1、免疫標記的應用與評價上海交通大學瑞金臨床醫學院免疫標記的應用與評價上海交通大學免疫標記的應用干細胞的確定定量分析.移植治療的日益普及.移植門檻的降低.干細胞采集的確定.有效干細胞的確定要求(、等)免疫標記的應用干細胞的確定的分析： 未動員前外周血中細胞，細胞，細胞。 各家單抗不同、操作不一，結果難以比較。 內毒素、單純化療（骨髓抑制）、細胞因子、化療聯合細胞因子 等的動員。的分析： 淋巴細胞和細胞確定和定量分析淋巴細胞分化增殖異常的信號淋巴細胞與髓系細胞的鑒別混合性白血病和未確定性(型)白血病的診斷造血干細胞病變的信號疾病的預后判斷 淋巴細胞和細胞確定和定量分析 細胞標記 細胞及其亞群 祖細胞

2、（）的表型為、未成熟細胞標志、和。在細胞發育過程中，是最早出現的細胞標志，且貫穿表達在整個細胞分化發育過程中。胸腺細胞要分化發育為有功能的成熟細胞，細胞表面標志需經歷一定的變化過程。 細胞標從、（即、雙陰性）、（即、雙陽性），最后發育成、和、單陽性的兩群成熟胸腺細胞，然后進入外周淋巴器官和血液，執行免疫功能。從、（即、雙陰性）、（即、雙但在正常外周血中通常存在、（），、（）， 和 四種表型不同的細胞，它們分別占細胞總數的，。前三種表型細胞的主要為，而 細胞主要表達，他們都執行細胞免疫功能。但在正常外周血中通常存在、（），、（）， 和 四種表 是綿羊紅細胞受體和淋巴細胞功能相關抗原（），表達于人

3、細胞、胸腺細胞和大顆粒淋巴細胞（）的表面。是細胞表面抗原，表達于成熟胸腺細胞、靜息和激活的的外周血細胞，是鑒定細胞的重要標志，其胞漿和膜是早期和普通型細胞白血病的主要分型標記。 是綿羊紅細胞受體和淋巴細胞功能相關抗原（），表達于人 、是細胞白血病較特異的標記，也是髓系白血病時最常見的伴隨標記。、則是白細胞的共同標記抗體，在淋巴瘤的診斷中有一定的價值。而和主要分布于活化淋巴細胞表面，為活化淋巴細胞標志。胸腺細胞、靜止細胞、靜止細胞以及細胞表面無表達。主要用于淋巴細胞疾病的免疫分型。外周血淋巴細胞、占 、是細胞白血病較特異的標記，也是髓系白血病時最常見 末端脫氧核苷酸轉移酶（）和類人類白細胞抗原（

4、）的陽性表達對早期細胞白血病的診斷有重要價值。、的基因重排檢測有利于惡性細胞疾病細胞異?？寺〈嬖诘拇_定。 另外，和以上的細胞表達和。用可定義細胞。 末端脫氧核苷酸轉移酶（）和類人類白細胞抗原（）細胞標記 細胞 細胞的分化主要分為祖細胞、前細胞、未成熟細胞、成熟細胞、活化細胞和漿細胞個階段。 （）祖細胞（）：此期最早識別的細胞特異性抗原是，同時表達、細胞核、。 （）前細胞（）：和消失，出現、，（胞漿重鏈）。細胞標記 細胞 細胞的分化主要分為祖細胞、前細胞、未 （）未成熟（早期）細胞（ ）：、消失，出現 、。、表達增加。其他新的抗原、相繼出現。 （）成熟細胞（ ）：和同時表達，并出現、和絲裂原受體

5、，上述細胞抗原繼續存在。 （）未成熟（早期）細胞（ ）：、消失，出現 、。、 （）活化細胞（ ）：成熟細胞被抗原或絲裂原刺激后，成為活化細胞，繼之增生和分化。在此過程伴隨表達細胞激活抗原、和其他激活相關抗原如、等。膜結合型逐漸減少，分泌型逐漸增加，并可發現基因重鏈類型轉換。 （）漿細胞（ ）：激活細胞進一步分化成為產生抗體的漿細胞，這時獲得、和漿細胞特異抗原，表達增加，抗原再出現。而和上述抗原消失。仍可存在于胞質中。 （）活化細胞（ ）：成熟細胞被抗原或絲裂原刺激后，成細胞上的抗原分為：細胞限制性（特異性）抗原： 、 、 和， 它們的表達只限于細胞上，在鑒別細胞系上是十分重要的標志。細胞相關性

6、抗原： 、和。而細胞表面的受體，是細胞特異性識別抗原的受體，也是細胞重要的特征標志。細胞上的抗原分為：細胞限制性（特異性）抗原： 、 、 、和都是細胞白血病和淋巴瘤最常用的標記抗體。對中國人而言，是特異性和敏感性最高的。是一種早期的、譜系特異的泛細胞表面抗原，從最早期細胞前體細胞階段即表達，持續存在直至細胞終末階段，分化為漿細胞時丟失。存在于外周血、脾臟、淋巴結或扁桃體中的細胞和近的骨髓細胞。在造血系統只表達于正常和惡性細胞。外周血細胞、單核細胞、粒細胞和血小板表面不表達。對細胞白血病細胞表達的敏感性接近，且有較高的特異性。和與和有相同的特異性，但敏感性不夠，的表達往往伴隨性的陽性而出現。 、

7、和都是細胞白血病和淋巴瘤最常用的標記抗 、都是早期細胞的標記，其中的表達可出現在的系統的原始細胞上。一般來說，這類白血病患者有超過一半，甚至三分之二以上，在免疫表型中出現淋巴細胞分化的明顯不協調，如，陽性與表達同時出現在白血病細胞上。而免疫球蛋白重鏈（）的基因重排更是細胞異?？寺⌒栽錾臉擞?。異常增生克隆性細胞也有呈現的基因重排。 、都是早期細胞的標記，其中的表達可出現在的系統的髓系細胞標記 這類抗體包括、和等。這些免疫標記種類繁雜，缺乏特異性和敏感性（與淋巴細胞標記抗體相比）。很多情形下，上述標記也出現在正常的髓細胞表達上。 髓系細胞標記 這類抗體包括、和.髓系標記 從髓系祖細胞終末分化的成

8、熟細胞（粒細胞、單核細胞、血小板和紅細胞）間各階段細胞特征性標志還不十分清楚。根據粒細胞和單核細胞上的髓系抗原表達試將其大致分為七種類型 :（）粒細胞和單核細胞上都有較強表達的抗原有：、。其中在原粒細胞質中表達比膜上早，在診斷上十分重要。（）以粒細胞為主，但也存在于單核細胞的抗原有：和。是特異性髓系抗原，強表達在成熟粒細胞，弱表達在單核細胞上。 （）基本表達在粒細胞上的抗原有：和。 .髓系標記 從髓系祖細胞終末分化的成熟細胞（粒細胞、單核（）以單核細胞為主，但也表達在粒細胞的抗原有：和。主要強表達在單核巨噬細胞，弱表達在粒細胞上。抗原分布只限于造血系統內，表達在髓系祖細胞、以及相應的白血病細胞

9、上。約原粒細胞表達抗原，而終末分化的粒細胞抗原弱表達。先于表達，故在診斷上加十分有用。 （）基本只表達在單核細胞上的抗原有：、和。是目前發現可靠的檢測造血系統內單核巨噬細胞系統的特異標志，用單抗可將與及區別開來。 （）以單核細胞為主，但也表達在粒細胞的抗原有：和。主要強表達（）造血干、祖細胞抗原有：和。和雖列在髓系抗原中，但都屬于造血干、祖細胞抗原 。除表達在早期造血干、祖細胞外，還表達在約的和的上，這些的白血病細胞可能來自具有多系性分化能力的分化不良的前身細胞。 （）其他髓系相關抗原：這些抗原主要存在于其他系細胞上，但在某些髓系細胞上也有表達，如：、等。 （）造血干、祖細胞抗原有：和。和雖列

10、在髓系抗原中，但都屬于造巨核細胞系 在巨核細胞系發育過程中依次出現、（）、（）和（）、（）。還可表達（強）。血小板具有豐富的胞內顆粒，正常情況下血小板處于靜止狀態。目前研制出的抗血小板單抗如、 、，主要都針對靜止的血小板。當血小板被激活時，血小板中顆粒內容物釋放，整合到活化的血小板質膜內，成為一些激活抗原，如 （選擇素）、及和。 紅細胞系 血小板 （強）、血型糖蛋白、。 巨核細胞系 在巨核細胞系發育過程中依次出現、（）、（.干祖細胞系 抗原選擇性地表達在不成熟的造血干細胞、祖細胞上，是一個階段特異而非系特異的抗原。多能造血干細胞（）和定向造血干細胞（，、）、祖細胞（）、祖細胞（）都在群內?？乖?/p>

11、在早期造血祖細胞內呈高水平表達，隨著細胞成熟其表達呈進化性下降，繼而消失。目前已作為能識別人類最早造血干、祖細胞的重要標志?，F知更早期的干細胞為。 .干祖細胞系 抗原選擇性地表達在不成熟的造血干細胞、祖、細胞在形態上缺乏分化特點，是更幼稚、能維持長期造血的啟動細胞（）。細胞以、為主，多處于和期。、細胞則大多處于造血祖細胞階段，可形成各系造血集落，但不能維持長期造血。故抗原是造血干細胞向多系定向分化的標志之一，并隨一定的分化過程表達上調。鑒于抗原可以識別出造血干、祖細胞，結合其它相關分化抗原的表達可以作為造血細胞不同發育階段的標志。如、細胞群為多能干細胞向髓系定向的標志。、多為多能干細胞向系定向

12、的祖細胞。而、則被認為是向系定向的祖細胞。 、細胞在形態上缺乏分化特點，是更幼稚、能維持長期造血的啟動細最近發現（）是比更早的干、祖細胞標志，故現人們多把、，細胞視為造血干細胞的重要標志。最近發現（）是比更早的干、祖細胞標志，故現人們多把、，細胞視 則在分化較好的中表達；血型糖蛋白表達在除紅系祖細胞外的紅系細胞上，占 患者的左右，可彌補血型糖蛋白的不足，在爆式紅系細胞集落形成單位（）和紅系細胞集落形成單位（）階段的祖細胞亦可表達陽性；、和是常用的原始巨核細胞標記，但往往隨、的陽性而表達。另外，作為神經細胞粘附分子（）通常在細胞和細胞上表達。在的中，表達陽性；在分化的單核細胞和（）、等核型改變時

13、，也呈陽性表達。 則在分化較好的中表達；血型糖蛋白表達在除紅系祖細 、和溶菌酶抗體在髓系細胞上也應用極廣。其中，除原始單核細胞白血病、巨核細胞白血病和紅系白血病外，其他髓系白血病細胞都有可能陽性；除早幼粒細胞白血病外，其他髓系白血病均可呈陽性；僅表達在極微分化的早期髓系細胞上；溶菌酶可部分彌補、對原始單核細胞的不敏感。 、和溶菌酶抗體在髓系細胞上也應用極廣。其中，除原特殊檢驗的應用慢淋問題(活化的淋巴細胞標記)惡組問題(附帶的細胞標記)慢性白血病的標記要慎重特殊檢驗的應用慢淋問題(活化的淋巴細胞標記) , () () () () : : : : : : 免疫標記應用與評價課件 : ( ) , , : : : : , , , : , , , : , , , : , , , : , : , , , ()(); ()() ()(); ( ()(); () ()(); ()(); () ( ) ()(); () ()(); , ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); ()(); . ()(); ()() ()(); ( ) ()() ()();