1、登 記 號：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01儀器編號：QC-0072高效液相色譜儀校驗方案JSALPHARMPage 13 of 13題 目Title高效液相色譜儀校驗方案方 案 號Document #PQP-QC072-02設備編號Equipment #QC-0072安裝地點Location高效液相色譜室生產廠家Manufacturer日本島津（Shimadzu）公司方案審批：Approved By姓名Name職位Position簽名Signature日期Date陳凱QC分析人員于勇QC主管莫遠略質量部長江蘇阿爾法藥業有限公司Jiangsu Alpha Pharma

2、ceutical Co., Ltd.目 錄1. 目的2. 確認人員及職責 3. 確認前確認4. 確認依據及判定標準5. 確認內容6. 再確認要求7. 確認結果匯總8. 結果評價1. 目的明確穩定性試驗箱的校驗項目、校驗條件、校驗方法、接受標準、校驗周期等，便于檢驗人員按規程進行穩定性試驗箱的校驗操作。 保證實驗室使用的稱量點稱量的準確性。2確認人員及職責 QC分析人員：負責起草確認方案和報告、組織協調開展確認；QC主管：審核確認報告和報告；質量部長：批準確認報告和報告。3. 確認前確認3.1人員確認姓名職務職責簽名日期陳 凱QC分析人員起草確認方案和報告，執行確認、組織培訓趙家寬QC分析人員協

3、助執行確認于 勇QC主管監督確認的進行3.2文件培訓序號培訓內容是否培訓1 LC-2040C型高效液相色譜儀標準操作規程（QC-3079）是 否2LC-2040C型高效液相色譜儀維護保養標準操作規程（QC-3080）是 否3液相色譜儀的校驗操作規程（QC-4002）是 否4高效液相色譜儀校驗方案（PQP-QC072）是 否5檢驗室安全管理規程（QC-1018）是 否3.3 校驗設備確認序號設備及要求是否符合1秒表： 分度值不大于0.1 s是 否2分析天平： 最大稱量200g,最小分度值0.1mg   是 否3容量瓶： 10.0ml A級 不少于10支是

4、否4溫度計： 分度值不大于0.1是 否5以上設備應在校驗有效期內是 否3.4 標準物質和試劑確認序號標準物質、試劑及要求是否符合1甲醇： HPLC級是 否2純水： HPLC級 是 否3丙酮： 分析級是 否4萘： 是 否 檢測人： 日期： 年 月 日 復核人： 日期： 年 月 日4. 確認依據及判斷標準4.1 確認依據 4.1.1LC-2040C型高效液相色譜儀安裝使用說明 4.1.2液相色譜儀校驗規程 JJG 705-2014 4.1.3中國藥典2010年版二部附錄 4.1.4藥品GMP指南2010年版4.2 評判標準4.2.1性能確認(PQ)系 統校驗項目標 準輸液系統1、 泵耐壓

5、2、 泵流量設定值誤差SS3、 泵流量穩定性SR4、梯度誤差Gi符合規定±2%2%±3%柱溫箱系統1、 溫度設定最大誤差2、 溫度穩定性±21/h檢測器系統1、 基線噪音2、 基線漂移3、 最小檢測限5×10-4AU5×10-3AU/30min5×10-6g/ml(萘/甲醇溶液)整機性能1、 定性重復性2、 定量重復性 3、 線性測定1.0%3.0%相關系數R0.9995. 確認內容5.1性能確認(PQ)5.1.1 輸液系統確認5.1.1.1泵耐壓：儀器連接完好后，以100%甲醇為流動相，流速0.2ml/min.啟動儀器，待壓力平穩后

6、，觀察10分鐘，應無漏液現象。卸下色譜柱，堵住泵出口（壓力傳感器以下），使壓力達到最大允許值的90%，保存5分鐘，應無漏液現象。5.1.1.2泵流量設定值誤差SS、穩定性誤差SR：啟動儀器，按上表的要求設定流量，壓力穩定后，用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收集上表規定時間流出的流動相，在分析天平上稱重，按式（1）、（2）計算SS、SR 流量（ml/min）次數W1W2W2-W1SSSR0.51231.01232.0123表1注： Fm=(W2-W1)/(t) Ss=(-Fs)/Fs×100% 式（1） SR=(Fmax-Fmin)/ ×100% 式（2）

7、 式中：Fm 實測流速； W2 容量瓶+流動相的質量，g； W1 容量瓶的質量，g； 試驗溫度下流動相的密度，g/mL； t 收集流動相的時間，min； 同一組測量的算術平均值，mL/min； FS 流量設定值，mL/min； Fmax 同一組測量中流量最大值，mL/min； Fmin 同一組測量中流量最小值，mL/min。5.1.1.3 梯度誤差Gi： 色譜條件： 色譜柱：限流阻尼管 流速：2.0ml/min 檢測波長：265nm 流動相A：純化水 流動相B：0.1%丙酮水溶液 以流動相A平衡系統，按表2梯度程序測試2次，記錄色譜圖。畫出B溶劑經5段階梯從0%到100%B梯度變化曲線（如圖1

8、），求出由B溶劑變化所產生的每一段階梯對應的響應信號的變化值Li；按下列公式（1）計算每一段階梯對應的響應信號值的變化平均值；按下列公式（2）計算五段階梯對應的響應信號值的總平均值；按下列公式（3）計算每一段階梯的誤差Gi，取Gi的最大值作為儀器梯度誤差報告。表2 梯度程序時間(分)流動相A%流動相B%1.00100.00.01.0180.020.04.0080.020.04.0160.040.07.0060.040.07.0140.060.010.0040.060.010.0120.080.013.0020.080.013.010.0100.016.000.0100.021.00100.00

9、.026.00100.00.0圖1 梯度組成準確度示意圖 = 公式（1） = 公式（2） Gi= 公式（3） 式中： 第i段階梯響應信號值的平均值； L1i第i段階梯第1組響應信號值； L1（i-1） 第（i-1）段階梯第1組響應信號值； L2i第i段階梯第2組響應信號值； L2（i-1） 第（i-1）段階梯第2組響應信號值； 5段階梯響應信號值的總平均值； Gi第i段階梯的梯度誤差表3iL1iL1（i-1）（）L2iL2（i-1）Gi1 2 3455.1.2 柱溫箱系統確認依次設定柱溫箱溫度為25，35，45值進行校驗，這些溫度應覆蓋實驗室使用的柱溫范圍,當使用柱溫超出該范圍時，需要增加該溫

10、度點校驗。設定待校驗溫度，待測溫儀顯示的溫度穩定后，記錄溫度顯示值，每隔10分鐘記錄一次，每個溫度點記錄7次。求出平均值，設定值與平均值之差為設定值誤差T，7次測量值中最大值與最小值之差為控溫穩定性誤差Tc。表4設定溫度（）次數測定溫度（）平均溫度（）T（）Tc2512345673512345674512345675.1.3 檢測器系統確認5.1.3.1基線漂移和基線噪聲：色譜條件：色譜柱：C18柱 流速：1.0ml/min 檢測波長：254nm 流動相：甲醇 在分析界面中點擊基線檢查，設置參數后，點擊運行，工作站會自動記錄30分鐘，運行完畢后，機器自動計算出結果，給出是否通過的結論。將運行界

11、面復制到Word文檔中，打印出來即可。其他型號站基線漂移和基線噪聲的測試方法：按不同的儀器配置，設定檢測器的靈敏度為最強靈敏度。待系統平衡后，調整基線在圖譜的中部位置，記錄基線30分鐘。以圖譜顯示的刻度值，計算基線噪音和基線漂移值。基線漂移：_ < 5×10-4AU 基線噪聲：_ < 5×10-3AU/30min5.1.3.2最小檢測限：按上述色譜條件，平衡系統。取20µl的1×10-7g/ml萘/甲醇溶液進樣，記錄色譜圖。按下列公式計算最小檢測限：CL= 注：Nd與H的單位應一致；分母中的20為進樣體積，單位為µl。 式中： CL

12、 最小檢測濃度,g/ml； Nd 基線噪音高度； c 標準溶液濃度,g/ml； V 進樣體積，µl； H 標準溶液的峰高。 最小檢測限（CL）=_ 5.1.4整機性能確認5.1.4.1定性與定量重復性：色譜條件： 色譜柱：C18柱 流速：1.0ml/min 檢測波長：254nm 流動相：甲醇取1×10-4g/ml萘/甲醇標準溶液連續進樣6次，記錄色譜圖，以萘峰的保留時間和峰面積，計算相對標準偏差RSD，即為整機性能的定性與定量重復性。進樣次數123456平均值RSDRT（min）峰面積表55.1.4.2進樣針性能線性：取1×10-4g/ml萘/甲醇標準溶液，分別以

13、5l、10l、15l、20l、30l的體積進樣，記錄色譜圖。重復測定3次。以進樣體積Vi為橫坐標，以3次萘峰平均面積Ai為縱坐標作線性回歸，得其線性方程及相關系數R。表6進樣體積(l)510152030平均峰面積線性方程，相關系數R5.1.4.3線性：配置萘/甲醇標準溶液，使濃度分別為0.2×10-4g/ml、0.4×10-4g/ml、0.6×10-4g/ml、0.8×10-4g/ml、1.0×10-4g/ml、1.2×10-4g/ml以20l的體積進樣，重復測定3次，記錄色譜圖。以進樣體積Vi為橫坐標，以3次萘峰平均面積Ai為縱坐標作線性回歸，得其線性方程及相關系數R。表7樣品濃度×10-4g/ml0.20.40.60.81.01.2平均峰面積線性方程，相關系數R 6.再確認要求6.1再驗證周期6.1.1 設備大修后需再校驗。6.1.2 由于檢修、調整、遷移或其它原因，可能對設備的安裝情況、主要技術參數和功能有影響時，應進行再驗證。6.1.3 高效液相色譜儀的驗證周期為12個月，更換部件或對儀器性能有懷疑時，應隨時驗證。6.2 再驗證內容進行設備的再校驗，可針對設備性能中部分必須的項目進行再驗證，而不一定要進行全面的驗證。 7. 確認結果匯總7.1性能確認(PQ)系 統校驗項目標 準測試結果輸液系統泵耐