1、藥 理 學 綜 合 設 計 性 實 驗各位領導與老師: 根據藥理學的實驗特點及現有的實驗條件，初步擬定了個具有可行性的綜合設計性實驗，開設對象主要為護理本科生，也適用于專科生。但具體開設的內容還需各位領導與老師的商榷。 由于實驗項目比較復雜，每次實驗所需課時均比較多，且單一教師輔導困難比較大，至少需要雙教師輔導（比如采血、插管、實驗準備等），請各位領導與老師理解。課程設計：王 鵬基 礎 教 研 室2005年1月9日實驗一 氯丙嗪的降溫作用（設計性實驗，4學時）實驗簡介：本實驗使學生掌握實驗設計的基礎理論和方法（包括動物選擇、實驗分組、對照原則、處理因素的標準化等多方面知識），并通過觀察氯丙嗪的

2、降溫作用，掌握其降溫特點，聯系臨床應用。實驗輔導：至少雙人輔導【實驗目的】掌握實驗設計的基礎理論，通過觀察氯丙嗪的降溫作用，掌握其降溫特點，聯系臨床應用。【實驗器材】小鼠、注射器、體溫計、冰箱、氯丙嗪等。【實驗過程】一、首先介紹實驗設計的基礎理論（一）實驗設計是科學研究計劃中關于研究方法與步驟的一項內容，是實驗研究所涉及的各項基本問題的合理安排。嚴密合理的實驗設計是順利進行研究工作的保證，同時也能最大限度地減少實驗誤差以獲得精確可靠的實驗結論，甚至可以使研究工作事半功倍。藥理學實驗設計的三大要素，即處理因素、實驗對象與實驗效應。1.處理因素(1)處理因素 實驗中根據研究目的確定的由實驗者人為施

3、加給受試對象的因素稱為處理因素，如藥物、某種手術等。一次實驗涉及的因素不宜過多，否則會使分組增多，受試對象的例數增多，在實際工作中難以控制。但處理因素過少，又難以提高實驗的廣度和深度。(2)明確非處理因素：非處理因素雖然不是我們的研究因素，但其中有些因素可能會影響實驗結果，產生混雜效應，所以這些非處理因素又稱混雜因素。設計時明確了這些非處理因素，才能設法消除它們的干擾作用。(3)處理因素的標準化：處理因素在整個實驗過程中應做到標準化，即保持不變，否則會影響實驗結果的評價。如實驗設計中處理因素是藥物時，則藥物的劑型、給藥途徑、質量(成分、出廠批號等)必須保持不變。2.實驗對象實驗對象的選擇十分重

4、要，對實驗結果有著極為重要的影響。藥理學實驗主要實驗對象包括整體動物(正常動物、麻醉動物和病理模型)、離體器官、組織及細胞等。3.實驗效應實驗效應是指受試對象在處理因素作用后呈現的反應或受到的影響，其具體表現形式是指標。這些指標包括計數指標(或定性指標)和計量指標(或定量指標)等。指標的選定需符合特異性、客觀性、重復性、靈敏性、精確性、可行性等原則。 (二)藥理學實驗設計的基本原則為了提高研究效率，控制誤差和偏倚，藥理學實驗設計同其它科學研究一樣必須遵循三大基本原則，即對照、隨機和重復原則。1.對照原則對照是比較的前提。在生物學實驗中存在許多影響因素，為消除無關因素對實驗結果的影響，實驗中必須

5、設立對照組。對照應符合齊同可比的原則，除處理因素不同外，其他非處理因素盡量保持相同，從而使實驗誤差盡可能縮小。如實驗動物要求種屬、性別、年齡相同，體重相近；實驗的季節、時間和實驗室的溫度、濕度也要一致；操作的手法前后要相同等。根據實驗研究的目的和要求不同，可選用不同的對照形式，常用的對照形式有：空白對照(正常對照)、實驗對照(陰性對照)、標準對照(陽性對照)、自身對照、相互對照(組間對照)等。2.隨機原則即所研究總體中的每一個研究對象都有同等的機會被分配到各組中去，隨機的目的是將樣本的生物差異平均分配到各組。實驗中凡可能影響結果的一切非研究因素都應隨機化處理，使各組樣本的條件盡量一致，消除或減

6、小組間人為的誤差，從而使處理因素產生的效應更加客觀，實驗結果更為可靠。3.重復原則重復是指實驗中受試對象的例數或實驗次數要達到一定的數量，它包含有兩方面的意思：即重復性和重現性。若樣本量過少，可能把個別現象誤認為普遍現象，把偶然或巧合事件當作必然規律，其結論的可靠性差。如樣本過多，不僅增加工作難度，而且造成不必要的人力、財力和物力的浪費。所以，在進行實驗設計時要對樣本大小作出科學的估計，以滿足統計處理的要求二、氯丙嗪的降溫作用設計部分：每臺面4只小鼠，體溫計1只，A、B兩種藥水（分別為氯丙嗪和生理鹽水）由同學們自己設計實驗分組、實驗步驟，通過實驗結果來判斷A、B藥水各對應的藥品并總結實驗所用原

7、理，并掌握氯丙嗪的降溫特點。三、臨床護理聯系：氯丙嗪與阿司匹林在解熱方面的異同，聯系兩藥在臨床上的不同應用。【實驗報告要點】編號體重給藥前肛溫藥物劑量低溫30min給藥后肛溫1234實驗二 利尿藥的利尿作用（綜合性實驗，4學時）實驗簡介：本實驗綜合了藥理學、外科學（固定、備皮、消毒、手術等）、護理學（靜脈注射法）及臨床病例分析等多學科多方面的知識實驗輔導：至少雙人輔導【實驗目的】初步掌握外科手術和外科結的操作，觀察呋喃苯胺酸的利尿作用，并通過病例分析，聯系其臨床應用。【實驗器材】白兔、注射器、導尿管、解剖臺、剪刀、呋喃苯胺酸【實驗方法】1 外科基本操作：兔背位固定，耳靜脈麻醉后，備皮，局部消毒

8、后，剪開腹部皮膚和肌肉，找到膀胱，將膀胱剪一小口，插入導尿管，用線將膀胱與導尿管結扎在一起（外科結結扎），將原有尿液棄去后，收集尿液10min，記錄體積。2 經兔耳靜脈注射呋喃苯胺酸1ml，連續收集尿液3次，每次10min，記錄體積，分析結果。觀察呋喃苯胺酸的利尿效果。3病例分析：a、急性水腫患者的搶救及護理。 b、高血壓患者或慢性心功能不全患者的搶救、治療與護理。 C、急性藥物中毒患者的搶救及護理。【實驗報告要點】給藥前尿液體積給藥后尿液體積10min10min10min10min實驗三 磺胺嘧啶半衰期的測定（綜合性實驗，4學時）【實驗簡介】本實驗綜合了基礎藥理學、臨床藥理學、計算機、分析化

9、學、護理學等多方面的知識，為學生今后參與臨床藥物監測（TDM）打下基礎。【實驗輔導】至少雙人輔導【實驗目的】通過磺胺嘧啶鈉(SD-Na)血濃測定實驗，掌握臨床藥理藥物動力學方面的一些基本操作方法，了解藥物時量關系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數，并為臨床藥物監測（TDM）打下基礎。【實驗器材】白兔、注射器、試管、移液管、721分光光度計、肝素、0.5%亞硝酸鈉、20三氯醋酸、0.5%麝香草酚【實驗原理】磺胺嘧啶鈉在酸性環境下其苯環上的氨基(NH2)離子化生成銨類化合物(NH3+)，與亞硝酸鈉發生重氮化反應生成重氮鹽，該化合物在525 nm波長下比色，其光密度與藥物濃度成正比。 【實驗

10、方法】1、取兔1只，靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對側耳緣靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并準確計時。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側)取血0.5 ml。耳緣靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對側耳靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并準確計時。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側)取血0.5 ml。將血0.2 ml與20三氯醋酸2 ml、蒸餾水3.8 ml混勻后，2500轉/分離心10 min。取上清3.0 ml，

11、先加0.5%亞硝酸鈉1.0 ml，再加0.5%麝香草酚2.0 ml，混勻，于721分光光度計525 nm波長處測定光密度值(OD525)，將光密度值代入標準曲線方程計算SD-Na血藥濃度(mg/ml)。各樣本OD值代入標準曲線回歸方程求得值為SD-Na含量(mg)，除以血體積0.1 ml，即得SD-Na血藥濃度(mg/ml)。2. 藥時曲線及藥代動力學參數的計算：(1) 消除速率常數：K (min-1)= 2.303 B(2) 血漿半衰期：t1/2 (min) = 0.693/K(3) 初始濃度：C0 (mg/ml) = lg-1A(4) 表觀分布容積：Vd (ml/kg) = D0/C0 (

12、D0為給藥劑量) 3.臨床護理聯系：了解決定藥物給藥間隔的主要因素，保證臨床用藥的安全有效。了解藥物時量關系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數。實驗四 普魯卡因的LD50測定（綜合性實驗，4學時）【實驗簡介】本實驗綜合了實驗設計、統計學、計算機應用、藥理學及毒理學等多方面的知識，為以后學生論文寫作和設計打下基礎。【實驗輔導】至少雙人輔導【實驗目的】 通過實驗，學習測定藥物LD50的方法、步驟和計算方法，了解急性毒性試驗的常規方法。【實驗器材】 小鼠、注射器、普魯卡因溶液等。【實驗方法】 1、預試驗 取小鼠810只，以2只為一組分成45組，選擇組距較大的一系列劑量，分別按組腹腔注射普魯卡

13、因溶液，觀察出現的癥狀并記錄死亡數，找出引起0%死亡率和100死亡率劑量的所在范圍（至少應找出引起20%80%死亡率）。（參考劑量：LD100為250mg/kg, LD 0為 164mg/kg）。 2、正式試驗 在預初驗所獲得的0%和100%致死量的范圍內，選用幾個劑量（一般選45個劑量），每組10只小鼠，動物的體重和性別要均勻分配，完成動物分組和劑量計算后按腹腔注射給藥。3、LD50測定中應觀察紀錄的項目 實驗要素：實驗題目，實驗日期，藥物的批號，動物品系，來源，性別，體重，給藥方式及劑量、給藥時間等。 給藥后各種反應：潛伏期，中毒現象，開始出現死亡的時間，末只死亡的時間，死前的現象，各組死亡的只數等。 尸解及病理切片：對死亡的小鼠及時進行尸解，觀察內臟的變化（心、肝、脾、肺、腎），記錄病變情況。若肉眼可見變化時則需進行病理檢查。觀察結束時對全部存活動物稱體重，尸解，同樣觀察內臟病變與中毒死亡鼠比較。當發現有病變時同樣進行病理檢查，以比較中毒后病理變化及恢復情況。【實驗結果