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文檔簡介
1、項目一天然植物有效成分提取子項目一、黃芩根中黃芩苷的提取1、【項目目的】(1)掌握黃芩苷不同提取工藝和操作要點,不同工藝對產品得率和品質的影響;(2)通過黃芩苷含量檢測,掌握定性、定量方法在黃酮類物質檢測中的應用;(3)通過對黃芩苷的單因素和正交實驗優化,掌握正交方法在植物有效成分提取中的應用;(4)通過黃芩苷的提取工藝優化實訓,掌握黃酮類物質提取的一般規律。2、【項目任務】(1)通過查閱文獻,掌握水提法、醇提法在黃芩苷提取中的基本原理;(2)查閱文獻設計不同的黃芩苷提取工藝,并結合正交實驗進行黃芩苷的提取工藝優化,得到提取得率最大化;(3)查閱文獻并結合黃芩苷國標檢測方法,對提取中黃芩苷含量
2、進行準確測定;(4)總結黃芩苷提取工藝各環節具體參數,得出最佳工藝條件,并分析存在的問題,各小組以PPT形式作出整體匯報。3、【項目要求】(1)能夠全面準確采用單因素實驗對可能影響提取得率的因素進行測定分析,同時確定主要影響因素;(2)在單因素的基礎上進行正交分析,確定合適的因素和水平設計正交實驗;(3)通過正交分析確定最佳提取工藝條件4、【項目背景】(1)黃芩及黃芩苷簡介黃芩(ScutellariabaicaleGnesoirsgi)具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黃芩苷(Baicalin)是從黃芩根中提取分離出來的一種黃酮類化合物,具有抑菌、利尿、抗炎、抗變態及解痙作用,
3、且具有較強的抗癌反應等生理效能。黃芩苷還能吸收紫外線,清除氧自由基,同時,又能抑制黑色素的生成,是一種很好的功能性美容化妝品原料,具有較高的開發利用前景。黃芩化學成分研究逐漸為藥學和化學工作者所重視,目前,國內對黃芩苷提取工藝的研究有較多報道,其提取方法主要有溫浸法、煎煮法、微波法、超濾法等,但如何提高黃芩苷收率和純度一直是實際生產中存在的問題,缺乏對整個工藝條件進行全面研究,因此,有必要對影響黃芩苷提取工藝及其影響因素作一全面探討。A、水提法黃芩粉碎為20-40目,提取2次,物料比為10和5倍,時間為60min和30min,分離方式為先用雙層細濾布過濾再離心分離,60°C用鹽酸調p
4、H23,再70C保溫60min,靜置3h,蒸餾水分離洗滌兩次,干燥得黃芩苷粗品,測量黃芩苷的含量,計算提取率。工藝流程原料選擇T粉碎T煎煮T過濾T離心T調節Ph值T保溫T靜置T洗滌T粗制品T加蒸餾水溶解T調節Ph值T加乙醇T調節Ph值T冷卻T過濾T干燥T成品。B、回流提取法黃酮苷類(如羥基黃酮、雙黃酮、橙酮、查耳酮等)一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些極性較大的混合溶劑進行提取。其中用得最多的是甲醇一水(1:1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黃酮類化合物提取溶劑,高濃度的醇(如90、95)宜于提取甙元,60左右濃度的乙醇或甲醇水溶液適宜于提取甙類物質。可以采用一定濃度的醇溶劑提取,測量黃芩苷
5、的含量,計算提取率。黃苓粗粉4倍量60骼乙醇浸泡過夜,次日叫弋西流提肛3欲加醉量依次為仏3,2倍片每就iWni“過遊,合井濾液IL;濾液菊渣丨阿收人醇至無醇味v水蔽加熱至的J鹽酸調pH1-2t保溫3Qmim室溫靜置24h.沉淀,離心沉淀二消液1Q倍水攪拌成混懸藏,20NsOH訓pH列入靜置.離也沉淀上清加熱至4Q-C,攪抒卜加入哪體積乙胖(1:1),混勻靜置,離心匕清液沉淀鹽酸調pH為缶60乜保溫30別m堂溫放置沉淀,離心上淸液沉淀干燥粗黃琴廿C、黃芩苷含量測定方法標準曲線的繪制:精確稱取黃苓昔標準品50mg,用50%乙醇溶解并定容于100mL容量瓶,配制0.5mg/mL黃苓昔標液,分別吸取標
6、液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0mL于100mL容量瓶中,用50%乙醇定容,紫外可見分光光度計278nm處測吸光值,得到吸光度-濃度回歸曲線。樣品含量的測定:精確稱取實驗所得黃苓昔粗品50mg用50%乙醇溶解定容于100mL容量瓶。用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,吸取續濾液2.5mL于100mL容量瓶中,用50%乙醇定容。另取50%乙醇作空白,于278nm波長處測吸光度,由回歸方程式計算出對應濃度,按下式計算黃苓昔含量。黃苓昔含量()=對應濃度(yg/mL)x100x40/樣品重(mg)5、【項目實訓流程】(1)在教師指導下,按照材料中所述的參考方法,自行設計并完成
7、黃芩苷提取工藝實訓方案;(2)通過正交實驗,得出提取得率較高的生產工藝,并確定影響提取的主要因素和影響程度;(3)完成提取工藝總結報告:列表記載提取得率;(4)對不同的提取工藝條件的提取得率進行比較分析,提出提取工藝的最佳條件,簡要估算每種工藝對應的加工成本(不含人工費);(5)掌握黃酮類物質提取的一般規律和方法。6、【項目成果形式】(1)黃芩根中黃芩苷類物質提取工藝條件詳細設計方案,每小組提交1份;(2)優化后的黃芩苷提取工藝,并列出主要影響因素及影響程度;(3)每小組提供黃芩苷提取實訓總結報告1份,并對整個工藝環節作出詳細總結和分析;(4)以PPT形式作出匯報,小組成員隨機匯報。7、【項目
8、評價考核標準】(1)、考核要求(N+2)A、考核形式分為過程性考核(N)和終結性匯報考核(2),比例為4:6;B、學生出勤率達到75%或以上的要求,否則或不獲準參加該科目之考評。C、過程考核主要是對學生的查閱文獻并設計生產工藝條件、實際操作技能進行考核,主要包括提取設計方案的制定、項目組織與實施、出勤情況、儀器操作能力等;(4)終結性考核主要是考核本實訓的詳細優化后的提取工藝及其存在的問題總結,包括工藝條件、工藝總結報告、匯報PPT等。(2)、考核比重考核類型考核比重100%考核項目及比重考核標準考核項目比重過程考核(N)40%出勤率5%出勤率需達到75%以上為滿分,低于75%本項為0,教師評定。設備使用10%小組成員能夠熟練使用提取、過濾相關設備,并了解設備的基本原理,教師、小組評定。設計方案25%小組設計方案并作出書面匯報,合理可行,且符合生產25分,設計基本合理20分,設計大部分不合
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