1、抗生素類藥物質量分析新進展一一 內酰胺類藥物內酰胺類藥物 二二 大環內酯類藥物大環內酯類藥物 3 3四環素類藥物四環素類藥物 4其他類藥物其他類藥物一 內酰胺類藥物內酰胺類藥物 w 柱切換柱切換HPLCHPLC技術技術 w 近紅外反射光譜分析技術近紅外反射光譜分析技術w 毛細管區帶電泳技術毛細管區帶電泳技術 w 流動注射化學發光法流動注射化學發光法 柱切換柱切換HPLCHPLC技術技術基本原理：基本原理： 首先在預柱上實現生物體液中干擾首先在預柱上實現生物體液中干擾大分子與待測藥物的分離，然后用柱大分子與待測藥物的分離，然后用柱切換將待測藥物從預柱轉移至分析柱切換將待測藥物從預柱轉移至分析柱上

2、完成色譜分析。上完成色譜分析。 柱切換柱切換HPLCHPLC技術技術優點：優點： 柱切換柱切換HPLCHPLC具有樣品制備和測定具有樣品制備和測定雙重功能，全過程在密閉的條件下進雙重功能，全過程在密閉的條件下進行，有利于不穩定的藥物分析，而它行，有利于不穩定的藥物分析，而它的富集作用提高了靈敏度的富集作用提高了靈敏度 近紅外反射光譜分析技術基本原理基本原理: : 利用漫反射近紅外光譜結合統計利用漫反射近紅外光譜結合統計分析技術建立物質組分的定標模型，分析技術建立物質組分的定標模型，再根據待測樣品的光譜特征，利用相再根據待測樣品的光譜特征，利用相應的定標模型實現樣品定量。應的定標模型實現樣品定量

3、。 近紅外反射光譜分析技術近紅外反射光譜分析技術優點優點: : 樣品可以是經過處理的，也可以是樣品可以是經過處理的，也可以是未處理原狀樣未處理原狀樣, ,分析速度快，可實現分析速度快，可實現在線或實時分析在線或實時分析, ,同時能分析多種組同時能分析多種組分分, ,被稱之為被稱之為“巨人巨人”分析法分析法 毛細管區帶電泳技術毛細管區帶電泳技術基本原理基本原理: : 是高效毛細管電泳的其中一種，是基于是高效毛細管電泳的其中一種，是基于帶電的溶質在電場中遷核行為的差異而進帶電的溶質在電場中遷核行為的差異而進行分離分折的方法行分離分折的方法, ,電泳條件為：電壓：電泳條件為：電壓：1616kvkv，

4、pH 7.98pH 7.98以及緩沖液濃度以及緩沖液濃度25m mol/L25m mol/L為條件進行測定。為條件進行測定。 毛細管區帶電泳技術毛細管區帶電泳技術優點優點: : 快速、簡便、低耗、抗污染及抗干擾能快速、簡便、低耗、抗污染及抗干擾能力強力強. .同時同時CECE的方法已被稱為的方法已被稱為20002000年版中年版中國藥典收載，成為藥物分析的法定方法，國藥典收載，成為藥物分析的法定方法，因此因此CZECZE在藥品的質量控制中將得到更為在藥品的質量控制中將得到更為廣泛的應用廣泛的應用. .流動注射化學發光法流動注射化學發光法基本原理基本原理: : 頭孢氨芐抗生素對魯米諾高錳酸鉀化頭

5、孢氨芐抗生素對魯米諾高錳酸鉀化學發光反應有很強的增敏作用，魯米諾學發光反應有很強的增敏作用，魯米諾- -高錳酸鉀溶液和藥物混合后流入光度測量高錳酸鉀溶液和藥物混合后流入光度測量儀，繪制發光曲線，記錄發光響應信號，儀，繪制發光曲線，記錄發光響應信號，以峰高進行定量。以峰高進行定量。 流動注射化學發光法流動注射化學發光法二二 大環內酯類藥物大環內酯類藥物中國藥典中國藥典20002000年版方法年版方法: :w 效價測定效價測定: :采用微生物檢定法采用微生物檢定法w 有關物質檢查有關物質檢查:TLC:TLC法法 二二 大環內酯類藥物大環內酯類藥物快速快速HPLCHPLC分析法分析法 : : 一般采

6、用短粗尺寸色譜柱來提高洗脫速度一般采用短粗尺寸色譜柱來提高洗脫速度. . 快速快速AlltimaAlltima C C1818柱柱(33mm(33mm7mm,3um7mm,3um或或53mm53mm7mm,3um),7mm,3um),而常規而常規AlltimaAlltima C C1818柱柱（250250mmmm4.6mm,5um4.6mm,5um） 二二 大環內酯類藥物大環內酯類藥物快速快速HPLCHPLC分析法優點分析法優點: : 與常規色譜系統相比較與常規色譜系統相比較, , 快速分析柱具快速分析柱具有分析時間短，最低檢測限與最低定量限有分析時間短，最低檢測限與最低定量限更低等優點。其

7、柱效雖然較常規色譜柱低，更低等優點。其柱效雖然較常規色譜柱低，但仍可滿足藥物及其雜質的分離要求但仍可滿足藥物及其雜質的分離要求, ,且且較常規色譜柱對雜質具有高的靈敏度較常規色譜柱對雜質具有高的靈敏度, ,并并可極大地節約分析時間可極大地節約分析時間. .三三 四環素類藥物四環素類藥物w電分析化學方法電分析化學方法w光纖傳感器測定法光纖傳感器測定法w光譜法光譜法 電分析化學方法電分析化學方法w 極譜脈沖法測定四環素含量極譜脈沖法測定四環素含量 : : 四環素為四并苯衍生物，分子中含有酮基四環素為四并苯衍生物，分子中含有酮基和烯醇的共扼雙鍵系統，因此可在電極上和烯醇的共扼雙鍵系統，因此可在電極上

8、發生極譜還原。發生極譜還原。 電分析化學方法電分析化學方法w 離子選擇電極法測定四環素含量離子選擇電極法測定四環素含量: 由于四環素分子中含有二甲胺基，易溶由于四環素分子中含有二甲胺基，易溶于鹽酸生成溶解度較大的鹽酸四環素，其于鹽酸生成溶解度較大的鹽酸四環素，其二甲銨陽離子易與陰離子載體離子形成締二甲銨陽離子易與陰離子載體離子形成締合物沉淀，因此可制成聚氯乙烯合物沉淀，因此可制成聚氯乙烯(PVC)(PVC)膜膜電極。電極。 光纖傳感器測定法光纖傳感器測定法基本原理基本原理: : 四環素對四環素對PAMB(PAMB(蒽甲基酯共聚物蒽甲基酯共聚物) )膜熒光有強膜熒光有強烈淬滅作用烈淬滅作用, ,

9、將附著敏感膜的石英玻片裝入微將附著敏感膜的石英玻片裝入微型流通池中型流通池中, ,流通池與熒光分光光度計連接，流通池與熒光分光光度計連接，微量泵以一定的速度將樣品輸人流通池微量泵以一定的速度將樣品輸人流通池, ,記錄記錄膜與樣品溶液達到平衡時的熒光強度，膜與樣品溶液達到平衡時的熒光強度， 光纖傳感器測定法優點優點: : 此傳感器靈敏度高，響應迅速，同時具此傳感器靈敏度高，響應迅速，同時具有較好的選擇性，常見藥物及堿金屬、堿有較好的選擇性，常見藥物及堿金屬、堿土金屬離子對四環素的測定不產生干擾，土金屬離子對四環素的測定不產生干擾，已成功應用于四環素藥物樣品的測定。已成功應用于四環素藥物樣品的測定

10、。 光譜法w 流動注射化學發光法流動注射化學發光法: : 在堿性介質下，四環素對在堿性介質下，四環素對LuminolLuminolKmnOKmnO4 4化學發光體系具有強烈的抑制作用，化學發光體系具有強烈的抑制作用，因此可以結合流動注射技術因此可以結合流動注射技術, ,用于四環素用于四環素的含量測定的含量測定, ,與與內酰胺類藥物恰好相內酰胺類藥物恰好相反反. . 光譜法w 釷與四環素類抗生素的顯色分析釷與四環素類抗生素的顯色分析 在在PH7.2PH7.2的緩沖溶液存在下的緩沖溶液存在下, ,四環素類藥四環素類藥物與釷物與釷(1V)(1V)形成配合物后形成配合物后, ,可發生紅移可發生紅移,

11、,因因此能可見分光光度計測量此能可見分光光度計測量 發酵液中林可霉素含量測定發酵液中林可霉素含量測定 林可霉素與林可霉素與PdClPdCl2 2在酸性條件下可以形成有色的在酸性條件下可以形成有色的絡合物，而發酵液中其他組分不與絡合物，而發酵液中其他組分不與PdClPdCl2 2形成絡合物形成絡合物, ,有色的絡合物隨林可霉素的濃度增大顏色加深有色的絡合物隨林可霉素的濃度增大顏色加深, ,但但是發酵液中色素在紫外及可見光范圍內均有吸收，是發酵液中色素在紫外及可見光范圍內均有吸收，利用利用Y Y參比法可以有效的排除發酵液中其他組分參比法可以有效的排除發酵液中其他組分對林可霉素濃度測定的干擾。對林可

12、霉素濃度測定的干擾。發酵液中林可霉素含量測定發酵液中林可霉素含量測定Y Y參比法原理：參比法原理： 林可霉素林可霉素PdClPdCl2 2絡合物作為絡合物作為X X組分，將除林組分，將除林可霉素可霉素PdClPdCl2 2配合物以外的發酵液作為配合物以外的發酵液作為Y Y組分。組分。分別在分別在376nm376nm和和380nm380nm兩波長下進行測定。兩波長下進行測定。 高分子雜質檢查高分子雜質檢查 抗生素所致的速發型過敏反應主要和藥抗生素所致的速發型過敏反應主要和藥物中存在的高分子雜質有關，抗生素中高物中存在的高分子雜質有關，抗生素中高分子雜質的分離分析方法主要是色譜法。分子雜質的分離分析方法主要是色譜法。分離模式有凝膠過濾色譜法、離子交換色分離模式有凝膠過濾色譜法、離子交換色譜法、反相色譜法、譜法、反相色譜法、 毛細管電泳法和薄毛細管電泳法和薄層色譜法，其中以凝膠過濾色譜法占主要。層色譜法，其中以凝膠過濾色譜法占主要。 高分子雜質檢查高分子雜質檢查凝膠過濾色譜法凝膠過濾色譜法: :