1、熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 一、實驗目的一、實驗目的 1 1、掌握熒光法的定量分析方法（標準曲線法）掌握熒光法的定量分析方法（標準曲線法） 2 2、熟悉熟悉930930型熒光光度計的使用方法型熒光光度計的使用方法 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 二、實驗原理二、實驗原理 奎尼丁為抗瘧藥奎寧的右旋體，屬生物堿類抗心律奎尼丁為抗瘧藥奎寧的右旋體，屬生物堿類抗心律失常藥，其結構式如下：失常藥，其結構式如下： NH3COHHOHNHCH=CH2.H2SO42.2H2O熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 二、實驗原

2、理二、實驗原理 基于本品分子具有奎啉環結構，可產生熒光這一特基于本品分子具有奎啉環結構，可產生熒光這一特性，在實驗中用性，在實驗中用930型熒光光度計測量其熒光強度，型熒光光度計測量其熒光強度，由標準曲線法求出本品的含量。由標準曲線法求出本品的含量。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 三、儀器與試劑三、儀器與試劑 930型熒光光度計；型熒光光度計；硫酸奎尼丁對照品，硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁對照品，硫酸奎尼丁H2SO4溶液（溶液（0.05mol/L） 容量瓶（容量瓶（50ml）熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 四、實驗步驟四、實驗步驟 1 .

3、標 準 溶 液 的 制 備標 準 溶 液 的 制 備 精 密 吸 取 用精 密 吸 取 用 H2S O4溶 液溶 液（0.05mol/L）配置的硫酸奎尼丁標準液（配置的硫酸奎尼丁標準液（100ug/ml）1.0、2.0、3.0、4.0及及5.0ml,分別置于分別置于50ml容量瓶中，容量瓶中，用用H2SO4溶液（溶液（0.05mol/L）稀釋至刻度，搖勻，待測。稀釋至刻度，搖勻，待測。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 四、實驗步驟四、實驗步驟 2. 樣品溶液的制備樣品溶液的制備 精密稱取奎尼丁樣品約精密稱取奎尼丁樣品約20mg置于置于50ml容量瓶中，用容量瓶中，

4、用H2SO4溶液（溶液（0.05mol/L）溶解并稀溶解并稀釋至刻度，搖勻。吸取此溶液釋至刻度，搖勻。吸取此溶液0.50ml，于于100ml容量容量瓶內，用瓶內，用H2SO4 溶液（溶液（0.05mol/L）稀釋至刻度，搖稀釋至刻度，搖勻，待測。勻，待測。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 四、實驗步驟四、實驗步驟 3. 測定測定（1）選擇合適的熒光濾光片：降級發光濾光片（暫）選擇合適的熒光濾光片：降級發光濾光片（暫用用360nm的）置于被測液前面的光徑中，將波長稍長的）置于被測液前面的光徑中，將波長稍長于于360nm的濾光片在被測液后的光徑中，接通一起電的濾光片在

5、被測液后的光徑中，接通一起電源開關，打開樣品室箱蓋，旋動調零電位器，使電表源開關，打開樣品室箱蓋，旋動調零電位器，使電表指針處于指針處于“0”位，儀器預熱位，儀器預熱20分鐘，放入某一濃度分鐘，放入某一濃度的標準溶液，測定其熒光強度，必要時調節刻度旋鈕的標準溶液，測定其熒光強度，必要時調節刻度旋鈕及靈敏鈕（注意：一經調節，詞梁鈕不得再變動）。及靈敏鈕（注意：一經調節，詞梁鈕不得再變動）。更換波長再長一些的濾光片，依次同上法測定各濾光更換波長再長一些的濾光片，依次同上法測定各濾光片的熒光強度，選擇熒光強度最強的一塊熒光濾光片片的熒光強度，選擇熒光強度最強的一塊熒光濾光片作測定用。作測定用。 熒光

6、分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 四、實驗步驟四、實驗步驟 （2）選擇合適的激發光濾光片：將已選擇好的熒光）選擇合適的激發光濾光片：將已選擇好的熒光濾光片（暫定濾光片（暫定120nm的）固定，用各種波長（其波長的）固定，用各種波長（其波長要小于熒光濾光片的波長）的濾光片代替要小于熒光濾光片的波長）的濾光片代替360nm的一的一塊激發光濾光片。一次同上法測定其熒光強度，選擇塊激發光濾光片。一次同上法測定其熒光強度，選擇熒光最強的一塊激發光濾光片作測定用。熒光最強的一塊激發光濾光片作測定用。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 四、實驗步驟四、實驗

7、步驟 （3）將濃度最大的硫酸奎尼丁標準液（）將濃度最大的硫酸奎尼丁標準液（10ug/ml）放放入比色皿中，調節刻度旋鈕至滿刻度入比色皿中，調節刻度旋鈕至滿刻度(必要時可調節靈必要時可調節靈敏度鈕使滿刻度敏度鈕使滿刻度)；然后從稀濃度至高濃度依次測定其；然后從稀濃度至高濃度依次測定其余的奎尼丁標準溶液，用余的奎尼丁標準溶液，用H2SO4溶液（溶液（0.05mol/L）作作空白，并一一記下熒光強度；最后測定樣品液與空白空白，并一一記下熒光強度；最后測定樣品液與空白液。在測定數據中扣除空白溶液的熒光強度。液。在測定數據中扣除空白溶液的熒光強度。 4. 畫出畫出F-C硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁的標準曲線，并計算樣品中硫的標準曲線，并計算樣品中硫酸奎尼丁的百分含量。酸奎尼丁的百分含量。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 五五、操作要點和注意事項操作要點和注意事項 1、注意觀察激發光路與發射光路的夾角、注意觀察激發光路與發射光路的夾角。 2、把樣品池放入熒光分光光度計時，注意、把樣品池放入熒光分光光度計時，注意 每次要使同樣的池壁面對激發單色器與每次要使同樣的池壁面對激發單色器與 發射單色器發射單色器。 熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量熒光分析法測定硫酸奎尼丁的含量 六六、 思考題思考題 1、測量樣品液、標準液時