1、 ICS 67.060CCS B2315內蒙古自治區地方標準DB15/T 23402021呼倫貝爾大豆Hulunbuir soybean2021-09-08發布2021-10-08實施 DB15/T 23402021前言本文件按照GB/T 1.12020標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則的規定起草。I DB15/T 23402021呼倫貝爾大豆1范圍本文件規定了呼倫貝爾大豆的術語和定義、產地環境技術要求、品種選擇要求、生產管理模式、收儲方法、質量要求、品質要求、衛生要求、檢驗規則、標簽標識和包裝。本文件適用于呼倫貝爾大豆。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而

2、構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 1352-2009 大豆GB 2715 食品安全國家標準 糧食GB 2761 食品安全國家標準 食品中真菌毒素限量GB 2762 食品安全國家標準 食品中污染物限量GB 2763 食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量GB 5009.5 食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定GB 5009.6 食品安全國家標準 食品中脂肪的測定GB 5009.88 食品安全國家標準 食品中膳食纖維的測定GB/T 5490 糧油檢驗 一般規則GB 5491 糧食

3、、油料檢驗扦樣、分樣法GB 19641 食品安全國家標準 食用植物油料GB/T 21760 植物檢疫證書準則GB/T 30885-2014 植物蛋白飲料 豆奶和豆奶飲料NY/T 285-2012 綠色食品 豆類NY/T 1740 大豆中異黃酮含量的測定 高效液相色譜法LS/T 3111-2017 中國好糧油 大豆LS/T 3241-2012 豆漿用大豆DB15/T 2336 呼倫貝爾大豆產地環境技術要求DB15/T 2337 呼倫貝爾大豆品種選擇要求DB15/T 2338 呼倫貝爾大豆高效栽培技術規程DB15/T 2339 呼倫貝爾大豆收儲技術規范3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1

4、1 DB15/T 23402021呼倫貝爾大豆 Hulunbuir soybean源于呼倫貝爾市行政區域，產地環境、品種選擇、生產管理模式、收儲方法、質量、品質、衛生、標簽標識和包裝符合本文件要求的大豆。4567產地環境技術要求應符合DB15/T 2336的規定。品種選擇要求應符合DB15/T 2337的規定。生產管理模式應符合DB15/T 2338的規定。收儲方法應符合DB15/T 2339的規定。質量要求88.1感官要求和理化指標應符合GB 1352-2009中5.1.1的規定。8.2安全指標真菌毒素限量、污染物限量應符合GB 2761、GB 2762對豆類及其制品的規定和NY/T 285

5、-2012中4.4的規定。農藥殘留限量應符合GB 2763和NY/T 285-2012中4.4的規定。8.3追溯信息應符合LS/T 3111-2017中4.4的規定。9品質要求9.1普通大豆應符合表1的規定。2 DB15/T 23402021表1普通大豆指標項目指標檢測方法GB 5009.5GB 5009.6粗蛋白質含量（干基）/（%）粗脂肪含量（干基）/（%）41.020.5粗蛋白質和粗脂肪含量總和（干基）/（%） 59.0GB 5009.5 / GB 5009.69.2高油大豆應符合表2的規定。表2高油大豆指標指標一級項目檢測方法二級三級粗脂肪含量（干基）/（%） 22.521.520.5

6、GB 5009.69.3高蛋白質大豆應符合表3的規定。表3高蛋白質大豆指標指標項目檢測方法一級二級三級粗蛋白質含量（干基）/（%）44.042.541.0GB 5009.59.4其他品類大豆高異黃酮大豆9.4.1應符合表4的規定。表4高異黃酮大豆指標指標一級項目檢測方法二級三級異黃酮含量/（mg/kg） 430040003700NY/T 17409.4.2豆腐用大豆應符合表5的規定。3 DB15/T 23402021表5豆腐用大豆指標指標項目檢測方法一級二級三級粗蛋白質含量/（%）粗脂肪含量/（%）11S含量/7S含量42192.25384238GB 5009.5GB 5009.6附錄A192

7、1211.352.251.359.4.3豆漿用大豆應符合表6的規定。表6豆漿用大豆指標項目指標檢測方法蛋白質轉移率/（%）259LS/T 3241-2012中5.1GB 5009.88可溶性膳食纖維含量（干基）/（%）總固形物轉移率/（%）554019GB/T 30885-2014中6.2GB 5009.5蛋白質含量（干基）/（%）脂肪含量（干基）/（%）GB 5009.610衛生要求10.1 食用大豆應符合GB 2715、GB 19641的規定。10.2 植物檢疫應符合GB/T 21760的規定。11檢驗規則11.1 檢驗的一般規則應按GB/T 5490執行。11.2 檢驗批為同種類、同產地

8、、同收獲年度、同運輸單元、同儲存單元的大豆。11.3 扦樣、分樣：應按GB 5491的要求執行。11.4 高油大豆按粗脂肪含量定等，粗脂肪含量低于最低等級規定的，不應作為高油大豆。11.5 高蛋白質大豆按粗蛋白質含量定等，粗蛋白質含量低于最低等級規定的，不應作為高蛋白質大豆。11.6 高異黃酮大豆按異黃酮含量定等，異黃酮含量低于最低等級規定的，不應作為高異黃酮大豆。11.7 豆腐專用大豆按品質定等，低于最低等級規定的，不應作為豆腐用大豆。11.8 豆漿專用大豆應符合規定品質指標，不符合要求的，不應作為豆漿用大豆。11.9 出廠檢驗項目包括質量要求、品質要求和衛生要求。11.10 型式檢驗項目包

9、括本文件第8章、第9章中規定的全部項目。發生下列情況之一時，也應進行型式檢驗：原料、工藝有較大變化時；長期停產后重新恢復生產時；檢驗結果與平常記錄有較大差別時；國家有關市場監督管理行政主管部門提出要求時；“呼倫貝爾大豆”授權使用單位提出要求時。11.11 判定是否符合本文件要求時，應遵循以下規則：衛生要求有一項不合格，即判該批產品為不合格。質量要求中有不符合規定等級的項目，可進行一次復檢，復檢仍不合格，則判該批產品為不合格。4 DB15/T 2340202112標簽標識和包裝應符合GB 1352-2009中第8章和第9章的規定。5 DB15/T 23402021附錄 A（規范性）大豆蛋白亞基1

10、1S/7S檢測方法A.1原理大豆11 S和7 S蛋白亞基含量是影響蛋白質加工品質的重要因素,大豆中11 S和7 S的比值，與營養價值和商品性密切相關，11 S球蛋白含硫氨基酸比較豐富，蛋白品質好，豆制品的營養價值高，而7 S球蛋白富含賴氨酸，豆乳制品乳化性好，豆腐凝聚性好。聚丙烯酰胺單體和交聯劑在催化劑的作用下聚合成網狀結構凝膠，通過調節聚丙烯酰胺和交聯劑的濃度比例，可得到不同孔徑凝膠，用于分離不同分子量的蛋白。十二烷基硫酸鈉（SDS）是陰離子表面活性劑，與蛋白質形成的復合物帶有大量負電荷，從而降低或消除天然蛋白質分子間電荷差別，同時SDS能夠使蛋白質變性。SDS-蛋白質復合物的電泳遷移率差異

11、僅取決于蛋白質分子量，能夠將不同蛋白質亞基按照分子量分離為不同帶譜，以便檢測亞基含量。A.2儀器設備電子天平（精確度 0.001），研缽，斡旋儀，離心機，蛋白電泳儀及電泳裝置，凝膠成像系統。A.3試劑A.3.1試劑準備Tris-HCl、10% 十二烷基硫酸鈉（SDS）、尿素（CH4N2O）、溴酚藍（Bromophenolblue)、甘氨酸（Glycine）、丙烯酰胺（Acrylamide）、過硫酸銨（APS）、四甲基乙二胺（TEMED）、考馬斯亮藍（CoomassieBrilliantBlue G-250）、乙醇（C2H5OH）、乙酸（CH3COOH）、甲醇（MtOH）、巰基乙醇（ME）。A.

12、3.2蛋白提取液稱取6.055gTris-HCl，2g十二烷基硫酸鈉，303g 尿素，2.25g溴酚藍溶于ddH2O，定容至1L，調PH到6.8。A.3.3 10×緩沖液稱取30.3g Tris-HCl，143.1g甘氨酸，10g十二烷基磺酸鈉溶于ddH2O定容至3L。A.3.4 12%分離膠（一塊）吸取9.8mL ddH2O，12mL 30 % 丙烯酰胺，7.6 mL 1.5M Tris-HCl，0.3 mL10 %十二烷基硫酸鈉，0.3mL 10 %過硫酸銨，12L四甲基乙二胺，快速混勻。A.3.5 5%濃縮膠（一塊）吸取6.8mL ddH2O，1.66 mL 30 %丙烯酰胺，

13、1.26mL 1.0M Tris-HCl，0.1mL 10 %十二烷基硫酸鈉，0.1mL 10 %過硫酸銨，10L四甲基乙二胺，快速混勻。A.3.6染色液稱取2.25g考馬斯亮藍，440mL乙醇，60mL乙酸，ddH2O定容至1L。6 DB15/T 23402021A.3.7脫色液量取1000mL甲醇，250mL乙酸，3750 mLddH2O，充分混勻。A.4制膠及灌膠的方法將玻璃板用酒精擦干凈，用夾子固定在固定板上，然后按配方先灌40mL分離膠，混勻，灌至過固定板紅線1cm2cm止；灌好分離膠后立即加水封，用1000L的移液槍緩慢的加水封4cm5cm,靜置30min左右，直到看到分離膠與水封

14、間有一道清晰的折光面為止，說明分離膠已凝固；倒掉水封，用濾紙插入兩玻璃板間，輕吸分離膠表面的水分，濾紙不應接觸膠面；吸干膠面水分后，再將濃縮膠灌滿玻璃板，除去濃縮膠表面的氣泡，快速插入梳子，靜置1d左右，到傾斜玻璃板濃縮膠表面時膠液不流動為止。A.5樣品制備將待測大豆樣品去皮，用研缽磨成豆粉；1/1000電子天平稱量5mg樣品裝入2mL的離心管中；加入500µL蛋白提取液（含10µL 巰基乙醇）；斡旋儀800rpm 振動20min；離心機12000rpm 離心10min，取上清液備用。A.6樣品檢測配制12.0 %的分離膠和 5.0 %的濃縮膠，取10µL 的上清液加入點樣孔；濃縮膠電泳電壓為80V，分離膠電泳電壓為 120V，電泳2h；染色5h，脫色