營養與食品衛生學實驗：實驗9 偶氮比色法測定魚類組胺含量_第1頁
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文檔簡介

1、實驗9 偶氮比色法測定魚類組胺含量 實驗目的了解魚類組胺比色法測定的原理并掌握一般操作過程；掌握魚類組胺生成的機理和衛生學意義。魚類組胺的產生：魚類組胺是組氨酸的分解產物，其產生與魚類所含組氨酸多少有關。海產魚類中青皮紅肉的魚含組氨酸比較多。魚類組胺生成的另一原因是魚體不新鮮或腐敗，污染于魚體的組胺無色桿菌和莫根氏變形桿菌可以產生脫羧酶，使魚體中較多的組氨酸脫去羧基而形成組胺。魚類組胺測定的衛生學意義：魚體中組胺含量超過200mg/100g時，可以引起過敏型組胺中毒。預防措施主要是防止魚類腐敗變質。 實驗原理魚中組胺遇偶氮試劑顯橙色，與標準系列比較定量。即組胺與重氮鹽可發生偶氮反應生成有色化合

2、物的原理進行比色測定。 操作步驟1. 樣品處理：稱取均勻剁碎魚類組織5g于蒸發皿中，加10%三氯醋酸20ml充分混勻。然后置60水浴溫浸30分鐘，過濾。用蒸餾水沖洗殘渣4次，將濾液一并收集于100ml容量瓶中。2. 標準系列管制備：分別吸取標準液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于比色管中（分別相當于組胺0、4、8、12、16、20g）。3. 樣品管制備：吸取樣品處理液1.0ml（0.11.0 ml）于比色管中。4. 加偶氮試液：分別于標準管和樣品管中加入對氨基苯磺酸鈉3 ml，搖勻；各管中加入鹽酸-亞硝酸鈉試液0.2ml，搖勻；加蒸餾水至10ml，靜置15分鐘。5. 比色測定：721型分光光度計，用1cm比色杯，460nm波長下比色測定，制定標準曲線。結果計算W：魚類樣

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