1、科研選題要求和實驗設計內容：一、目的意義二、科研選題三、文獻檢索四、實驗設計一、目的與意義 當今社會是一個以創新為特征、知識經濟占主導地位的新世紀。作為培養人才、發展科學和服務社會的高等學校，要以培養學生創新精神與能力為己任，全面推進素質教育。 實驗教學是實現素質教育和創新人才培養的重要環節。本科教學工作水平評估指南 把培養厚基礎、寬口徑、高素質、強能力，具有“創造、創新和創業”精神與能力的復合型人才作為現階段本科人才培養的目標與模式。武漢大學 “三創”教育的新理念基礎性實驗 40 學時 探索性實驗（設計性實驗） 20 學時 綜合性實驗 39 學時醫學機能實驗學教學內容（三理生理、病理生理與藥

2、理）基礎性實驗（40學時） 以三個學科的基礎性實驗為主，重在基本知識和基本機能的介紹；探索性實驗（20學時） 以探索性實驗為主線，重在科研選題、科研設計、文獻閱讀的培訓；綜合性實驗（39學時） 以三個學科共同的綜合性實驗和病案討論為主，重在綜合分析能力的提高。 機能實驗學（1）機能實驗學（2） 醫學機能實驗學教學計劃機能實驗學（1） 第 3 學期 包括基礎性實驗32學時、探索性實驗20學時。機能實驗學（2 ） 第 5 學期包括基礎性實驗8學時、綜合性實驗39學時。機能實驗學教學計劃（五年制）機能實驗學（1） 第 4 學期 包括基礎性實驗32學時、探索性實驗20學時。機能實驗學（2 ） 第 6

3、學期包括基礎性實驗8學時、綜合性實驗39學時。機能實驗學教學計劃（七年制）*其中的探索性實驗與醫學科學訓練課程銜接機能實驗學（1） 第 5 學期 包括基礎性實驗32學時、探索性實驗20學時。機能實驗學（2 ） 第 8 學期包括基礎性實驗8學時、綜合性實驗39學時。機能實驗學教學計劃（八年制）*其中的探索性實驗與醫學科學訓練課程銜接教學成果：構建基礎醫學本科創新人才培養的教學模式與實踐探索性實驗與流程調動了學習的主動性和積極性；掌握了與科研相關的基本知識和實驗技能；體會了科研的全部過程；提高了發現問題、思考問題和處理問題的能力；培養了科學的創新性思維和批判性思維；培養了團隊協作精神；樹立了良好的

4、科研精神和態度。 選自學生教學論文學生的主要收獲和體會二、科研選題科研選題流程立題根據流行病學調查結果和臨床發現提出立題依據。立題依據包括研究意義、國內外研究現狀及分析。基礎研究需結合科學研究發展趨勢來論述科學意義。應用研究需結合國民經濟和社會發展中迫切需要解決的關鍵科技問題來論述其應用前景。科研選題與文獻檢索為了立題和提出立題依據，必須進行文獻檢索，包括本研究領域內的國內外研究狀況、最新熱點和前沿問題等。選題主要來自于：科學領域中存在的空白之處文獻檢索給予的啟發文獻報道中存在的矛盾與爭議問題前期研究中的新發現選題的基本原則”三性”科學性：選題應建立在前人的科學理論和實驗研究基礎之上，應符合科

5、學規律，而不是毫無根據的胡思亂想。創新性：選題具有自己的獨到之處，或提出新規律、新見解、新技術、新方法，或是對舊有的規律、技術、方法有所修改和補充。可行性：選題切合研究者的學術水平、技術水平和實驗室條件，使實驗能夠順利實施。選題基本程序 初始意念 查閱文獻 立出題目 陳述問題 專家論證 發現問題并提出問題，形成一個初始的意念。使意念更系統、更深刻，形成科學假說。將科學假說加以概括，即可形成科研題目。陳述內容，包括立題依據、研究意義、研究內容及實驗方案、創新點與可行性分析、預期進展、經費預算等。內容確立后請專家論證，并根據論證意見，修改選題。 曲克蘆丁（troxerutin）系蘆丁經羥乙基化制成

6、的半合成黃酮化合物1。具有抑制紅細胞和血小板凝集作用，能改善微循環，保護內皮細胞，對急性缺血性腦損傷有治療作用；并有抗放射性損傷、抗炎癥、抗過敏、抗潰瘍等作用。但未見其有關鎮痛方面的研究。據文獻報道2,3，蘆丁具有鎮痛作用，該作用通過小鼠扭體、熱板等動物模型得以證實，并推斷其鎮痛活性來源于其槲皮素母核3。由于曲克蘆丁是蘆丁的水溶性衍生物，具有與蘆丁相似的槲皮素母核，因此推測曲克蘆丁可能亦有鎮痛作用。為此，本研究采用醋酸誘發小鼠扭體反應和小鼠熱板法，研究和證實曲克蘆丁的鎮痛作用。曲克蘆丁的鎮痛作用研究實例1曲克蘆丁的鎮痛作用細辛水煎劑與硝苯地平協同鎮痛作用的實驗研究阿魏酸鈉對雷公藤多甙所致小鼠急

7、性肝損傷影響的研究辛伐他汀耐缺氧、抗心律失常作用的研究異煙肼的急性毒性實驗左旋舒必利促進腸蠕動作用的研究無花果葉提取物鎮靜催眠作用的實驗研究 草酸銨對青霉素致癇大鼠治療作用研究硝苯地平對尼美舒利治療小鼠痛經療效的影響檳榔水提取液對小鼠應激抑郁模型的影響大蒜素對甘油所致腎損傷的保護作用黨參水提取液抗炎作用的研究人參皂甙對阿魏酸鈉在急性酒精中毒小鼠保護作用的影響蒺藜皂甙抗疲勞作用的實驗研究。學生的選題摘錄三、文獻檢索文獻檢索內容研究領域的國內外研究狀況（如綜述、論文前言和討論）最新熱點和前沿問題（研究意義顯著、近年內論文篇數）研究空白點（相關研究論文的篇數）研究內容（借鑒其他相似研究）技術路線檢測

8、指標研究手段統計方法 .中文文獻檢索方法中國期刊網外文文獻檢索方法1.利用外網資源輸入關鍵詞 可看全文外文文獻檢索方法2.利用校內資源外文文獻檢索方法外文資源四、實驗設計實驗設計的“三個基本要素”處理因素 實驗對象 實驗效應 根據研究目的由研究者人為施加給受試對象的因素。處理因素1. 處理因素的標準化 有來源、批號、劑型、給藥途徑、給藥劑量等2. 處理因素的數量、水平與設計 分：單/多因素設計、單/多水平設計等。3. 消除非處理因素干擾 年齡、體重、性別等，注意構成比，要一致。實驗對象（動物或人） 1. 可在不同水平進行研究 整體動物：正常動物、病理模型、轉基因動物等 離體器官：子宮、心臟、小

9、腸等 組織：肛尾肌、血管條等 細胞：肝細胞、心肌細胞等2. 動物種屬的選擇首選小鼠、大鼠 中樞神經猴 心血管貓 抗過敏豚鼠3. 正常動物選擇的一般原則(1) 年齡、體重 如小鼠1828 g, 大鼠180280 g(2) 性別 藥效多有差異(3) 生理與健康狀況 需動物合格證一、肝損傷動物模型 四氯化碳所致動物肝損傷法 醋氨酚所致動物肝損傷法二、腎損傷動物模型 阿霉素所致動物腎損傷法 甘油所致腎損傷法 慶大霉素所致腎損傷法 三、哮喘動物模型 組胺和乙酰膽堿引喘法 血小板活化因子誘發哮喘法常用實驗動物模型四、疼痛動物模型 化學刺激法 熱板法 電刺激法五、炎癥動物模型 耳腫脹法 棉球植入法 六、驚厥

10、動物模型 化學物質驚厥法 電驚厥法常用實驗動物模型七、心律失常動物模型 哇巴因誘發心律失常法 烏頭堿誘發心律失常法 八、其它疾病動物模型 查閱文獻和相關書籍常用實驗動物模型實驗效應（指標） 計量指標及統計方法計數指標及統計方法等級指標及統計方法計量資料（定量指標） 用定量的方法測定所獲得的資料，如血壓、血糖、血細胞數等。常帶有度量衡單位，如cm、mg、ml等。常用統計方法：(1) t 檢驗 用于兩組均數、前后對比或配對對比差值均數的顯著性檢驗，包括完全隨機化設計的兩樣本均數的t 檢驗和配對t 檢驗。 (2) 方差分析 用于多組樣本均數間差別的顯著性檢驗。計數資料 （定性指標） 將觀察單位按某種

11、屬性或類別分組計數，得到各組觀察單位的個數，如患病與未患病的人數；某人群中 O、A、B、AB 各種血型的人數。率(如陽性率、死亡率)是最常用的指標。(1) 22 表的2檢驗 (2) 2K 表的2檢驗常用統計方法：等級資料 (半定量資料) 將觀察單位按不同程度分組計數，得到各組觀察單位的個數，如疾病痊愈、顯效、改善、無效和惡化的人數；組織病變程度為、的人數；疼痛緩解為高度、中度、輕度、無效的人數等。其準確性介于計量資料和計數資料之間。 等級資料多屬于偏態資料，其分析常用非參數統計法，如等級序值法、秩和檢驗等進行顯著性檢驗。常用統計方法：特異性：反映某一特定現象，且不與其他現象相混淆。客觀性：易于

12、量化的、經過儀器測量和檢驗而獲得的。重復性：在相同條件下指標可以重復出現。靈敏性：根據實驗要求相應顯示出微小的變化，由實驗方法和儀器的靈敏度共同決定。可行性：既有文獻依據，又符合本實驗室條件和研究者實際水平。指標選擇注意事項【目的】了解大劑量可拉明的中毒表現驚厥，觀察巴比妥類 藥物的抗驚厥作用。【器材】250ml燒杯，鐵絲籠，1ml注射器，注射針頭。【藥品】1%苯巴比妥鈉，0.5%戊巴比妥鈉，5%可拉明，生理鹽水【方法】取體重相近的小白鼠3只，稱重，編號。 1 號鼠腹腔注射2%苯巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g， 2和3號鼠腹腔注射 生理鹽水0.1 ml/10g，15 min后 3只鼠同時皮下

13、注射5%可拉明 0.2 ml/10g，待發生驚厥后(以后肢強直為驚厥指標)， 2號鼠立即腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉溶液0.1 ml/10g，1和3號鼠不再給藥（僅腹腔注射生理鹽水0.1 ml/10g） 。觀察3只鼠出現的癥狀。巴比妥類藥物的抗驚厥作用體會“三要素” 處理因素、實驗對象、實驗效應巴比妥類藥物的抗驚厥作用1#鼠2#鼠3#鼠1.預防給藥i.p. 2%苯巴比妥鈉 0. 1ml/10g不預防i.p. NS 0. 1ml/10g2.給致驚厥劑15 min后三鼠同時S.C.5%可拉明3.搶救不再給藥i.p. NS 0. 1ml/10g驚厥后搶救 i.p. 0.5%戊巴比妥鈉驚厥后不搶救 i.

14、p. NS 0. 1ml/10g體會“三要素” 處理因素、實驗對象、實驗效應【目的】觀察肝功能損傷對戊巴比妥鈉作用的影響。【器材】天平，1 ml注射器，組織剪。【藥品】25四氯化碳油溶液，戊巴比妥鈉。【動物】小白鼠。【方法】在實驗前24h先取小鼠2只，乙鼠25四氯化碳油溶液灌胃0.1 ml/10g造成肝損傷。實驗時取給予四氯化碳小鼠（乙）和正常小鼠（甲）各2只，均腹腔注射戊巴比妥鈉0.2 ml/10g，觀察動物反應。記錄各鼠翻正發射消失和恢復時間，并計算入睡時間和睡眠時間。肝損傷對藥物作用的影響 肝損傷對藥物作用的影響甲鼠(正常)乙鼠(肝損傷)1.給藥i.p. 0.15%戊巴比妥鈉 2.記錄:

15、 給藥時間 入睡時間 蘇醒時間入睡所需時間 = 入睡時間- 給藥時間睡眠時間 = 蘇醒時間 - 入睡時間翻正反射實驗設計的“三個基本原則” 對照原則 隨機原則 重復原則對照原則以消除各非處理因素的干擾 實驗對象來源、種屬、性別、年齡、體重構成等要一致。 實驗室條件和實驗方法一致。(1) 空白對照(正常對照，陰性對照) 在不加任何特殊處理條件下所設的對照，如生理鹽水對照、DMSO對照等(2) 實驗對照(模型對照) 在某有關實驗條件下所設對照，如疾病模型對照、老年對照等(3) 自身對照 用同體實驗前后對照、左右肢對照等 (4) 相互對照 實驗中各實驗組之間互為對照(5) 標準對照(陽性對照) 用已

16、證實有效、公認或已批準上市的藥物作為對照常設的對照組巴比妥類藥物的抗驚厥作用1#鼠2#鼠3#鼠1.預防給藥i.p. 2%苯巴比妥鈉 0. 1ml/10g不預防i.p. NS 0. 1ml/10g2.給致驚厥劑15 min后三鼠同時S.C.5%可拉明3.搶救不再給藥i.p. NS 0. 1ml/10g驚厥后搶救 i.p. 0.5%戊巴比妥鈉驚厥后不搶救 i.p. NS 0. 1ml/10g0#鼠i.p. NS i.p. NS 0. 1ml/10gS.C. NS 0. 2ml/10g4#鼠驚厥后搶救 i.p. 受試藥 0. 1ml/10g(1) 正常對照組（溶媒對照）(2)受試藥大劑量對照組 受試

17、藥小劑量組 受試藥中劑量組 受試藥大劑量組 (3)模型對照組 (4)陽性對照組量效關系造模常用的實驗分組隨機原則使每個研究對象有同等的機會被分配到各組中，以均分樣本的生物差異 隨機數字表常用于抽樣研究及動物、病例、標本等隨機分組。表內數字相互獨立，無論從橫行、縱行或斜向等各種順序均呈隨機狀態。使用時可從任一個數字開始，按任一順序錄用。 例如：擬將受試者12 名中6 名用甲處理，另 6 名用乙處理。應先把受試者編號，再依次將查得的隨機數字標于編號下面，如遇單數分入甲組，遇雙數分入乙組，隨機數字取附表中11行第611列，共12 個數字 結果3、4、5、7、10、11、12 等7 個受試者分入甲組，

18、1、2、6、8、9等5個受試者分入乙組。如要求各組受試者數相等，就應從甲組中撥出一個到乙組。撥的方法是看下一個隨機數是幾就撥甲組的那一個，本例下一個隨機數是 8 ，因一共甲組七個受試者，故應再往下查一個是3，就把甲組第三個5號受試者撥入乙組。隨機化的應用隨機數字表法 (1)簡化分層隨機法 常用于單因素小樣本的一般實驗。即將同一性別動物按體重大小順序排列，分組時由體重小的到大的按次序隨機分到各組。在一個實驗中體重不宜相差過大。一種性別的動物分配完后，再分配另一性別的動物。各組雌雄性別數目應一致。 完全隨機法 主要用于單因素大樣本的實驗。先將樣本編號后，按隨機數字表任取一段數字，依次排序各樣本。然

19、后按這些新號碼的奇偶(兩組)或除以組數后的余數(兩組以上)作為分配歸入的組次。最后仍同前再隨機調整，以使各組樣本數達到均衡。 常用方法重復原則 一般而言，計量資料的樣本數每組不少于5例，以10 20例為好。計數資料的樣本數則需每組不少于10例，以30例為好 。 表9-1 動物實驗每組所需的樣本數 動 物計量資料計數資料小(小鼠、大鼠、蛙)1030中(兔、豚鼠)620大(犬、貓)510 阿魏酸鈉對雷公多藤甙所致小鼠急性肝損傷的影響實驗方法 取小鼠40只，隨機分為5組，每組8只。模型對照組灌胃雷公藤多甙片懸液900 mg/kg 每天2次，連續6天。阿魏酸鈉小、中、大劑量組分別腹腔注射50、100、150 mg/kg 連續9天，于第4天起于注射阿魏酸鈉1 h 后，灌胃雷公藤多甙片懸濁液900 mg/kg，4 h 后再重復灌胃雷公藤多甙片懸液一次。空白對照組給予等量的生理鹽水。末次給藥4 h后眼眶取血，放置1 h后制備血清，并剪開腹腔取出肝臟，測定肝臟指數。體會“三原則”對照原則、隨機原則、重復原則無花果葉提取物的鎮靜催眠作用研究實驗方法1. 對小鼠自主活動次數的影響 取小鼠50 只，雌雄各半，隨機分成無花果葉小、中、大劑量組，陽性對照組和空白對照組，每組10 只。各給藥組按0.2 ml/10g分別灌胃給予3、6、12 g生藥/kg的無花果葉提取物6，陽性對照組給予2 mg/kg