 （一）腸外感染的細菌學檢驗主要指普通大腸埃希菌1.標本的采集 視疾病種類不同而異呼吸系痰燒傷及化膿感染膿汁及分泌物尿路感染尿液菌血癥（敗血癥）血液N癥狀腦脊液膽囊炎膽汁衛生細菌學水等海醫腸桿菌科27 三、微生物學檢查法 （一）腸外感染的細菌學檢驗海2.檢驗方法(1)涂片染色檢查法除血液標本外,均作。(2)分離培養血平板、SSA、MAC海醫腸桿菌科282.檢驗方法海醫腸桿菌科28(3)鑒定（1）初步鑒定 形態染色特點菌落特征（EMB、中國藍、麥康凱)KIA A.A+-生化反應初步鑒定為

15、大腸埃希菌 硝酸鹽還原+氧化觸E+-E、IMVC+-MIU+-海醫腸桿菌科29(3)鑒定（1）初步鑒定 硝酸鹽還原+氧化（2）最后鑒定觸E+氧化E-葡或/+ 乳/遲緩+ 肌醇- IMVC + + - -脲酶- H2S-苯丙脫氨E-硝酸鹽還原+動力多+ 海醫腸桿菌科30（2）最后鑒定海醫腸桿菌科30（二）腸道內感染的細菌學檢驗 )EaggEC()EHEC()EIEC()EPEC()ETEC(5腸凝聚型大腸埃希菌腸出血性大腸埃希菌腸侵襲性大腸埃希菌腸致病性大腸埃希菌產腸毒素型大腸埃希菌組包括海醫腸桿菌科31（二）腸道內感染的細菌學檢驗 )EaggE 檢驗方法標本 接種選擇培養基 挑選可疑菌落鑒定大

16、腸埃希菌ELISA核酸雜交PCR其它其他分子生物學技術檢測不同類型胃腸炎Ecoli的腸毒素毒力因子和血清型等特征海醫腸桿菌科32 檢驗方法標本 接種選擇培養基 衛生細菌學檢查Ecoli隨糞便排除污染環境、水源、飲料、食品等檢測樣品中Ecoli間接表明腸道致病菌污染大腸菌群指數每1000ml(g)樣品中的大腸菌群數。大腸菌群系指在3724h內發酵乳糖產酸產氣需氧和兼性厭氧的腸道桿菌。包括埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬及腸桿菌屬。我國衛生標準規定:飲水 3個/L 汽水果汁5個/L海醫腸桿菌科33衛生細菌學檢查Ecoli隨糞便排除污染環境、水源、飲料、食品防治原則1.疫苗的免疫預防正在研究中。2

17、.抗生素治療要在藥敏試驗指導下進行。3.尿道插管和膀胱鏡檢查應無菌操作。4.腹瀉病人應進行隔離治療,及時校正水和電解質平衡。5.采取措施減少醫院感染。6.保持高衛生標準,減少接觸引起胃腸炎的大腸埃希菌菌株的危險。7.污染的水和食品是腸產毒素性大腸埃希菌(ETEC)的重要傳播媒介;腸出血性大腸埃希菌(EHEC)常由污染的肉類和未消毒的牛奶引起。要充分烹飪。海醫腸桿菌科34防治原則1.疫苗的免疫預防正在研究中。海醫腸桿菌科34 第二節 志賀菌屬（Shigella）志賀菌屬痢疾志賀菌（S.dysentriae）福氏志賀菌(S.flexneri)鮑氏志賀菌(S.boydii)宋內志賀菌(S.sonne

18、i)海醫腸桿菌科35 第二節 志賀菌屬（Shigella）志賀菌屬一、生物學性狀 （一）形態與染色 從形態學上看，志賀菌屬與一般腸桿菌科細菌無明顯的區別。 突出點是無鞭毛不能運動。1.G-短小桿菌2.無特殊構造3.有菌毛海醫腸桿菌科36一、生物學性狀 從形態學上看，志賀菌屬與一般腸桿菌科細菌無明 （二）培養特點 1.營養要求不高，可在普通培養基上生長。2.普通瓊脂平板 光滑、濕潤、圓形凸起，無色半透明，邊緣整齊，中等大小的菌落。 3.在腸道選擇性培養基上，為不發酵乳糖菌落值得提出的是，宋內志賀菌培養48h后可轉為乳糖發酵菌落。也常出現扁平粗糙型菌落 海醫腸桿菌科37 （二）培養特點 1.營養要

19、求不高，可在普通培養基 SSA海醫腸桿菌科38 SSA海醫腸桿菌科38（三）生化反應 較為復雜葡萄糖、MR 陽性 尿乳蔗枸賴脫，V-P、H2S均陰性 SSA 無色半透明菌落 克氏雙糖鐵 斜面粉紅, 底層黃+海醫腸桿菌科39（三）生化反應 較為復雜葡萄糖、MR 陽性 海醫腸桿菌科 I M V C海醫腸桿菌科40 I M V （四）Ag構造及分類 1.Ag構造 特點無H-Ag（1）O-Ag是分類的依據型特異性Ag 群特異性Ag 海醫腸桿菌科41（四）Ag構造及分類 1.Ag構造 特點無H（2）K-Ag 海醫腸桿菌科42（2）K-Ag 海醫腸桿菌科422.分類根據O-Ag不同將shigella分為4

20、個群 (P122，表7-12) -海醫腸桿菌科432.分類 -海醫腸桿菌科43我國福氏最多，宋內次之。南方鮑氏也不少。 A群:即痢疾志賀菌 有12個血清型均不發酵甘露醇無鳥氨酸脫羧酶與其他各群無血清學關系我國常見的為2型，又叫舒密志賀菌（西藏），I（靛基質）+，其他型- B群又叫福氏菌群有6個血清型,2個變種(X、Y)其特點：分解甘露醇無鳥氨酸脫羧酶-Ag構造較復雜，各型間有交叉Ag海醫腸桿菌科44我國福氏最多，宋內次之。南方鮑氏也不少。 海醫腸桿菌科44 C群又叫鮑氏菌群，有18個血清型其特點：分解甘露醇鳥氨酸脫羧酶-各型間無交叉Ag D群又叫宋內菌群，只有一個血清型其特點：分解甘露醇鳥氨酸

21、脫羧酶+遲緩分解乳糖本群菌有光滑型（S）和粗糙型（R）兩種海醫腸桿菌科45 C群又叫鮑氏菌群，有18個血清型海醫腸桿菌科45較其他腸桿菌科細菌弱 。（五）抵抗力1.不耐熱6010min即可殺死2.對一般消毒劑敏感3.耐48種藥物海醫腸桿菌科46（五）抵抗力1.不耐熱6010min即可殺死海醫腸桿菌科4 二、致病性與免疫性 （一）致病物質 1.侵襲力 2.內毒素 3.外毒素 海醫腸桿菌科47 二、致病性與免疫性 （一）致病物質海醫腸桿菌科4派伊爾淋巴結的M細胞通過型分泌系統向上皮細胞和巨噬細胞分泌4種蛋白志賀菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaCIpaD誘導細胞膜凹陷 導致細菌內吞志賀菌溶解吞噬

22、小泡 進入細胞質內繁殖宿主細胞內肌動纖維的重排,推動細菌進入毗鄰細胞細胞到細胞傳播細菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護通過誘導細胞程序性死亡從吞噬中得到了存活引起白細胞介素-1的釋放 吸引多形核白細胞到感染組織腸壁完整性破壞細菌到達較深層的上皮細胞,加速了細菌的擴散1.侵襲力 作用海醫腸桿菌科48派伊爾淋巴通過型分泌系統向上皮細志賀菌IpaA Ip2.內毒素內毒素腸黏膜通透性內毒素的吸收促進發 熱神志障礙中毒性休克作用內毒素腸黏膜破壞炎癥潰瘍形成典型的膿血黏液便內毒素腸壁自主神經系統作用于腸功能紊亂腸蠕動失調和痙攣膚痛里急后重海醫腸桿菌科492.內毒素內毒素腸黏膜通透性內毒素促進發 熱作用

23、內3.外毒素其功 能同腸出血性大腸埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC),引起上皮細胞微絨毛的破壞。產生菌株及功能A群志賀菌(痢疾志賀菌) 型和型可產生志賀外毒素。海醫腸桿菌科503.外毒素其功 能同腸出血性大腸埃希菌(enterohemo結構及作用A亞單位可裂解60S核糖體亞單位的28SrRNA阻止與氨酰tRNA的結合,終止蛋白質合成。Stx由1個A亞單位和5個B亞單位成。B亞單位與宿主細胞特異性糖脂受體結合(腸絨毛和腎上皮細胞均有高濃度的糖脂受體)毒素作用:損傷上皮細胞。個別病人志賀毒素可介導腎小球內皮細胞的損傷,導致溶血性尿毒綜合征(HUS)海醫腸桿菌科51

24、結構及作用A亞單位可裂解60S核糖體亞單位的28SrRNA急性、亞急性、慢性菌痢，急性最常見，中毒性痢疾。 （二）所致疾病海醫腸桿菌科52急性、亞急性、慢性菌痢，急性最常見，中毒性痢疾。 （二）所(三)免疫性 病后,在血液中可產生循環抗體,此抗體無保護作用。 其抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的分泌型IgA(SIgA) 。 病后免疫期短,不鞏固。其原因:1.感染只停留在腸壁局部。2.型別多。海醫腸桿菌科53(三)免疫性 病后,在血液中可產生循環抗體,此抗 三、微生物學檢查法 （一）標本的采集1.用無菌棉拭取病人新排出的糞便的粘液或膿血便。2.無便者，用無菌棉拭從肛門或直腸直接取。3.對昏迷病人、

25、不排便者灌腸。4.慢性患者用直腸鏡。 海醫腸桿菌科54 三、微生物學檢查法 （一）標本的采集海醫腸桿菌科注意事項：1.用藥前采集標本2.要快（要立即送檢）最好1h內或床邊接種3.取材不要糞尿相混（本菌怕酸）4.如不能立即送檢者，立即用3%甘油鹽水保存液，遠道可放在冰壺中 海醫腸桿菌科55注意事項：海醫腸桿菌科55（二）檢驗程序 海醫腸桿菌科56（二）檢驗程序 海醫腸桿菌科56（三）檢驗方法 1.分離培養SSA及MacConkey無色透明中等大菌落2.初步鑒定 （1）試探性玻片凝集 先用志賀菌屬多價診斷血清再用單價血清（2）初步生化反應 KIA、MIU KIA MIU 抗血清斜面底層氣體H2S

26、動力吲哚脲酶 多價 單價- +-/+ - - +/- - + +海醫腸桿菌科57（三）檢驗方法 1.分離培養KIA 3.最后鑒定 （1）生化反應,除KIA、MIU外，甘露醇（+/-）、蔗糖（-/+）、C（-）、苯丙氨酸脫氨酶（-）、ONPG（-半乳糖苷酶）（-）、鳥氨酸脫羧酶（-）（宋內+）(2)血清學鑒定：生化特點符合,且多價、單價血清均呈陽性者，應轉入分型鑒定。海醫腸桿菌科58 3.最后鑒定 （1）生化反應,除KI測定志賀菌的侵襲力可用Sereny試驗豚鼠眼結膜試驗另一只眼用大腸埃希菌作對照 4.毒力試驗受試1824h培養物接種結囊內發生結膜炎Sereny試驗陽性表明受試菌有侵襲力志賀毒素

27、的測定HeLa細胞Vero細胞PCR直接檢測其毒素基因stxA和stxB海醫腸桿菌科59測定志賀菌的侵襲力可用Sereny試驗另一只眼用大腸埃希菌作（1）免疫熒光菌球法特異性較強（2）免疫染色法 (3)協同凝集試驗 (4) 膠乳凝集試驗 (5)分子生物學方法5.快速檢驗法海醫腸桿菌科60（1）免疫熒光菌球法特異性較強5.快速檢驗法海醫腸桿菌科 第三節 沙門菌屬（Salmonella）動物致病的沙門菌從對人引起疾病的角度 本屬的代表菌傷寒沙門菌（S.typhi）。 引起腸熱癥副傷寒沙門菌傷寒沙門菌人的致病菌Bparatyphi.S(A)typhi.S(毒污染乳肉蛋引起食物中腸炎沙門菌豬霍亂沙門菌

28、鼠傷寒沙門菌人畜共患-)senteritidi.S()suischolera.S()mtyphimuriu.S(c海醫腸桿菌科61 第三節 沙門菌屬（Salmonella）動物致病的沙門 一、生物學性狀 （一）形態與染色 基本同E.coli1.G-細長的中桿菌2.無芽胞、無莢膜，除雛白痢沙門菌和雞沙門菌外均具有周身鞭毛3.多數菌株有菌毛 海醫腸桿菌科62 一、生物學性狀 （一）形態與染色 （二）培養特點 3.生長現象（1）普通瓊脂平板 圓形，無色半透明，光滑濕潤，邊緣整，粗糙型表面干燥邊緣不整（呈鋸齒狀）。 (2)產生H2S的細菌在SSA上形成帶黑心的菌落。海醫腸桿菌科63 （二）培養特點 3

29、.生長現象(2)產生H2S的細菌海醫腸桿菌科64海醫腸桿菌科64海醫腸桿菌科65海醫腸桿菌科65 （三）生化反應 1.沙門菌與大腸埃希菌的區別 乳 蔗 I E.coli + Salmonella - - - 尿素 Proteus + Salmonella - 葡 麥 甘 鼠 鳥 C（檸） 其他沙門菌 /- + +/- 傷寒沙門菌 + + + - - -/+ 3.傷寒沙門菌與其他沙門菌的主要區別 2.沙門菌與變形桿菌的區別 4.根據生化反應，沙門菌屬分為6個亞屬海醫腸桿菌科66 （三）生化反應 1.沙門菌與大腸埃希菌的區別 海醫腸桿菌科67海醫腸桿菌科67 I M V C海醫腸桿菌科68 I M

30、 V （四）Ag構造及分類 1.菌體（O）Ag （1）組成 就是細胞壁的脂多糖 （2）性質較穩定（3）成分 根據O-Ag的組成成分不同，共有58種，用阿拉伯字母1、2、3表示，目前已排至67，其中有9個數碼被刪去，故數字不是連續的。并且將具有相同成分的沙門菌都歸為一群（即每群都有它共同的Ag），這樣使2000種沙門菌歸為A、B、C、D、E、F、I一直至Z，在以O51O67群表示 ( 4）O-Ag機體產生IgM型Ab O-Ag與O-Ab呈顆粒狀凝集石炭酸破壞不被酒精可達耐熱、h5.2，100海醫腸桿菌科69 （四）Ag構造及分類 1.菌體（O）Ag 石炭酸2.鞭毛（H）Ag（1）組成Pr（2）性

31、質不穩定 （3）具有鞭毛的細菌經甲醛固定后即制成H-Ag，由于H-Ag將O-Ag遮蓋，故O-Ag不能再與O-Ab發生凝集（4）H-Ag機體產生IgG型Ab H-Ag與H-Ab呈絮狀凝集 海醫腸桿菌科702.鞭毛（H）Ag海醫腸桿菌科70（5）H-Ag分兩相 同時具有兩相的H-Ag叫雙相菌 僅有一相的H-Ag，叫單相菌 3.表面Ag 目前已證實，本屬細菌中的個別血清型具有Vi-Ag、M-Ag和5Ag三種表面Ag。 -)7(4,3,1 2,，70)117P,117(zz,z,z，z)(zd,c,b,a，65321種以上目前有表示伯字母幾種沙門菌共有。用阿拉第二相又叫非特異相多種目前有表見表示以后則

32、用小寫直至表示用小寫特異性高第一相又叫特異相,海醫腸桿菌科71（5）H-Ag分兩相 同時具有兩相的H-Ag叫雙相菌3.表面（五）抵抗力 本屬細菌在自然界中生活能力較強，僅次于大腸埃希菌，在土壤、水中可活幾周幾個月，在糞便中可活較長時間。1.耐冷不耐熱 2.易被一般消毒劑殺死 3.膽鹽、煌綠及其他染料對沙門菌的抑制作用較其他腸道菌為小。 海醫腸桿菌科72（五）抵抗力 本屬細菌在自然界中生活能力較強，僅次于大腸埃希 二、致病性和免疫性 1.侵襲力 有Vi-Ag的傷寒沙門菌比無Vi-Ag者要強得多。2.內毒素3.有些菌型尚能產生腸毒素（如鼠傷寒沙門菌），其性質類似產毒素大腸埃希菌。 （一）致病物質海

33、醫腸桿菌科73 二、致病性和免疫性 1.侵襲力 有Vi派伊爾淋巴結的M細胞通過兩個型分泌系統沙門菌黏附并侵入誘導細胞膜凹陷 導致細菌內吞沙門菌溶解吞噬小泡 進入細胞質內繁殖細胞到細胞傳播導致宿主細胞死亡1.侵襲力 繁殖輸送外源性Ag到其下方的巨噬細胞沙門菌致病島(SPI)沙門菌致病島(SPI)沙門菌侵襲蛋白向M細胞宿主細胞內肌動纖維的重排細菌擴散并進入毗鄰細胞淋巴組織具有耐酸應答基因使細菌在胃和吞噬體的酸性環境得到保護氧化酶、超氧化物歧化酶保護細菌不被胞內殺菌因素殺傷傷寒沙門菌希氏沙門菌Vi抗原抗吞噬,阻擋抗體、補體海醫腸桿菌科74派伊爾淋巴通過兩個型分泌系統沙門菌黏附并侵入誘導細胞膜凹陷2.

34、內毒素沙門菌死亡后釋放內毒素引起宿主KT ,WBC大劑量導致中毒癥狀和休克激活補體替代途徑產生C3a、C5a等誘發免疫細胞、分泌TNF-、IL-1、IFN-等細胞因子海醫腸桿菌科752.內毒素沙門菌死亡后釋放內毒素引起宿主KT ,WBC大（二）所致疾病1.傷寒、副傷寒沙門菌腸熱癥2.食物中毒（急性胃腸炎）3.敗血癥 炎癥出血性壞死4.無癥狀帶菌者海醫腸桿菌科76（二）所致疾病1.傷寒、副傷寒沙門菌腸熱癥炎癥出血性壞死 三、微生物學檢查法 （一）細菌學檢查 1.標本的采集 （1）腸熱癥：1血2便3檢尿，要檢骨髓全知道 （2）食物中毒 ：嘔吐物、可疑食物、糞便（3）其他標本 ：膽汁、腦脊液、胸腹水

35、，應離心后沉淀，供培養用；中耳分泌物、滲出液、膿液、咽喉、陰道等可用拭子采集。注意事項：病的晚期或用藥，陽性率 病的初期陽性率不高海醫腸桿菌科77 三、微生物學檢查法 （一）細菌學檢查 海醫腸桿菌采集時機用藥前新鮮標本，立即送檢（如不能立即送檢應保存在冰箱、冰壺內，但不得超過2h）血液標本應在出現癥狀后盡早靜脈采血5ml。 海醫腸桿菌科78采集時機海醫腸桿菌科782.檢驗方法 （1）分離培養與增菌培養增菌培養孔雀綠氯化鎂四硫磺酸鹽一般沙門菌亞硒酸鹽甲副傷寒增菌液不同沙門菌應選擇不同、：、溫度的選擇傷寒37其他沙門菌4043 為好 -麥康凱中國藍產選擇亞硫酸鉍瓊脂瓊脂強選擇種各選培養基一次一次次

36、進行分離培養、EMB、HE.SSA)1(h48h24162海醫腸桿菌科792.檢驗方法 （1）分離培養與增菌培養孔雀綠氯化鎂四硫（2）初步鑒定-主要依據是生化和血清學兩個方面菌落特點：從選擇性培養基上挑選菌落是一個重要環節，稍一疏忽則易遺漏a.菌落以無色、光滑、較透明、扁平為主要特征，大小則往往不一。b.EMB-靠近大腸埃希菌者可呈深藍色c.SSA-產生H2S者帶黑心d.對可疑菌落用筆圈出（便于復查）生化鑒定 凡可疑之每型菌落均要挑取12個，分別接種于KIA和MIU。 海醫腸桿菌科80（2）初步鑒定-主要依據是生化和血清學兩個方面海醫腸桿菌科8本屬內細菌鑒定 海醫腸桿菌科81本屬內細菌鑒定 海

37、醫腸桿菌科81先用AF群多價O診斷血清做玻片凝集試驗 鹽水+無效（S R有關） 鹽水-多價O血清+沙門菌 鹽水-多價O血清- 生化反應不典型陰性 生化反應典型Vi-AgcH若H2S+葡尿素-初步考慮 （3）最后鑒定 全面生化反應枸櫞酸菌屬沙門菌亞屬、海醫腸桿菌科82先用AF群多價O診斷血清做玻片凝集試驗cH若H2S+葡尿血清學鑒定a.先用AF群多價O血清做玻片凝集T-確定是否是在AF群內（因95%以上沙門菌均屬AF群）b.再分別用代表6個O群的單價因子血清做玻片凝集T進行分群 c.再用鞭毛Ag確定菌種 海醫腸桿菌科83血清學鑒定海醫腸桿菌科834.鑒定依據 （1）沙門菌的鑒定主要靠 （2）血清

38、型的確定 （3）檢查過程中必須配合形態與染色檢查，以排除腸球菌 和其他腸道內細菌（4）也可用噬菌體鑒定 生化反應綜合判定式相同的菌株則需借助對于型相結合綜合決定其血清相和第H因子血清第血清決定定群AgO海醫腸桿菌科844.鑒定依據 （3）檢查過程中必須配合形態與染色檢查，以排除（二）血清學檢查肥達（Widal）反應 1.原理 人患傷寒、副傷寒后，一般于12周后在血清中出現的特異性Ab（凝集素），3、4、5周后達高峰，以后緩慢下降。根據此道理，用已知傷寒沙門菌TO、TH和副傷寒PA、PB、PC的菌液做Ag，與病人血清做凝集反應來測定病人血清中有無相應特異性抗體的定量凝集試驗。根據抗體凝集價增長情

39、況，以做傷寒、副傷寒的輔助診斷。 2.方法實驗課做。 海醫腸桿菌科85（二）血清學檢查肥達（Widal）反應 1.原理 人患3.結果判斷必須結果臨床、病期及地區而定（1）效價的地區性（2）注意病程（3）有關TH與TO變化的評價 出現速度 交叉反應或非特異性回憶反應 （4）注意區別非特異性回憶反應 海醫腸桿菌科863.結果判斷必須結果臨床、病期及地區而定海醫腸桿菌科86 本菌在自然界中分布很廣，主要存在于飲水、污水中。在動物中存在于家畜、家禽、鼠、鴿、蛙、蝸牛和蝦蟹排泄物中。在食品（乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等）常檢出。豬是帶菌者。經蒼蠅、蚤、蟑螂、蜚蠊帶菌等媒介傳播，為人獸共患病原菌之一。 (

40、三)致病性海醫腸桿菌科87 本菌在自然界中分布很廣，主要存在于飲水、污水中。 第四節 其 他菌屬一、克雷伯菌屬（Klebsiella） 肺炎克雷伯菌菌屬(Kpneumonia) 產酸（催娩）克雷伯菌 (Koxytoca) 解尿氨酸克雷伯菌(Kornithinolytica)植生克雷伯菌(Kplanticola)土生克雷伯菌(Kterrigena)臭鼻克雷伯菌(Kozaenae)鼻硬結克雷伯菌(Krhinoscleromatis) 本屬菌包括7個種海醫腸桿菌科88 第四節 其 他菌屬一、克雷伯本屬細菌符合腸桿菌科一般特征。其屬的共同特征為：1.G短桿菌，無芽胞，無鞭毛有莢膜2.營養要求不高普通培

41、養基即可生長3.生化反應較活潑（1）可發酵多種糖類 葡 乳 麥 甘 蔗 其他糖醇（阿拉伯、木、棉子、海藻、阿糖醇） + + + + +（2）觸酶 氧化E 脂E H2S 明膠 硝酸鹽 尿素 V-P ONPG 肌醇 + + + + + +4.均為周圍環境及人呼吸道常居菌群，為條件致病菌 ，目前引起感染日益增多。其代表菌為肺炎克雷伯菌。 共同特征海醫腸桿菌科89本屬細菌符合腸桿菌科一般特征。其屬的共同特征為： (一)生物學性狀肺炎克雷伯菌1.形態與染色（1）G-卵圓或球桿菌，常成雙排列（2）菌體外繞以寬厚的莢膜（3）無芽胞、無鞭毛、無動力、有菌毛（4）培養物菌體長，常呈多形性，有時可見絲狀物海醫腸桿

42、菌科90(一)生物學性狀肺炎克雷伯菌海醫腸桿菌科90海醫腸桿菌科91海醫腸桿菌科912.培養特點（1）需O2或兼性厭O2（2）對營養要求不高，普通培養基即可生長（3）在普通瓊脂和血平板 灰白色、圓形、光亮較大凸起,粘液狀，菌落易互相融合，用接種環挑易拉成絲狀的較大菌落。（4）在腸道選擇培養基上呈乳糖發酵產酸的菌落，與大腸埃希菌相似但色澤較淡，較為飽滿而凸起。（5）液體培養基混濁生長、農厚，有菌膜，管底有粘液性沉淀。 35 24h 海醫腸桿菌科922.培養特點35 海醫腸桿菌科92海醫腸桿菌科93海醫腸桿菌科93（6）生化反應本菌IMVC+，其他，如丙二酸鹽+（7）Ag構造 O、K兩種Ag K-

43、Ag為分型依據（8）抵抗力不強 對一般消毒劑敏感對熱敏感56-60即死對一般抗生素均敏感，但易產生抗藥性海醫腸桿菌科94（6）生化反應海醫腸桿菌科94 (二)臨床意義 本屬細菌多感染重病老人及幼兒，死亡率很高。也是醫院感染的常見菌。 海醫腸桿菌科95 (二)臨床意義 本屬細菌多感染重病老人及幼兒，死二、變形桿菌屬（Protens）普通變形桿菌（P.vulgaris）變形桿菌屬 奇異變形桿菌（P.mirabili 產粘變形桿菌（P.myxofaciens） 潘納變形桿菌（P.penneri） （一）生物學性狀1.形態與染色（1）G-中小桿菌，菌端鈍圓（2）無芽胞、無莢膜、周身鞭毛，運動活潑。（3

44、）具有明顯的多形性，多呈球狀或絲狀，在活潑運動的培養物中多為較長而彎曲的桿菌。 海醫腸桿菌科96二、變形桿菌屬（Protens）普通變形桿菌（P.vulg海醫腸桿菌科97海醫腸桿菌科972.培養特點（1）需O2，或兼性厭O2。（2）營養要求不高，在普通或綜合培養基上均可發育，但大部分需要菸草酸（3）有遷徒狀生長現象（moving grow）。 （4）產粘變形桿菌能形成很粘的薄膜層，且能溶血。（5）在腸道選擇性培養基上可形成圓、扁、無色半透明的乳糖不發酵菌落。在SSA上-產H2S的菌株菌落帶黑心（6）液體培養基均勻混濁，液面有菌膜、管底有沉淀。海醫腸桿菌科982.培養特點海醫腸桿菌科98海醫腸桿

45、菌科99海醫腸桿菌科99海醫腸桿菌科培訓課件4.Ag構造與分型 Ag構造與分型 根據菌體（0）Ag分群根據鞭毛（H）分型每種變形桿菌都分許多血清型。產粘變形桿菌Ag結構尚未測定目前有100多個血清型海醫腸桿菌科1014.Ag構造與分型 Ag構造與分型 每種變形桿菌都分許多血這里值的提出的是：在普通變形桿菌與奇異變形桿菌二類中還有些特殊的菌株OX19、OX2、OXK與某些立克次體有共同抗原成分，故可代替立克次體作為抗原與某些立克次體病患者血清作凝集反應，以輔助診斷某些立克次體病，此稱為外-斐（Weill-felix）反應.海醫腸桿菌科102這里值的提出的是：海醫腸桿菌科102 （二）致病性變形桿

46、菌屬的細菌一般不致病，但在一定條件下有時也可致病，故稱為條件致病菌。1.原發性感染通過尿路上行感染造成膀胱炎和腎盂腎炎。2.繼發性感染例如手術時，變形桿菌跑到腸外，引起繼發感染（如腹膜炎）。外傷（如燒傷），在傷口外引起繼發感染，形成化膿病灶，當機體抵抗為有時可引起敗血癥。 3.食物中毒 海醫腸桿菌科103 （二）致病性變形桿菌屬的細菌一般不致病，但在三、摩根菌屬 摩根菌屬只有1個種摩氏摩根菌。近年又增加一個生物群。（一）形態與染色特征與變形桿菌屬相似，但本屬的某些菌株在30以上不形成鞭毛。（二）培養特點1.不形成遷徙生長 2.腸道選擇培養基上形成乳糖不發酵菌落3.生化反應不活潑 4.Ag構造及分型以O-Ag分為42個血清群以H-Ag分為75