1、99-07年微生物問答題題目及參考答案1, 以Schizosaccharomyces octosporus, S. ludwigii 和S. cerevisiae 為例描述酵母菌的三種生活周期及其特點。(02,04,05,07)答:(1)營養體以單倍體形式存在, Schizosaccharomyces octosporus(八孢裂殖酵母)是這一類型生活史的代表,特點為:營養細胞為單倍體;無性繁殖為裂殖;二倍體細胞不能獨立生活,故此期極短.生活史可分為5個階段:單倍體營養細胞借裂殖方式進行無性繁殖;兩個營養細胞接觸后形成接合管,發生質配后即進行核配,于是兩個細胞連成一體;二陪體的核分裂3次,第一

2、次為減數分裂;形成8個單倍體的子囊孢子;子囊破裂釋放子囊孢子.(2)營養體只能以二倍體形式存在, S. ludwigii(路氏類酵母)是這一類型生活史的代表,特點為:營養體為二倍體,不斷進行芽殖,此階段較長;單倍體為子囊孢子,在子囊內發生接合;單倍體階段僅以子囊孢子的形式存在,不能進行獨立生活.生活史具體過程為:單倍體子囊孢子在孢子囊內成對接合,并發生質配和核配;接合后的二倍體細胞萌發,穿過子囊壁;二倍體的營養細胞少獨立生活,通過芽殖方式進行無性繁殖;在二倍體營養細胞內的核發生減數分裂,故營養細胞成為子囊,其中形成4個單倍體子囊孢子.(3)營養體既能以單倍體也能以二倍體形式存在, S. cer

3、evisiae(釀酒酵母)是這類生活史的代表,特點為:一般情況下都以營養狀態進行出芽繁殖;營養體即能以單倍體形式存在,也能以二倍體形式存在;在特定條件下才進行有性繁殖.生活史為:子囊孢子在合適的條件下出芽產生單倍體營養細胞;單倍體營養細胞不斷進行出芽生殖;兩個性別不同的營養細胞接合,在質配后發生核配形成二倍體營養細胞;二倍體營養細胞不進行核分裂而是不斷進行出芽生殖;在以碳酸鹽為唯一或主要碳源,同時又缺乏氮源支持的條件下,二倍體營養細胞營養細胞最易轉變為子囊,此時細胞核才進行減數分裂,并隨即形成4個子囊孢子;子囊經自然或人為破裂后釋放出子囊孢子.2, 舉例概述微生物在自然界物質循環中的重要作用,

4、展望利用有益微生物開發新生物質能源的應用前景.(99,02,06,07)答:自然界的物質循環可歸結為:A化學元素的有機質花或生物合成作用，B有機物質的無機質或或分解作用兩個對立過程。碳循環：綠色植物和無機營養型微生物利用光能和化學能將CO2和水還原為碳水化合物，與此同時，植物和無機營養型微生物也進行著分解作用，使有機物質重新轉化為CO2，水和無機物質并釋放儲存的能量，動物和有機營養型生物以植物和無機營養型微生物為食，同樣將合成的有機化合物分解為CO2，水和無機化合物。氮循環：大氣中的N2通過某些原核微生物的固氮作用合成為化合態氮；化合氮可進一步被植物和微生物的同化作用轉化為有機氮；有機氮經微生

5、物的氨化作用釋放出氨；氨在有氧條件經微生物的硝化作用氧化為硝酸；硝酸和亞硝酸又可在無氧條件下經微生物的反硝化作用，最終變成N2和N2O，返回至大氣中，如此構成氮素循環。硫循環：硫的氧化：還原態的無機硫化物被微生物氧化成硫酸；硫酸鹽還原：同化硫酸鹽還原即硫酸鹽被微生物還原成H2S后在胞內被結合到細胞組分中；反硫化作用即硫酸鹽作為末端電子被微生物還原成不被同化的H2S；硫化氫的釋放：生物尸體和殘留物中含硫蛋白質經微生物的作用釋放出H2S,CH3SH,(CH2)3S等含硫氣體。磷循環：有機磷轉化成溶解性的無機磷（有機磷礦化）；不溶性無機磷變成可溶性無機磷（磷的有效化）；溶解性無機磷變成有機磷（磷的同

6、化）。有益微生物的應用前景： 3，簡述并圖示遺傳工程的主要操作步驟。（02，05，07）答：遺傳工程也稱基因工程，實質上是一種DNA的人工體外重組技術。即根據人們的目標要求，用人工方法取得供體菌DNA上的目標基因，并加以改造，在體外重組于載體DNA上，再導入宿主細胞內，并使其轉錄，翻譯表達和復制，獲得供體基因的原生物學性狀，從而獲得大量的基因產物或使受體生物表現出新的表型性狀。主要操作步驟：目標基因的分離或合成；通過體外重組將基因插入載體；將重組DNA導入受體細胞；擴增克隆的基因；篩選重組體克隆；對克隆的基因進行鑒定或測序；控制外源基因的表達；得到基因產物或轉基因動物，植物。圖示如下： 圖 基

7、因工程基本操作過程示意圖4，簡述遺傳工程在生命科學研究中的應用及其前景。（00）答：在生產多肽類藥物，疫苗中的應用，如抗腫瘤，抗病毒功能的干擾素，白細胞介素，胰島素，生長激素，抗凝血因子等；基因治療：向靶細胞中引入具有正常功能的基因，以糾正或補償基因的缺陷，從而達到治療的目的；在改造傳統工業發酵菌種中的應用；動植物特性的基因工程改良，如轉基因動物，轉基因植物；培育能分解有毒物質的工程菌；推動了微生物學的發展。基因工程在食品，化工，環保，制藥，農業，醫學，冶煉，采礦，能源等眾多領域都有游人的開發前景，但是基因工程帶來巨大貢獻的同時也存在著隱患，如轉基因的生物是否會給人類帶來潛在的危害。5，以大腸

8、桿菌為例，簡述細菌基因重組的類型和特點。（01，04，05）答：能引起原核微生物基因重組的主要方式有轉化，轉導，接合和原生質體融合。轉化：是指受體菌接受供體菌的DNA片斷，經過交換將它組合到自己的基因組中，從而獲得了供體菌部分遺傳性狀的現象，轉化后的受體菌，稱為轉化子。其特點為：不需受體菌株和供體菌株的接觸；供體DNA不需要媒介的介導，處于感受態的受體菌直接吸收供體菌的DNA。轉導：是指以噬菌體為媒介，把供體細胞的DNA片斷攜帶到受體細胞中，從而使后者獲得前者部分遺傳性狀的現象。其特點為：不需受體菌株和供體菌株的直接接觸；供體DNA需要噬菌體的媒介作用。接合：是指通過供體菌和受體菌完整細胞間性

9、菌毛的直接接觸而傳遞大段DNA的過程。其特點為：需受體菌株和供體菌株的接觸；供體DNA通過接合管導入受體細胞。原生質體融合：是指通過人工方法，使遺傳性狀不同的兩個細胞的原生質體發生融合，并產生重組子的過程。其特點為：需受體菌株和供體菌株的直接接觸；需要通過化學因子誘導或電場誘導進行融合二親原生質體。6，簡述生物固氮作用及其反應所需要的條件（包括固氮酶，電子供體或載體以及能量）（99）答：大氣中的分子態氮（N2）在生物體內有固氮酶催化還原為NH3 的過程稱為生物固氮作用。生物界中只有原核生物才有固氮能力，生物固氮作用是僅次于光合作用的生物化學反應，它為整個生物圈中的一切生物的生存繁殖提供了不可或

10、缺和可持續供應的還原態氮化物的源泉。生物固氮的條件為：具有固氮活性的固氮酶：其組成有組分（鉬鐵蛋白），組分（鐵蛋白）和FeMo輔因子；必須有電子和質子供體，每還原分子N2需要個電子核個質子，為了傳遞電子和質子，還需要有相應的電子傳遞鏈；必須有能量供給，由于N2分子具有鍵能很高的三價鍵，打開它需要很大的能量；必須有嚴格的厭氧環境或保護固氮酶的免氧失活機制，因為固氮酶對氧具有高度敏感性，遇氧即失活；形成的氨必須及時轉運或轉化排除，否則會產生氨的反饋阻遏效益。7，簡述微生物之間相互作用類型與特點。（01，06）答：中性關系：兩個微生物種群之間沒影響或僅存無關緊要的相互作用,如空氣中的微生物，休眠的芽

11、孢等；偏利關系：一個種群因另一個種群的存在或生命活動而得利，而后者冒雨從前者受益或受害，如好氧微生物消耗環境中的分子氧，為厭氧微生物的生存和發展創造厭氧的環境條件；協同關系：兩個微生物種群之間相互受益并保持它們各自獨立性的松散關系，如纖維分解微生物和固氮細菌的餓共棲，纖維分解菌分解纖維產生的糖類可為固氮細菌提供碳源和能源，而固氮細菌固定的氮素可為纖維分解微生物提供氮源，互為有利而促進了纖維分解和氮素固定；互惠共生關系：協調作用發展成為專性的結合并具有共生的特殊形態結構和功能，如地衣是真菌和藍細菌的共生體，藍細菌固氮為真菌提供有機氮素營養，真菌利用菌絲吸收水分和礦質營養供給藍細菌生長的需要；寄生

12、關系：一種微生物寄生在另一種生物體上從后者取得養料，前者稱為寄生物，后者稱為寄主，在寄生關系中，寄生物對寄主一般是有害的，往往使寄主發生病害或者死亡，如噬菌體于細菌之間的關系；捕食關系：一種微生物種群被另一種微生物種群完全吞食，捕食者種群從被食者種群得到營養，而對被食者種群產生不利影響，如土壤中的原生動物和其他微生物之間的關系；競爭關系：兩個種群或多個種群共同依賴同一生長基質或者環境因素，結果一方或兩方的種群大小或生長率受到限制，競爭結構強者生存，弱者淘汰，如在同一生長環境中如果限制P的數量，兩種藻類星桿藻和小環藻在此環境中生活時，則小環藻被星桿藻取代；拮抗關系：一種微生物種群產生某種物質使另

13、一個微生物種群的生長受到抑制而本身不受影響，如乳酸菌產酸抑制其它微生物的生長。8，簡述微生物細胞的生長周期，并以大腸桿菌為例簡述細菌的生長曲線。（99，07）答：遲緩期：細菌接種到新鮮培養基而處于一個新的生長環境，因此在一段時間里并不馬上分裂，細菌數量維持恒定，或增加很少，群體的生長率近于0。在圖上，曲線平緩。特點為：生長速率常數為0；菌體體積增長較快；代謝活躍。對數期：以最大的速率生長和分裂，細菌生長旺盛，代謝活力強。分裂速度快，菌數以指數級數增加，代時穩定。細胞在形態、生理等方面較為一致。在圖上呈一條斜度很小的直線。穩定期：又稱恒定期或最高生長期。處于穩定期的微生物，新增殖的細胞數與老細胞

14、的死亡數幾乎相等，整個培養物中二者處于動態平衡，此時生長速度，又逐漸趨向零。穩定期的細胞內開始積累貯藏物，大多數芽孢細菌也在此階段形成芽孢。穩定生長期的活細菌數最高并維持恒定。開始時曲線上升緩慢，菌數達到最高水平后，曲線開始下降。衰亡期：營養物質耗盡和有毒代謝產物的大量積累，細菌死亡率逐漸增加，群體中活菌數目急劇下降，出現了“負生長”。這一階段的細胞，有的開始自溶，產生或釋放出一些產物，如氨基酸、轉化酶、外肽酶或抗生素等。菌體細胞也呈現多種形態，有時產生畸形，細胞大小懸殊，有的細胞內多液泡，革蘭氏染色反應的陽性菌變成陰性反應等。9,簡述顯微直接測數和稀釋平板測數法的原理及方法。（99，02，0

15、7）答：顯微直接測數法：原理：利用特定的細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數量。方法：計數板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積為1mm²和高度為0.1mm的計數室，在1mm²的面積里又被刻劃成25個（或16個）中格，每個中格進一步劃分成16個（或25個）小格，計數室都是由400個小格組成。將稀釋的樣品滴在計數板上，蓋上蓋玻片。然后在顯微鏡下計算4-5個中格中的細菌數，并求處每個小格所含細菌的平均數，再按下面公式求出每毫升樣品所含的細菌數。每毫升原液所含細菌數=每小格平均細菌數×400×1000×稀釋倍數稀釋平

16、板測數法：原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。方法：將待測樣品經一系列10倍稀釋，然后選擇3個稀釋度的菌液，分別去0.2mL放入無菌培養皿，再倒入適量的以溶化并冷至45度左右的培養基，與菌液混勻，冷卻，待凝固后，放入適宜溫度的培養箱或溫室培養，長處菌落后計數，按下面公式計算出原菌液的含菌數：每毫升原菌液活菌數=同一稀釋度3個以上重復培養皿菌落平均數×稀釋倍數×510，圖示并簡述烈性噬菌體的生活周期。（99）答：烈性噬菌體具體繁殖過程如下：吸附：噬菌體與敏感細菌隨機碰撞相遇，噬菌體的尾絲與敏感細菌特定的受體部位相互作用，并可逆性的吸附在細菌表

17、面，基板不可逆的吸附在細菌表面。侵入：噬菌體尾部的酶水解宿主細胞壁中的肽聚糖，使細胞壁產生一個小孔，然后尾鞘收縮，將核酸壓入細胞內。病毒大分子的合成：噬菌體核酸利用宿主的復制系統合成自身所需的核酸和蛋白質。裝配和釋放：將分別合成的核酸和蛋白質組裝成成熟的噬菌體，噬菌體在宿主細胞內完成裝配后，細胞裂解，子代噬菌體從宿主的胞內轉向胞外，繼而去侵染其他宿主細胞，如此循環。11，試述病毒的非增殖感染類型。（05）答：由于病毒或是細胞的原因，致使病毒的復制在病毒進行敏感細胞后的某一階段受阻，結果導致病毒感染的不完全循環，這類感染稱為病毒的非增殖性感染。非增殖性感染的類型為：流產感染：A依賴于細胞的流產感

18、染：細胞缺少某些參與病毒復制的酶，tRNA或病毒大分子合成所需的其他細胞蛋白等。B依賴于病毒的流產感染：由基因組不完整的缺損病毒引起，無論是感染允許細胞還是非允許細胞，都不能完成復制循環。限制性感染：這類感染因細胞的瞬時允許性產生，其結果或是病毒持續存在于受染細胞內不能復制，直到細胞成為允許性細胞，病毒才能繁殖；或是一個細胞群體中僅有少數細胞產生病毒子代。潛伏感染：在受染細胞內有病毒基因組持續存在，但并無感染性并行顆粒產生，而且受染細胞也不會被破壞。12，概述土壤微生物在發展持續農業中的作用。（00）答：利用微生物可以改善農業生產的生態環境；利用微生物防治作物病蟲害以減少污染環境的化學農藥和除

19、草劑的使用；利用微生物改善和提高土壤肥力以減少化學肥料的使用，生產綠色食品；利用微生物生產在環境中易受生物降解的塑料；利用微生物生產如氫氣，乙醇和沼氣等清潔能源；利用微生物生產對人類健康極為需要的如抗生素，生物調節劑，微生物多糖，酶抑制劑等藥物。13，簡述微生物修復DNA損傷的方式，作用機理及其與突變形成的關系。（04，05）？答：DNA損傷：是指任何不正常的DNA結構，包括基因突變，移碼突變和染色體畸變。微生物具有并研究較多的DNA損傷修復系統有光復活作用，切補修復，重組修復和SOS修復。光復活作用：是指光誘導后使損傷的DNA修復現象。細菌中存在一種光復活酶（PR酶），PR酶在黑暗中專一的識

20、別嘧啶二聚體，并與之結合，形成酶DNA復合物，當給予光照時，酶利用光能（PR酶本身無發色集團，與損傷的DNA結合后才能吸收光，起光解作用）將二聚體拆開，恢復原狀，酶再釋放出來。切除修復：又稱暗修復，該修復除了堿基錯誤配對和單核苷酸插入不能修復外，幾乎其他DNA損傷（包括嘧啶二聚體在內）均可修復，是細胞內的主要修復系統。包括一系列復雜的酶促DNA修補復制過程,主要有以下幾個階段：核酸內切酶識別DNA損傷部位，并在5端作一切口，再在外切酶的作用下從5端到3端方向切除損傷；然后在 DNA多聚酶的作用下以損傷處相對應的互補鏈為模板合成新的 DNA單鏈片斷以填補切除后留下的空隙；最后再在連接酶的作用下將

21、新合成的單鏈片斷與原有的單鏈以磷酸二酯鏈相接而完成修復過程。重組修復：是一種越過損傷而進行修復。這種修復不將損傷堿基除去，而是通過復制后，經染色體交換，使子鏈上的空隙部位不再面對著嘧啶二聚體，而是面對著正常的單鏈，在這種情況下，DNA聚合酶和連接酶便能起作用，把空隙部位進行修復。留在親鏈上的二聚體仍然要依靠再一次的切除修復加以除去，或經細胞分裂而稀釋掉。SOS修復：是在DNA分子受到較大范圍的重大損傷時誘導產生的一種應急反應。在大腸桿菌中,這種反應由recA-lexA系統調控。正常情況下處于不活動狀態。當有誘導信號如 DNA損傷或復制受阻形成暴露的單鏈時，recA蛋白的蛋白酶活力就會被激活，分

22、解阻遏物lexA蛋白,使SOS反應有關的基因去阻遏而先后開放,產生一系列細胞效應。引起SOS反應的信號消除后，recA蛋白的蛋白酶活力喪失，lexA蛋白又重新發揮阻遏作用。14，微生物在生物修復中有何意義。（03）？答：生物修復是微生物催化降解有機污染物，轉化其他污染物從而消除污染的一個受控或自發進行的過程。生物修復的基礎是發生在自然界中微生物對有機污染物的降解作用。生物修復的本質是生物降解，能否成功取決于生物降解速率，在生物修復中采取強化措施促進生物降解十分重要，這包括：接種微生物，目的是增加降解微生物數量，提高降解能力。添加微生物營養。提供電子受體。提供共代謝底物。提高生物可利用性。添加生

23、物降解促進劑。15，試述微生物在基因工程中的作用。（03）答：微生物的多樣性，尤其是抗高溫，抗高鹽，抗高堿，抗低溫，分解有毒物質和殺蟲等，為基因工程提供了及其豐富而獨特的基因資源。基因工程所用的克隆載體主要是由質粒，噬菌體和其他病毒DNA等改造而成的。基因工程所用的千余種工具酶絕大多數是從微生物中分離純化得到的。微生物細胞是基因克隆的宿主，即使是植物基因工程和動物基因工程也要先構建穿梭載體，使外源基因或重組體DNA在大腸桿菌中得到克隆并進行拼接和改造，才能再轉移到植物和動物細胞中。作為大規模表達各種基因產物，從事商業化生產的工程菌。為基因工程提高操作技術和理論指導。16，試述微生物生長的意義，

24、生長測定的方法和原理及影響微生物生長的主要因素。（04）答：意義：微生物的生長繁殖是其內外各種環境因素相互作用下的綜合反映，因此，生長繁殖情況就可作為研究各種生理，生化和遺傳等問題的重要指標；同時，微生物在生產實踐上的各種應用或是對致病，霉腐微生物的防治，也都與它們的生長繁殖和抑制緊密相關。所以有必要測定微生物的生長繁殖及其控制的規律。生長測定的方法有：計數法：直接或間接的測定樣品中所含細菌，孢子，酵母菌等單細胞微生物的數量，該方法能測定樣品中微量的菌數。重量法：根據每個細胞有一定的重量而設計的，它可以用于單細胞，多細胞以及絲狀體微生物生長的測定。包括干重法和濕重法。生理指標法：根據微生物的呼

25、吸強度，耗氧量，酶活性，生物熱等來測定微生物的數量。影響微生物生長的主要因素有：營養物質，水的活性，溫度，PH和O2。17，何為病毒？病毒的核酸有哪些類型和結構特征？以T4噬菌體為例簡述病毒的復制周期及特點。（給出T4噬菌體結構示意圖，注明個部分名稱）（99，04，06）？答：病毒：指超顯微的，沒有細胞結構的，專性活細胞內寄生的實體。一種病毒的毒粒只含有一中核酸，DNA或是RNA。病毒核酸的類型：單鏈DNA(ssDNA),雙鏈DNA(dsDNA),單鏈RNA(ssRNA)和雙鏈RNA(dsRNA)結構特征：線狀單鏈，環狀單鏈，線狀雙鏈，有單鏈裂口的線狀雙鏈，有交聯末端的線狀雙鏈，閉合環狀雙鏈，

26、不完全環狀雙鏈。病毒的復制周期及特點見10題18，簡述微生物營養類型及其特點。（00，04，05）答：光能無機自養型：能以CO2為唯一或主要碳源；進行光合作用獲取生長所需要的能量；以無機物如H2、H2S、S等作為供氫體或電子供體，使CO2還原為細胞物質； 主要有藍細菌，紫硫細菌，綠硫細菌和藻類等。光能有機異養型： 不能以CO2為主要或唯一的碳源；以有機物作為供氫體，利用光能將CO2還原為細胞物質；在生長時大多數需要外源的生長因子； 主要有紅螺菌科的細菌。化能無機自養型：生長所需要的能量來自無機物氧化過程中放出的化學能；以CO2或碳酸鹽作為唯一或主要碳源進行生長時，利用H2、H2S、Fe2+、N

27、H3或NO2-等無機物作為電子供體使CO2還原成細胞物質；主要有硝化細菌，硫化細菌，鐵細菌，氫細菌和硫磺細菌。化能有機異養型：生長所需要的能量均來自有機物氧化過程中放出的化學能； 生長所需要的碳源主要是一些有機化合物，有機物通常既是碳源也是能源 ；主要有絕大多數細菌和真核生物。19,簡述細菌芽孢的形成過程及其耐熱機制。（06）答：芽孢形成過程：軸絲形成：開始形成芽孢時，核物質變成致密的一條；橫膈膜的形成：左端細胞膜內陷形成隔膜，產生大小兩個細胞；前孢子的形成：大細胞向前生長，將小細胞包圍，形成一個具有雙層膜的前孢子；皮層形成：在前孢子的雙層膜之間信號出皮層，在皮層中有吡啶二羧酸（DAP）和Ca

28、²的吸收；孢子衣形成：前孢子外膜表面合成外孢子物質沉積在皮層外表面，發展成為一個連續的致密層；芽孢成熟：某些芽孢在此階段形成外孢子壁；芽孢釋放：孢子囊破裂，芽孢釋放出來。芽孢的耐熱機制：芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差；皮層的離子強度很高，從而使皮層產生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結果造成皮層的充分膨脹；核心部位的細胞質變得高度嗜睡，導致核心具有極強的耐熱性。20，簡述影響營養物質進入細胞的主要因素和微生物吸收營養物質的類型和特點。（01，02，05，06）答：影響營養物質進入細胞的主要因素：營養物質本身的性質；微生物所處的環境；微生物細胞的透過屏障。微生物吸收營養物質的

29、類型和特點：擴散（diffusion）:物質擴散的動力是物質在膜內外的濃度差；物質在擴散過程中不消耗能量；不需要膜上載體蛋白參加；簡單擴散不是微生物吸收營養物質的主要方式。促進擴散（facilitated diffusion）：運輸動力來自細胞膜內外的運輸物質的濃度差；需要載體，每種載體只運輸相應的物質，具有較高的專一性；不消耗能量，參與運輸的物質本身的分子結構不發生變化。主動運輸（active transport）：運輸過程需要載體，載體蛋白通過構象變化而改變與被運輸物質之間的親和力；需要消耗細胞的能量；可以逆濃度運輸；廣泛存在與微生物中的一種主要運輸方式。基團移位（group transl

30、ocation）：物質在運輸過程中發生化學變化，主要存在與厭氧型和兼性厭氧型細菌中。21，簡述細菌分類鑒定的常用方法。（05，06）答：常用分類方法有：以形態生理特征為主的傳統分類法（經典分類法）：主要運用形態特征和生理特征，在這些特征中又分主要特征和次要特征，一般形態特征為主要特征，最后用雙歧法排列出一個個分類群。以DNA為主的遺傳分類法：主要是從遺傳學角度評價微生物間的親緣關系，以GC含量和不同來源的DNA之間堿基順序的類似程度及同源性為依據，排列出一個個分類群。數值分類法：用數理統計方法來處理細菌的各種特征，求出相似值，以其相似性的大小決定細菌在分類學中的關系，并把透酶分為各個類群。化學

31、分類法22，舉例闡述微生物在自然界物質循環中和污染環境治理中的重要作用。（04）答：微生物作為物質循環中的重要成員除了參與生物地球化學循環外，很重要的就是降解和轉化環境中的污染物，完成生態系統的物質循環過程：生物降解：對物質（特別是環境污染物）的分解作用，是生態物質循環過程中的重要一環。重金屬轉化：微生物特別是細菌，真菌在重金屬的生物轉化中起重要作用，微生物直接和間接的作用也可以去除環境中的重金屬，有助于改善環境，如能將無機汞和有機汞轉化為單質汞的銅綠假單胞菌，金黃色葡萄球菌等。污染介質的微生物處理人類生產和生活活動的廢水，廢氣及固體廢棄物都可以用生物方法處理。環境污染的微生物監測：環境中的微

32、生物是環境污染的直接承擔者，環境狀況的任何變化都對微生物群落結構產生影響，因此可以用微生物指示環境污染，如大腸桿菌是最基本的糞便污染指示菌，最常用的水質指標之一。23，簡述從土壤中分離自生固氮菌純培養的操作步驟及方法。（01，04）答：分離自生固氮菌所用的培養基常為阿斯比無氮培養基。具體操作如下：富集培養：用已滅菌后冷卻至50oC左右的阿斯畢培養基倒成平板。用已滅菌的鑷子將黃豆粒大的土壤擺入已冷凝的平板培養基上。正面放置培養箱中培養，28oC培養34天后，在土粒周圍有混濁半透明的膠狀菌落出現，有的在后期會產生褐色的色素。劃線分離純化：用已溶化至50oC阿斯畢培養基倒入平板。用接種環挑取上述菌落

33、少許，在冷凝平板上進行劃線分離，而后置28oC培養4天。純化，鏡檢，得到純種培養：平板上出現單菌落，按無菌操作移入阿斯畢培養基斜面試管中，28oC培養4天。鏡檢：將斜面菌株進行涂片、染色、鏡檢。如是粗短桿狀或球狀的單一形態的菌體細胞較大，常呈單個或“8”字排列，在細胞表面有較厚的莢膜者，即為自生固氮菌。如有雜菌，需要進一步劃線純化。將得到純化菌株，移接到另一阿斯畢培養基斜面管，28oC培養34天，即獲得純培養菌，可冷凍保存，備用。微生物名詞解釋:1，（00，02，04，06）菌根：指一些真菌和植物根以互惠方式建立起來的共生體，可以促進磷，氮和其他礦物質的吸收，包括外生菌根和內生菌根。2，（00

34、，02，04，06）根際效應：生活在根圈中的微生物，在數量，種類和活性上都有明顯不同，表現出一定的特異性，這種現象稱為根際效應（根圈效應）。3，（99，02，04，06）Kock法則：證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則。4，（99，02，04，06）溶源性：感染細胞后噬菌體不能完成復制循環，噬菌體基因組長期存在于宿主細胞內，沒有子代噬菌體產生的現象。5，（04，06）基因文庫：是某種特定的生物所含有的能夠包含所以基因的足夠數目的克隆的集合。6，（04，06）營養缺陷型：一種缺乏合成其生存所必需的營養物的突變型，只有從環境或培養基中獲得這些營養或其前體物才能生長。7，（04，06）穩定

35、生長期：微生物通過對數生長期后，生長速度降低至零的時期，穩定期的微生物數量最大并維持穩定。8，(01,05,07)一步生長曲線：定量描述烈性噬菌體生長規律的曲線。9，（01，03，05）準性生殖：是一種類似于有性生長，但比有性生長更為原始的一種生殖方式，它可使同種生物的兩個不同菌株的體細胞發生融合，且不經過減數分裂的方式而導致低頻率基因重組并產生重組子。10，（04，05，07）抗生素：是某些生物合成或半合成的一類次級代謝產物或衍生物，它們上能抑制微生物生長或殺死微生物的化合物。11，（05，07）氨化作用：有機氮化合物轉化成氨（銨）的生化過程。12，（05，07）聚-羥丁酸：存在于某些細菌細

36、胞質內的顆粒狀的內含物，有許多羥基丁酸聚合而成，具貯藏能量，碳源和降低細胞滲透壓的作用。13，（01，07）古生菌：是一個在進化上很早就與真細菌和真核生物相互獨立的生物類群，主要包括一些獨特生態類型的原核生物。14，（04，06）同步生長：以同步培養方法使群體細胞能處于同一生長階段，并同時進行分裂的生長方式。15，（02，03，04）質壁空間：又稱質膜間隙或周質空間，指存在于細胞壁與細胞膜之間的空隙，在周質空間中存在著多種周質蛋白。16，（00，07）發酵：微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產物，同時釋放能量并產生各種不同的代謝產物。17，（99，00）基因重組：把兩個不同形狀個體內的遺傳基因轉移在一起