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文檔簡介
1、【精品文檔】如有侵權,請聯系網站刪除,僅供學習與交流微生物學總復習提綱.精品文檔.微生物學總復習提綱一、名詞解釋伴孢晶體:少數芽孢桿菌產生的糖蛋白昆蟲毒素。不同菌株產生的伴孢晶體,有不同對宿主制毒范圍。 L型細菌:指實驗室或宿主體內通過自發突變而形成的遺傳性穩定的細胞壁缺損菌株。 古生菌:又稱古菌,是一類在進化途徑上很早就與真細菌和真核生物相互獨立的生物類群。菌物界:指與動物界、植物界相并列的一大群無葉綠素、依靠細胞表面吸收有機養料、細胞壁一般含有幾丁質的真核微生物。一般包括真菌、黏菌、假菌三類。子實體 鎖狀聯合 二級菌絲 包涵體 溫和噬菌體:噬菌體在感染細胞后,將其核酸整合(插入)到宿主的核
2、DNA上,并可以隨宿主DNA的復制而進行同步復制,在一般情況下,不引起宿主細胞裂解的噬菌體。溶源菌:在核染色體組上整合有前噬菌體并能正常生長繁殖而不被裂解的微生物。 類病毒:只含有具有獨立侵染性的RNA組分 其他亞病毒因子:擬病毒:只含不具有獨立侵染性的RNA組分 朊病毒:只含單一蛋白質組分若只三空,此二者可不寫。 衛星病毒:與真病毒伴生的缺陷病毒 衛星RNA:只含與侵染無關的RNA組分生長因子:是一類對調節微生物正常代謝所必需,但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機物。基因移位:指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質運送方式,其特點是溶質在運送前后還會發生分子結構的變化,因此不
3、同于一般的主動運送。選擇性培養基:一類根據某微生物的特殊營養要求或對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能(用于菌種篩選等領域)。原理:取其所抗、投其所好鑒別性培養基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指 示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。次生代謝產物:指某些微生物生長到穩定期前后,以結構簡單、代謝途徑明確、產量較大的初生代謝物為前體,通過復雜的次生代謝途徑所合成的各種結構復雜的化合物。(其一般具有結構復雜、代謝途徑獨特、在生長后期合成、產量較低、生理功能不很明確、其合成一般收質粒控制等特點
4、) ED途徑 發酵:指在無氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產生的還原力H未經呼吸鏈傳遞而直接交某一內源性中間代謝物接受,以實現底物水平磷酸化產能的一類生物氧化反應。異型乳酸發酵 :(通過HMP途徑的發酵)凡葡萄糖經發酵后除主要產生乳酸外,還產生乙醇、乙酸和二氧化碳等多種產物的發酵,稱為異型乳酸發酵;與之相對應的是同型乳酸發酵,因它通過EMP途徑,并且只單純產生2分子乳酸,故稱“同型”。生物固氮 :指固氮微生物將大氣中的氮氣還原成氨的過程。 石碳酸系數(P.C.):指在一定時間內,被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達到同效的石炭酸的最高稀釋度之比。(P.C.值越大,說明殺菌效果越好) 同
5、步生長:指通過同步培養的手段而使細胞群體中各個個體處于分裂步調一致的生長狀態。連續培養:是指向培養容器中連續流加新鮮培養液,使微生物的液體培養物長期維持穩定、高速生長狀態的一種溢流培養技術,故又稱它為開放培養。具體地說,當微生物以單批培養的方式培養到指數期的后期時,一方面以一定速度連續流入新鮮培養基和通入無菌空氣(厭氧菌除外),并立即攪拌均勻;另一方面,利用溢流方式,以同樣的流速不斷地流出培養物。于是容器內的培養物就可達到動態平衡,其中的微生物可長期保持在指數期的平衡生長狀態和恒定的生長速率上,于是形成了連續生長。恒化器:設法使培養液的流速保持不變,并使微生物始終在低于其最高生長速率的條件下進
6、行繁殖的連續培養裝置。恒濁器:根據培養基內微生物的生長密度,并借光電控制系統來控制培養液流速,以取得菌體密度高、生長速度恒定的微生物細胞連續培養器。質粒:凡游離于原核生物核基因組以外,具有獨立復制能力的小型共價閉合環裝dsDNA分子。【質粒】:游離于原核生物基因組外,具有獨立復制能力的小型共價閉合環狀DNA分子。F質粒:又稱F因子,致育因子或性因子。是大腸桿菌等細菌決定性cccDNA,含有與質粒復制和轉移有關的許多基因,與質粒轉移和性菌毛合成有關。營養缺陷型:某一野生型菌株因發生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子、堿基或氨基酸等能力,因而不能再基本培養基上正常生長繁殖的變異類型。 26. 準
7、性生殖:一種類似于有性生殖但更為原始的生殖方式,是通過同一物種的兩個不同菌種的體細胞發生融合,不經過減數分裂而導致低頻率基因重組并產生重組子。過程:菌絲聯結;形成異核體;核融合;體細胞交換和單倍體化溶源轉變: Ames實驗 :光復活作用:把經UV照射后的微生物立即暴露于見光下時,就可出現明顯降低其死亡率的現象。經UV照射后代有嘧啶二聚體的DNA分子,在黑暗下會被一種光激活酶(光解酶)結合,當見光時,此復合物中的酶會因獲得光能而激活,并使二聚體重新分解成單體【互生】:兩種可以單獨生活的生物,當他們一起時,通過各自的代謝活動而有利于對方,或偏利于一方的生活方式,稱為互生。這是一種“可分可合,合比分
8、好”的相互關系。例子:微生物與植物的互生植物內生菌;人體腸道中正常菌群與人的互生;互生現象與發酵工業中的混菌培養【共生】:兩種生物共居在一起,相互分工合作、相依為命,甚至形成獨特結構、達到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關系。例子:微生物間的共生(藻類共生或菌菌共生的地衣)、微生物與植物間的共生(根瘤菌、菌根菌)、微生物與動物間的共生(微生物與昆蟲、瘤胃微生物與反芻動物的共生)【寄生】:兩種生物在一起生活,一方受益,另一方受害,后者給前者提供營養物質和居住場所,這種生物的關系稱為寄生。例子:微生物間的寄生(噬菌體、蛭弧菌)、微生物與植物間的寄生(病原菌)、微生物與動物間的寄生(病原菌)【
9、拮抗】:由某種生物所產生的某總代謝產物可一直他種生物的生長發育甚至殺死它們的關系。大腸菌群 類毒素 【抗原】:又稱免疫原。是一類能誘導機體發生免疫應答并能與相應抗體或T淋巴細胞受體發生特異性免疫的大分子物質。具備兩個特性:免疫原性(抗原性)、免疫反應性(反應原性)【完全抗原】:凡同時具有免疫原性和免疫反應性的抗原【半抗原】:即不完全抗原,凡缺乏免疫原性而有免疫反應性的抗原物質。 抗生素:一類由微生物或其他生物生命活動過程中合成的次生代謝產物或其人工衍生物,它們在很低濃度時就能抑制或干擾他種生物的生命活動,因而可用作優良的化學治療劑。干擾素:是高等動物細胞在病毒或dsRNA等干擾素誘生劑的刺激下
10、,所產生的一種具有高活性、廣譜抗病毒功能的特異性糖蛋白。能抑制病毒在細胞中的增殖,還具有免疫調節作用和對癌細胞的殺傷作用。BOD(BOD5): 即生物需氧量,是水中有機物含量的一個間接指標,指在1L污水或待測水樣中所含的一部分易氧化的有機物,當微生物對其氧化分解時,所消耗的水中溶解氧毫克數。【類病毒】:是一類只含有RNA一種成分、專性寄生在活細胞內的分子病原體。【擬病毒】:又稱類類病毒或殼內類病毒,是指一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒。【朊病毒】:又稱“普利昂”或蛋白侵染子,是一類不含核酸的傳染性蛋白質分子,因能引起宿主體內現成的同類蛋白質分子發生與其相似的感應性構象變化,從而使宿主致病。
11、【外毒素】:指在病原細菌生長過程中不斷向外界環境分泌的一類毒性蛋白質,有的屬于酶,有的屬于酶原,有的屬于毒蛋白。若用0.30.4%甲醇溶液對其進行脫毒處理,可以獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性的生物制品,即類毒素。將其注射機體后,可使機體產生對相應外毒素具有免疫性的卡尼(抗毒素)。【內毒素】:是G細菌細胞壁外層的組分之一,其化學成分是脂多糖(LPS)。因它在活細胞中不分泌到體外,僅在細菌死亡后自溶或人工裂解時才釋放,故稱內毒素。翻譯:枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis大腸桿菌 Escherichia coli金黃色葡萄球菌 Staphyloccocus aureus 肺炎鏈球菌
12、 Streptococcus pneumoniae灰色鏈霉菌 Streptomyces griseus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae)黃曲霉 Aspergillus flavus黑曲霉 Aspergillus nige2、 簡答題1. 試述革蘭氏染色的機制及其重要意義。革蘭氏染色的機制:與細菌細胞壁的化學組成及結構有關。G-細菌的細胞壁中脂類物質含量較高,肽聚糖含量較低。染色時乙醇溶解脂類物質,是細胞通透性增加,結晶紫碘的復合物易被抽出,于是被脫色。G+細菌由于細胞壁肽聚糖含量高,脂類含量低,乙醇處理使細胞壁脫水,肽聚糖層孔徑變小,通透性降低,結晶紫碘復合物被保留在
13、細胞內,細胞不易或不被脫色。意義:在與鑒別細菌,把眾多的細菌分為兩大類,G+和G-。2. 試比較革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌細胞壁構造及成分的差別。COPY:5.G、G+菌細胞壁結構和組成的異同:成分G+細菌G-細菌肽聚糖(真細菌特有)含量很高(一般為90%)含量很低(520%)磷壁酸(G+菌所特有)含量較高(<30%)0脂質(G菌所特有)一般無(<2%)含量較高(約20%)蛋白質0少量含量較高PDF中兩者細胞壁區別:G+:厚度大(20-80nm)化學組分簡單;層次簡單:只有一層;機械強度好,較堅韌G-:厚度較薄;成分較復雜,肽聚糖含量少;層次較多:肽聚糖層、磷脂層、脂多糖層;機械強
14、度差G-、G+菌兩者肽聚糖單體結構的主要區別:G細菌四肽尾的第3個氨基酸不是L-lys,而是被一種只有在原核微生物細胞壁上的特殊氨基酸內消旋二氨基庚二酸(m-DAP)所代替;G細菌沒有特殊的肽橋,其前后兩個單體間的連接僅通過甲四肽尾的第4個氨基酸(D-Ala)的羧基與乙四肽尾的第3個氨基酸(m-DAP)的氨基直接相連,因而只形成較為疏稀、機械強度較差的肽聚糖網套。3. 什么是烈性噬菌體?簡述其裂解性生活史。等等【烈性噬菌體】:噬菌體侵染細胞后,立即借助宿主細胞的代謝系統進行復制并形成子代,產生大量子代噬菌體并引起宿主細胞裂解。其生活史:吸附侵入核算復制噬菌體裝配(成熟)釋放吸附機理:病毒吸附蛋
15、白與細胞受體間的結合力來源于空間結構的互補性,相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范德華力。影響因素:噬菌體數量、陽離子、輔助因子、溫度。【一步生長曲線】 P76 定量描述烈性噬菌體生長規律的實驗曲線潛伏期:指噬菌體的核酸侵入宿主細胞后至第一個成熟噬菌體粒子釋放前的一段時間。又可分為:隱晦期和胞內累積期裂解期:在潛伏期后的宿主細胞迅速裂解、溶液中噬菌體粒子急劇增多的一段時間。平穩期:指感染后的宿主細胞已全部裂解,溶液中噬菌體效價達到最高點的時期。4. 試列表比較單純擴散、促進擴散、主動運送和基團移位四種不同的營養物質運輸方式。5. 什么叫鑒別性培養基?試以EMB培養基為例說明其原理。鑒別性培養
16、基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指 示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。以EMB(伊紅美藍乳糖培養基)培養基為例說明其原理?EMB培養基中的伊紅、美藍兩種苯胺染料可以抑制G+和一些難培養的G-細菌。在低酸度下,這兩種染料會結合并形成沉淀,起著產酸指示劑的作用,因此,試樣中多種腸道細菌會在EMB培養基平板上產生易于用肉眼識別的多種特征性菌落,尤其是大腸桿菌,因其能強烈分解乳糖而產生大量混合酸,菌體表面帶H+,故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅和美藍結合,故使菌落染上深紫色,且從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光,其他幾種產酸力弱
17、的腸道菌的菌落也有相應的棕色。6. 單細胞微生物的典型生長曲線可分為幾期?各期的主要特點是什么?(示意圖P154-156)可分為延滯期、指數期、穩定期、衰亡期延滯期:生長速率常數=0; 胞形態變大或增大; 細胞內RNA特別是rRNA含量增高,原生質嗜堿性 增強; 合成代謝活躍(核糖體、酶類、ATP合成加快); 易產生誘導酶; 對外界不良條件敏感(如NaCl濃度、溫度、抗生素等化學藥物);指數期:生長速率常數R最大,即代時或原生質增加一倍所需的倍增時間最短; 細胞進行平衡生長,菌體大小、形態、生理特征等比較一致; 酶系活躍,代謝最旺盛; 細胞對理化因素較敏感;穩定期:新增殖的細胞數與細胞的死亡數
18、幾乎相等,其生長速率等于0,培養物中的細胞數達到最高值; 細胞分裂速度下降,開始積累內含物,產芽孢的細菌開始產芽孢; 微生物開始合成次生代謝產物,對于發酵生產來說,一般在穩定期的后期產物積累達最高峰, 是最佳收獲時期;衰亡期:細胞死亡數增加,死亡數大大超過新增殖的細胞數,群體中活菌數目急劇下降,出現“負生長”; 細胞內顆粒更明顯,細胞出現多形態、畸形或衰退形,芽孢開始釋放; 因菌體本身產生的酶及代謝產物的作用,使菌體死亡、自溶等,發生自溶的菌生長曲線表現為向下跌落的趨勢。7. 影響單細胞微生物典型生長曲線延滯期的因素有哪些?在生產實踐中如何縮短延滯期?影響延滯期的因素:菌種:繁殖速度較快的菌種
19、的延滯期一般較短;接種物菌齡:用指數生長期的菌種接種時,其延滯期較短,甚至檢查不到延滯期;接種量:一般性,接種量增大可縮短甚至消除延滯期(發酵工業上一般采用1/10的接種量)。方法:增加接種量:群體優勢適應性增強; 采用指數生長期的健壯菌種; 調整培養基的成分,在種子基中加入發酵培養基的某些成分; 選用繁殖快的菌種;在食品工業上,盡量在此期進行消毒或滅菌。8. 在微生物培養過程中,引起pH值改變的原因有哪些?在實踐中如何保證微生物能處于較穩定和合適的pH環境中?微生物的生命活動過程會能動地改變外界環境的pH;糖類發酵氧化;脂肪水解;蛋白質脫羧;銨根離子選擇吸收;硝基離子選擇吸收;培養基的組分。
20、治標:過酸時,加NaOH、碳酸鈉等堿液中和;過堿時,加硫酸、鹽酸等酸液中和;治本:過酸時,加適當氮源(尿素、硝酸鈉或蛋白質)提高通氣量; 過堿時,加適當碳源(糖、乳酸、醋酸、檸檬酸或油脂等),降低通氣量。9. 高溫滅菌的方法有哪些?簡要說明其操作條件和適用對象。干熱滅菌效果低于濕熱滅菌1)火焰灼燒法操作條件:將被滅菌物品在火焰中灼燒,使所有的生物質碳化。(簡單、徹底,但對被滅菌物品的破壞很大)。適用對象:無經濟價值的物品及不怕燒的實驗器具2)烘箱內熱空氣滅菌條件:將物品放入烘箱內,然后升溫至150170,維持12h。對象:玻璃、陶瓷和金屬物品的滅菌,不適合液體樣品及棉花、紙張、纖維和橡膠類物質
21、的滅菌。3) 巴氏消毒法條件:6080處理30min至15s,低溫維持法是維持30min,如牛奶6330min,高溫瞬法牛奶7215s對象:牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進行高溫滅菌的液態風味食品或調料的低溫消毒方法。4) 煮沸消毒法條件:100煮沸數分鐘 對象:飲用水5)間歇滅菌法條件:將待滅菌的培養基放在80100下蒸煮1560min,后放至室溫或37下保溫過夜,連續3天重復上述操作。對象:不耐熱培養基的滅菌6)常規加壓滅菌法條件:溫度達121(壓力為1kg/cm2),1520min,有時可用較低溫度115(壓力0.7kg/cm2),35min。對象:一切微生物實驗室、醫療保健機構或發酵工廠
22、中對培養基及多種器材或物料的滅菌。7)連續加壓滅菌法條件:培養基一般加熱至135140,515s。 對象:大型發酵廠的大批培養基滅菌。8)高壓蒸汽滅菌法條件:121,1520min;112,2030min;115,2030min對象:耐高溫物品、玻璃儀器、含水或不含水的物品。10. 什么叫基因重組?簡述原核微生物和真核微生物基因重組的主要形式。基因重組:把兩個不同性狀個體內的遺傳基因轉移到一起,經過遺傳分子間的重新組合,形成新遺傳型個體的方式。真核生物重組主要形式:有性雜交、準性雜交原核生物重組重要形式:轉化、轉導、接合、原生質體融合原核生物的基因重組形式很多,機制較原始,特點:片段性,僅一小
23、段DNA序列參與重組;單向性,即從供體菌向受體菌作單方向轉移;多樣性,即轉移機制獨特而多樣,如接合、轉化和轉導。11. 簡述營養缺陷型菌株篩選的主要步驟和方法。主要步驟:誘變處理、淘汰野生型、檢出和鑒定營養缺陷型四個環節在淘汰野生型中方法:抗生素法、菌絲過濾法;在檢出缺陷型中方法:夾層培養法、限量補充培養法、逐個檢出法和影印平板法;在鑒定缺陷型中:生長譜法。12. 簡述誘變育種中應堅持的基本原則。選擇簡便有效的誘變劑(艾姆斯試驗P210);挑選出優良的出發菌株;處理單細胞或擔孢子懸液;選用最適的誘變劑量;充分利用符合處理的協同效應;利用和創造形態。生理與產量間的相關指標;設計高效篩選方案;創造
24、新型、高效篩選方法。13. 何謂菌種復壯?簡述菌種復壯的方法。狹義的復狀:在菌種已發生衰退的情況下,通過純種分離和生產性能測定等方法,從衰退的群體中找出未衰退的個體,以達到恢復該菌原有典型性狀的措施廣義的復狀:在菌種的生產性能未衰退齊前就有意識的經常進行純種的分離和生產性能測定工作,以期菌種的生產性能逐步提高。實際上是利用自發突變(正變)不斷地從生產中選中。方法:純種分離:平板劃線、涂布、傾注、單細胞挑取法通過寄主體內生長進行復狀淘汰已衰退的個體:采用比較激烈的理化條件進行處理,以殺死生命力較差的已衰退個體采用有效的菌種保藏方法。14. 什么是菌種的衰退?菌種衰退的主要原因是什么?如何防止菌種
25、的衰退?衰退:指某純種微生物群體中的個別個體由于發生自發突變的結果,從而使該物種原有的一系列生物學性狀發生衰退性的量變或質變的現象。主要原因:基因的自發突變。是一個從量變到質變的過程。防止:控制傳代次數、創造良好的培養條件、利用不易衰退的細胞傳代、采用有效的菌種保藏方法15. 簡述5種微生物菌種保藏常用的方法。低溫保藏法;石蠟油低溫保藏法;干燥保藏法;真空冷凍干燥法;液氮超低溫保藏法16. 簡述微生物與生物環境間五種常見的相互關系,并各舉一例。既利甲又利乙():共生、互利共棲、互養共棲和協同共棲等利甲而損乙():寄生、捕食、拮抗利甲而不損乙(0):偏利共棲、互生不損甲而利乙(0):同既不損甲乙,有不利甲乙(0 0):中性共棲不利甲而損乙(0):偏害共棲損甲而利乙():同損甲而不利乙(0):同損甲乙():
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