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文檔簡介

1、土壤活性有機質測定方法土壤活性有機質分類:由于研究角度和方法有所不同,活性 有機質產生了許多的稱謂,如易氧化有機質(LOM);生物量有機 質(MBOM);溶解有機質(DOM);輕組有機質(LFOM);顆粒有機 質(POM)等。每種指標的測定方法如下:一易氧化有機質(LOM):土壤與氧化劑作用后,易被氧化、不穩定的有機質稱作LOM。 目前常用的氧化劑有兩種:K2CrO7與KMnO4。KMnO4氧化法:(此方法較為常用)稱取過100目篩,約含15mg碳的土壤樣品(如:有機碳含 量為15g/kg,則稱取1g 土壤樣品)于50 mL塑料旋蓋的離心管 中;加入25mL, 333mmol/L高錳酸鉀溶液,

2、振蕩1h,然后在時 速2000 rpm下離心5 min,將上清液用去離子水以1 : 250稀釋, 在分光光度計565 nm下測定稀釋樣品的吸光率,由不加土壤的 空白與土壤樣品的吸光率之差,計算出高錳酸鉀濃度的變化,并 進而計算出氧化的碳量(氧化過程中1 mmolKMnO4-消耗0.75 mmol 或9 mg碳)。KMnO氧化法:(此法是在測定全量有機質基礎上降低某些反 4應條件,衍生出的測定方法)1、水合熱法:稱取磨細(過0.25 mm篩)風干土 1.50 g,放 入500 mL三角瓶中,準確加入0.5 mol/L KfrO水溶液10.0mL, 輕輕轉動,使土粒分散。用量筒將20 mL濃HSO

3、迅速直接注入土24壤懸濁液,立即小心地轉動三角瓶,使土壤與試劑充分混勻1 min。把三角瓶放在石棉網上30 min,然后注入水約200 mL,加 34滴鄰菲鑼啉指示劑,用0.25 mol/L FeSO4標準溶液滴定過量 的 KfrO7。2、0.1 mol/L K2CrO71 : 3H2SO4130C氧化法:在油浴溫度 為 130140C時將 0.5 g 風干土與 0.1 mol/L KfrOj1: 3H2SO410.0 mL 共煮 5 min,冷卻后加入30 mL 水,用 0.1 mol/L FeSO4 標準溶液滴定過量的K2CrO7二生物量有機質(MBOM):生物量有機質是指能被土壤微生物分

4、解利用的部分有機質。 即微生物量碳、微生物量氮。氯仿熏蒸法測定:(此法較為簡單,但氯仿為有毒物質,操 作復雜)前處理步驟:將新鮮的土樣品含水量調節至田間含水量 的30%50%, 25C下密封預培養710d,以保持土壤均勻和 所得結果的可比性。然后迅速測定土壤微生物量碳、氮,或在低 溫4C下保存。采用氯仿熏蒸浸提方法測定土壤微生物量碳、氮, 即稱取預處理的濕潤土壤每份25.0g(烘干基重)放入50mL燒杯 中,將其置于底部有少量NaOH、少量水(約200mL)和去乙醇氯仿 的真空干燥器中,抽真空后保持氯仿沸騰35 min,然后,將 干燥器移置在黑暗條件下25C熏蒸土壤24 h,出氯仿(倒回瓶中

5、重復使用),除盡干燥器底部的堿,再用真空泵反復抽氣,直到 聞不到土壤有氯仿味為止。將全部土壤轉入250 ml三角瓶中, 加入約100mL0. 5mol/LK2SO4提取液(土水比為1: 4),震蕩半小 時(200轉/分)后,迅速用中速濾紙過濾,濾液立即測定或放入 -15C的冰柜中保存。在熏蒸開始的同時,另取等量的土樣,直 接用0.5mo1/LK2SO4用液浸提,同時做空白,每份土壤重復三次。微生物量碳測定:吸取上述提取液10 ml于150 ml消煮管(內 徑24mm)中,加入01 mol/LK2S04-H2SO4溶液(史S04濃度為12 mol/L)10 ml,放入少量抗爆沸物質,搖勻后置于1

6、70-180C的 磷酸浴中煮沸10 min,冷卻后將溶液轉移到150ml三角瓶中, 加入2滴鄰菲羅啉指示劑,用0.05mol/LFeSO4滴定至終點(橙- 灰綠-淺綠-磚紅)。土壤微生物量氮測定:取15.0 ml濾液于250 ml消化管中, 加入0.19 mol/L CuSO4溶液0.3 ml、分析純濃硫酸5 ml、及少 量防瀑沸的顆粒物,混合液消化變清后再回流35 h,用凱氏定 氮儀蒸餾,0.02 mol/L HCl標準溶液滴定。計算公式為:SMBC二EC/kEC,SMBN二EN/kEN,式中 Ec=熏 蒸土壤浸提測定的全碳一不熏蒸土壤浸提測定的全碳,EN=熏蒸 土壤浸提測定的全氮一不熏蒸土

7、壤浸提測定的全氮,kEc和kEN 分別為所浸提出來的微生物量碳、氮占土壤微生物量碳、氮的 比例,即浸提效率,kEc取值0.38,kEN為0.45。基質誘導呼吸法(SIR):(此法對設備要求較高)將兩份潮濕 土樣(相當于30 g烘干土)稱重后放入玻璃瓶中,加入適量葡 萄糖,在室溫下培養30 min后將該瓶密封貯于25C下培養2 h 后用注射器抽取5ml氣體,采用氣象色譜儀測定CO2濃度。此法 測量的微生物量碳,由下式計算:MBC=5.11 + 16.18Y式中,Y為基質誘導呼吸消耗0勺量(UL)可溶性有機質(DOM):(可溶解在水中的有機質,也是 較為常用的方法)稱土樣(相當于3 g烘干土)移到

8、50 mL聚丙烯離心管中, 加30 mL蒸餾水,轉速為30r/min,溫度為20C下浸提30 min, 后以3500 r/min離心20min,將上清液過0.45 mm濾膜,此組 分被稱為水溶性有機碳(DOC)。另取30 mL蒸餾水加到離心管中,振蕩10 min,以使土壤完全分散,后放到80C的熱水浴浸提16 ho浸提后,振蕩10 s, 在3500 r/min離心20 min。上清液過0.45 u m濾膜,此組分 為熱水浸提有機碳(HDOC)。所有浸提物用TOC儀進行分析。輕組有機質(LFOM):(此法采用的是物理方法來分析 有機質活性)稱取過2 mm篩的風干土 15g加入到裝有30mL濃度為1.70 g cm-3NaI溶液的離心管中,振蕩30 s,然后以4500 r/min的 速度離心15 min,用虹吸法將懸浮液移出過濾,離心-虹吸過程 至少重復4次,直到沒有任何懸浮物存在。濾紙上的懸浮物用蒸 餾水沖洗,60C干燥48 h,稱重,并分析碳和氮含量。顆粒有機碳(PO

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