1、透析液細菌內毒素的檢測方法和探討        【摘要】目的探討透析液的細菌內毒素正確的采樣方法，以減少操作不當而造成陽性率的發(fā)生。方法對我院血液凈化中心透析液用改良鱟試驗檢測內毒素。結果內毒素檢測的結果跟標本放置時間有關，標本放置時間越長，檢測結果越不準確，而對于干預前、后采集內毒素標            【摘要】目的 探討透析液的細菌內毒素正確的采樣方法，以減少操作不當而造成陽性率

2、的發(fā)生。方法  對我院血液凈化中心透析液用改良鱟試驗檢測內毒素。結果  內毒素檢測的結果跟標本放置時間有關，標本放置時間越長，檢測結果越不準確，而對于干預前、后采集內毒素標本差異無統計學意義。結論  目前透析用水及透析液存在的內毒素及細菌的污染，定期檢測反滲水、透析液的內毒素水平及進行細菌培養(yǎng)，定期消毒反滲水裝置及透析液容器，對減少致熱源反應至關重要。 【關鍵詞】透析液  內毒素  反滲水  細菌       

3、60; 眾所周知，使用不合格的純化水進行血液透析將會導致透析病人出現透析并發(fā)癥或慢性中毒甚至死亡，尤其是當病人的中毒癥狀不表現為急性或亞急性狀態(tài)時，人們通常將其歸咎于終末期腎衰的并發(fā)癥，而忽略了對水處理系統的維護及水質的監(jiān)測1。隨著透析水平的逐漸提高，透析中心人員對水質的監(jiān)測越來越重視，但是透析液內毒素的檢測往往會由于操作中工作人員的失誤或標本放置時間的延長而影響檢測結果。此研究表明，透析液內毒素的檢測結果跟工作人員的操作方法和標本放置的時間有關，報告如下。         1  資料

4、和方法         1.1一般資料           血液透析機25臺，其中貝朗15臺，費森尤斯5臺，金寶5臺。透析器入口處透析液。一次性無菌注射器（10ml），無菌干試管，一次性無菌手套，消毒棉簽，安爾碘。         1.2方法         

5、1.2.1研究方法  本組100例，設對同一臺透析機在同一時間采用相同的方法留取內毒素標本4例，共25臺，放置在不同時間段檢測。另取標本80例，對透析機進行干預前和干預后各抽取內毒素標本40例。         1.2.2標本采樣方法  對無采樣口的透析機由2人同時操作，1人戴上一次性無菌手套，先用安爾碘棉簽擦拭快速接頭表面3次。2人洗手后，1人將透析液供液管的快速接頭從透析器上分離出來，向外拉住快速接頭的套環(huán)不要釋放，使快速接頭外層套環(huán)的位置低于內層的接頭開口，使開口朝上，

6、讓供液管的透析液快速沖洗接頭約30秒，另1人迅速將無菌注射器針頭的2/3插入快速接頭內抽取透析液標本；對有采樣口的透析機由1人操作，操作者戴上一次性無菌手套，先用安爾碘棉簽擦拭采樣口表面3次，洗手后，采用無菌操作的方法用無菌注射器斜刺入進液管抽取透析液樣本，然后按常規(guī)的無菌標本采樣法將透析液標本置于無菌干試管內。另一組是對透析機不做任何措施和采用常規(guī)消毒沖洗后運用上述方法分別抽取內毒素標本。         1.2.3檢測方法  使用0.5ml規(guī)格的鱟試劑，取鱟試劑若干支，開啟，按標示裝量加入檢

7、查用水溶解，輕輕搖勻備用。取10×75mm試管8支，其中2支作供試品檢查管，2支作陰性對照管，2支作陽性對照管，2支作供試品陽性對照管。每支試管加入0.1ml的已溶解的鱟試劑，每支供試品檢查管加入0.1ml供試品；陰性對照管加入0.1ml的檢查用水；陽性對照管加入0.1ml濃度為2的內毒素溶液，檢品陽性對照管加入0.1ml含2內毒素的供試品。封閉管口，輕輕搖勻，垂直放入37±1的恒溫器中孵育60±2分鐘，然后取出觀察結果。 試管在孵育期間應避免任何的振動（所有鱟試劑及內毒素標準品均為湛江安度斯生物有限公司合格產品，使用前均進行靈敏度復核，符合規(guī)定）。  

8、       2  結果         2.1透析液及透析用水的細菌內毒素限度（L值）參照AAMI標準：反滲水內毒素0.25EU/ml，透析液內毒素2EU/ml，按照這個標準。       3  討論         內毒素的主要成分是脂多糖類（LPS）的復

9、合物，主要來自G菌的細胞壁，不僅活的細菌能分泌出來，死亡的細菌溶解后也能釋放出來2。血液透析患者每周需要透析23次，每次需用透析液為0.5L×60×4120L，如此大量的透析液只通過半透膜和血液接觸，因此透析液質量要求非常高。如果水中含有有害物質，很容易通過透析膜進入患者的血液中，即使是較低濃度的有害物質長期蓄積，也會導致慢性中毒，嚴重的甚至危及生命3，血液透析室的醫(yī)院感染在血液凈化領域越來越受到重視。70年代初期曾有報告。         目前，隨著透析中心的管理越來越規(guī)范，已形成不定期對反滲

10、膜進行檢測，由于管理疏忽而造成透析液不合格的幾率也越來越少。而造成水質不合格的主要原因是由于采樣的不規(guī)范和標本檢測時間的滯后，從而影響了采樣的結果。以往我們對內毒素的不合格標本都是采取重復檢測的方法，這樣不僅成本增高，耗時過長，而且也延誤了對超標透析液的及時干預。為了避免結果不合格，通過實驗我們采取跟蹤檢測的方法，發(fā)現標本放置時間過長是直接造成假陽性發(fā)生的主要因素。為此透析中心派專人負責，留樣前與檢測單位聯系，由透析中心人員與檢測單位人員共同合作，在樣本抽取后3小時內進行檢測，結果均符合標準。標本隨著時間的延長，發(fā)生陽性的幾率越來越大。但臨床上往往檢測單位和透析中心為兩個部門，需要透析中心人員

11、跟蹤檢測才能達到要求。         標本的抽取應該在常態(tài)下進行，一般在早晨第一班病人上機前抽取。早晨開機后，先將機器沖洗1015min，然后抽取標本，對于不同型號的透析機采用不同的抽取方法抽取標本（方法如上）。如果多次采樣進液管溶液被刺破，血液透析機的密封程度受損，不宜長期監(jiān)測。因此，我們認為因內毒素的檢測周期短，監(jiān)測密集，最好采用第一種方法進行采樣。         表2顯示，在實踐中，檢測前的干預和非干預進行對比，結果無顯著性差

12、異。以往標本結果不合格時，在重新留樣前通常都是加強對透析機器、管道的熱消毒和化學消毒后進行抽樣，其實這樣并不準確，樣本的抽取應該在常態(tài)干預下進行，只要嚴格按機器的操作規(guī)程，加強兩病人之間的消毒、沖洗，監(jiān)測機器的消毒效果和消毒液的有效濃度，盡可能的減少一切外源性干擾因素影響結果。     通過對資料的總結分析，探討了透析液內毒素檢測標本的正確采樣方法，減少因操作不當而造成的陽性率的發(fā)生，專人進行留樣監(jiān)測，從而為進一步規(guī)范血液透析內毒素監(jiān)測提供了參考依據。建議定期消毒反滲水裝置及透析液      &

13、#160;             通過對資料的總結分析，探討了透析液內毒素檢測標本的正確采樣方法，減少因操作不當而造成的陽性率的發(fā)生，專人進行留樣監(jiān)測，從而為進一步規(guī)范血液透析內毒素監(jiān)測提供了參考依據。建議定期消毒反滲水裝置及透析液容器，采用雙極反滲系統，取消儲水罐，定期檢測內毒素及行細菌培養(yǎng)，以避免熱源反應的發(fā)生，進一步提高透析質量。  參 考 文 獻  1Rebacca L.Amato. Water Treatment for Hemodialys