1、利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀利用核磁共振波譜研究慢性心衰利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生理機制心氣虛證心肌能量代謝的病生理機制林 謙 李巖第二屆全國中西醫(yī)結合心血管病中青年論壇第二屆全國中西醫(yī)結合心血管病中青年論壇第二屆黃河心血管病防治論壇第二屆黃河心血管病防治論壇國家自然基金項目國家自然基金項目(No.30772693)利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021立 題 依 據(jù)研究內容、目標實 驗 結 果討論與結論內容概述內容概述利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021

2、動力泵、高耗能能量不足引起的能量超負荷性心肌病心臟特點心力衰竭CHF實質能量產(chǎn)生不足、消耗增加立項依據(jù)立項依據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學對現(xiàn)代醫(yī)學對CHF和心肌能量的認識和心肌能量的認識利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021立項依據(jù)立項依據(jù)1 12 23 34 4“氣氣”能量能量相似性相似性心氣虛心氣虛CHFCHF基本病機基本病機中醫(yī)治療中醫(yī)治療CHFCHF特色優(yōu)勢特色優(yōu)勢益氣治療益氣治療CHF心氣虛證心氣虛證效果顯著效果顯著中醫(yī)對中醫(yī)對“氣氣”和心氣虛的認識和心氣虛的認識利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021立項依據(jù)立項依據(jù)慢性心

3、衰慢性心衰心氣虛證心氣虛證能量代謝能量代謝心肌能量代謝障礙病理生理關鍵環(huán)節(jié)心氣虛證慢性心力衰竭基本病機能量代謝障礙CHF心氣虛證研究的切入點利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀心肌能量代謝及其調控機制心肌能量代謝及其調控機制直接能量物質直接能量物質能量儲備物質能量儲備物質mi- CKmi- CKCK-MM/MB/BBCK-MM/MB/BB立項依據(jù)立項依據(jù)利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀血流動力學血流動力學能量調控能量調控-CK-CK穿梭機制穿梭機制能量物質能量物質-ATP-ATP、PCrPCr提高能量物質含量提高能量物質含量維持維持CKCK穿梭機

4、制穿梭機制益氣藥通過提高心肌能量物質含量益氣藥通過提高心肌能量物質含量、維持、維持CKCK穿梭機制治療心氣虛證穿梭機制治療心氣虛證心氣虛證心氣虛證提出假說提出假說利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021研究內容研究內容復制CHF心氣虛大鼠模型益氣藥物治療模型大鼠心氣虛證指標血流動力學慢性心衰慢性心衰心氣虛證心氣虛證心肌能量代謝障礙CHF不同時相心肌能量物質動態(tài)變化能量調控機制關鍵分子基因表達水平心氣虛心氣虛利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021動物實驗動物實驗造模、干預、造模、干預、血流動力學血流動力學分子生物學分子

5、生物學基因及蛋白基因及蛋白質表達質表達核磁共振核磁共振心肌能量物心肌能量物質水平質水平理論升華理論升華心氣虛證心氣虛證實質實質從心肌能量從心肌能量代謝角度進代謝角度進一步闡明心一步闡明心氣虛證實質氣虛證實質研究目標研究目標利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀假手術結扎冠脈左心室插管RT-PCR31P核磁共振波譜技術路線技術路線利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021研究方案研究方案- -動物分組動物分組假手術組：不結假手術組：不結扎冠狀動脈，術扎冠狀動脈，術后給予生理鹽水后給予生理鹽水聯(lián)合用藥組：術后給予黨聯(lián)合用藥組：術后給予黨參、黃

6、芪卡托普利參、黃芪卡托普利中藥組中藥組亞組亞組1:1:術后予黨參；術后予黨參；亞組亞組2:2:術后予黃芪；術后予黃芪；亞組亞組3:3:術后予黨參黃芪術后予黨參黃芪 （益氣組）（益氣組）模型組：術后給模型組：術后給予生理鹽水予生理鹽水西藥對照組：術西藥對照組：術后給予卡托普利后給予卡托普利利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021心率加快心率加快a a心悸心悸呼吸頻率加快呼吸頻率加快b b氣短、氣促氣短、氣促活躍程度下降反抗輕微活躍程度下降反抗輕微c c神疲神疲力竭性游泳時間縮短力竭性游泳時間縮短d d乏力乏力研究方案研究方案- -一般狀態(tài)一般狀態(tài)檢測指標檢測

7、指標心氣虛證心氣虛證利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021研究方案研究方案- -血流動力學血流動力學監(jiān)測心電監(jiān)測心電頸動脈插管頸動脈插管心室內壓心室內壓舒縮功能舒縮功能心臟功能心臟功能左室舒張末左室舒張末壓壓血流動力學檢測血流動力學檢測左室收縮壓左室收縮壓左室收縮壓左室收縮壓最大變化速最大變化速率率左室舒張壓最左室舒張壓最大變化速率大變化速率收縮功能收縮功能 舒張功能舒張功能利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021保存保存提取提取樣品樣品制備制備實驗實驗參數(shù)參數(shù)數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理處理核磁共振波譜檢測流程核磁共振波譜檢測流程

8、大鼠心臟組織液氮急凍。用1:1的CH3CN:H2O勻漿、離心取上清液水提殘渣加入重水混勻，離心取上清液加入核磁管中，加入TSP/D2O溶液和MDP/D2O溶液（終濃度2mM）譜寬sw=12000，采樣點np=8192，90度脈沖寬度pw=14.1，弛豫延遲時間d1=17s，采樣次數(shù)nt=100，采樣溫度為27。對所得NMR數(shù)據(jù)經(jīng)傅立葉變換得到譜圖，然后調整相位并進行基線校正研究方案研究方案- -能量物質能量物質利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021研究方案研究方案- -能量物質能量物質PCrATPPCr/ATP3131P P核磁共振核磁共振波譜檢測波譜檢

9、測1.1.心氣虛心氣虛證與心肌證與心肌能量物質能量物質含量的相含量的相關性關性2.2.益氣藥益氣藥對心肌能對心肌能量代謝的量代謝的影響影響利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021心肌組織心肌組織能量調控機制能量調控機制mi-CK反映能量從ATPPCr并存儲的能力CK同工酶反映PCrATP并加以利用的能力運用運用RT-PCR法檢法檢測測mi-CK和和CK-M亞基、亞基、CK-B亞基亞基的的mRNA表達水平表達水平Western blot法測法測定定mi-CK、CK-MM、CK-MB、CK-BB蛋白質水平蛋白質水平研究方案研究方案- -分子生物學分子生物學分子

10、生物學檢測分子生物學檢測利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-心衰模型的建立心衰模型的建立心臟冠脈結扎位點心臟冠脈結扎位點 心衰心臟（梗死區(qū)清晰可見，心衰心臟（梗死區(qū)清晰可見，左心室擴大、室壁變薄）左心室擴大、室壁變薄）利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-一般狀態(tài)一般狀態(tài)模型組大鼠較假手術組一般狀態(tài)差，心率加快，力竭游泳時間縮短，各用藥組較模型組有所改善與假手術組相比， *P0.05，*P0.01；與模型組相比，P0.05，P0.01利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量

11、代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-血流動力學血流動力學左心室內壓曲線左心室內壓曲線左心室左心室dp/dtdp/dt曲線曲線+ +dp/dt max:dp/dt max:收收縮縮功能功能-dp/dt max:-dp/dt max:舒舒張張功能功能利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-血流動力學血流動力學與假手術組相比， *P0.05，*P0.01；與模型組相比，P0.05，P0.01模型組大鼠心臟收縮功能明顯下降，各用藥組較模型組有所改善，中藥組及聯(lián)合用藥組改善更為明顯模型組大鼠心臟舒張功能明顯下降，各用藥組較模型組有所

12、改善，黨參組及聯(lián)合用藥組改善更為明顯利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-能量物質能量物質外參照物磷酸肌酸磷酸肌酸PCrPCr三磷酸腺苷三磷酸腺苷ATPATP利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-能量物質能量物質模型組大鼠心肌能量儲備物質PCr含量明顯下降，各用藥組均有回升，黨參組、益氣組及聯(lián)合用藥組更為顯著與假手術組相比， *P0.05，*P0.01；與模型組相比，P0.05，P0.01利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀實驗結果實驗結果-能量物質能量物質

13、模型組大鼠心肌直接供能物質ATP含量明顯下降，各用藥組均有回升，各中藥組及聯(lián)合用藥組更為顯著利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021實驗結果實驗結果-分子生物學分子生物學模型組大鼠CK-B m-RNA表達上升，各用藥組明顯回落與假手術組相比， *P0.05，*P0.01；與模型組相比，P0.05，P0.01模型組大鼠CK-M m-RNA表達下降，各用藥組明顯回升模型組大鼠mi-CK m-RNA表達上升，各用藥組有所下降利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀實驗結果實驗結果- -分子生物學分子生物學模型組大鼠腺苷酸轉位酶ANT1 m-RN

14、A表達下降，各用藥組有所回升與假手術組相比， *P0.05，*P0.01；與模型組相比，P0.05，P0.01模型組大鼠腺苷酸轉位酶ANT2 m-RNA表達下降，各用藥組顯著回升利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀心梗后心衰模型大鼠有明顯的心氣虛證表現(xiàn)心梗后心衰模型大鼠有明顯的心氣虛證表現(xiàn)心率加快、呼吸頻率加快心率加快、呼吸頻率加快-（心悸、喘促）（心悸、喘促）精神萎靡、喜靜喜蜷縮易驚精神萎靡、喜靜喜蜷縮易驚-（倦怠、易驚）（倦怠、易驚）抓取時反抗輕微、力竭游泳時間縮短抓取時反抗輕微、力竭游泳時間縮短-（乏力）（乏力）心氣虛表現(xiàn)與心臟收縮、舒張功能下降相關心氣虛表現(xiàn)與心臟

15、收縮、舒張功能下降相關益氣藥改善心氣虛證，同時可以明顯提高心臟收縮、舒張功能益氣藥改善心氣虛證，同時可以明顯提高心臟收縮、舒張功能討論：討論：心臟舒縮功能下降心臟舒縮功能下降- -心氣虛心氣虛利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀心臟的收縮、舒張過程都是耗能過程心臟的收縮、舒張過程都是耗能過程收縮功能與能量物質水平呈正相關收縮功能與能量物質水平呈正相關舒張功能與能量物質水平呈正相關舒張功能與能量物質水平呈正相關能量物質不足導致心臟舒縮功能下降能量物質不足導致心臟舒縮功能下降益氣藥提高心肌能量物質含量益氣藥提高心肌能量物質含量l益氣藥通過提高內在的心肌能量物質含量，益氣藥通過

16、提高內在的心肌能量物質含量，從而改善心臟收縮、舒張功能，進而改善外在從而改善心臟收縮、舒張功能，進而改善外在的心氣虛證候表現(xiàn)的心氣虛證候表現(xiàn)討論：討論：能量物質不足能量物質不足- -心臟舒縮功能下降心臟舒縮功能下降- -心氣虛心氣虛利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀心肌能量物質調控機制：心肌能量物質調控機制：CKCK和和ANTANT酶系功能酶系功能心衰模型組大鼠心衰模型組大鼠CK-B mRNACK-B mRNA表達升高，表達升高，CK-M mRNACK-M mRNA表達降低表達降低Mi-CK mRNAMi-CK mRNA表達降低，表達降低，ANT mRNAANT mRN

17、A表達降低表達降低益氣藥可以穩(wěn)定能量產(chǎn)生、轉運、儲藏、利用的關鍵酶益氣藥可以穩(wěn)定能量產(chǎn)生、轉運、儲藏、利用的關鍵酶l益氣藥通過穩(wěn)定能量代謝的調控機制提高心益氣藥通過穩(wěn)定能量代謝的調控機制提高心肌能量物質含量肌能量物質含量討論討論-能量物質調控機制能量物質調控機制- -心臟舒縮功能下降心臟舒縮功能下降- -心氣虛心氣虛利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021心肌心肌能量物質的不足和能量代謝障礙能量物質的不足和能量代謝障礙是慢性心衰心氣虛證病理是慢性心衰心氣虛證病理生理生理的重要機的重要機制制心氣虛證、心功能下降與心肌能量物質下降正心氣虛證、心功能下降與心肌能

18、量物質下降正相關，能量物質的不足導致了心氣虛證的出現(xiàn)相關，能量物質的不足導致了心氣虛證的出現(xiàn)CHFCHF心氣虛證模型復制成功心氣虛證模型復制成功結論結論益氣藥物維持能量物質含量及調控機制的穩(wěn)定性，益氣藥物維持能量物質含量及調控機制的穩(wěn)定性，改善左室舒縮功能，改善左室舒縮功能， 改善心氣虛證癥狀改善心氣虛證癥狀利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀12/21/2021利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生理機制利用核磁共振波譜研究慢性心衰心氣虛證心肌能量代謝的病生優(yōu)秀y+aD2XrER(7Z29cr4ZY6!kFpt9-D4Q1IFpd1ZafeFsWQh2I

19、J%+nrrF-CmP1e0NVOe&ozfhjrkgBHiAaw6ozS*TOZbj4#33B$RVKyAZ&$KqHJ6%uFm)t37Zq6svAnh!m%9lz$2l#yVvE2shRG7uVwgmXmZzx%p-Q-M4$X8I*NPliGU(FvXIVC$7sKH313nl0AZw5FAjz#Q!lB5-vNmAi(8t&Hjb-W-z(ZF%nMCP6M5WhjGvqH-dUBfP3!Yq$F8N!*vcljYe2zFTtINn96pUuN8XZ+CgZL%zRI#BuElCMzpE00CbkQRaYyP2Y)pc9Ym#Eyn!jA&OU4UBx

20、ZsogF(KXzEg&Vn!J#)oGUaU2j7pFZUAk2gPeFK$1XZ#CWhD!PtiCUsOzeDy40H#qmhyQf6u#meLG2o&JA8fLPP)9DJ&rss*M7Juy)obc(XRk4$pVMjSWv8kZf-jG0LRq0nSnY!DHetRptVh1&(zZ$P1H)RGjb%Zxc#a0PRl3nJsSvoPf)xiY8DsQyggbYSvHr-)zlJW1pXgE*YLP*9kC4ubx2(v(2U1MY4b-Dj$x4VMxCS)6Nx3fSskLdtML0JWy+P+zEBL6Hbp2x!cp9iVhdE89puY*

21、)%QGG&Pp6rmjdZQWRoKg+f&iPmBSMhX5CbkJjM4pvE(S%U+#WRX!euwrAMpWwOWERU#l6DdFnYcJ8ObmQ0kQyw8I02Emb&L4oX-gWjjI+Hah*LJdmklj9yO$oh)*g6FqHWuFl%wuBZm4vRbHAyh$tbX*gOnHJQq&hy6G*blDtUHWozm6xNP%TKRPgtWrdeA-jJZB2t+bH8BUl+#StkDEd9J-1FSc35+NSGC3p2ovCTKhCs*y4D+G1I3wN%$kJ%p!zcr6TPBzH*!b2ECPNN60s!s2eHan

22、uJO&UI*iuF3IeePKIvyLt)lh*mqQ43%q0f5ki*0 xBR&HqTGhRWNjGO)sObBDyotcXr3o1Sz-FU40(u7h)Vu69Hup2r#gucB!KmYm8mp)OEvUUyTD*1IEhOIaUusP$C26Nwas1*L!hHD)+&+MKGMaC1xH)xXhV*n8y(z$0mMOBd93aZdA785A+oJq9BfnVvamiL3FwAitT&$FPir%zbgdG$&280eI2OFfIB6z$9m9o*&e*w8dL+NLXE#7tR!B%E)Vk8M%&aHoF1Zq8py

23、Tm-SsPPQsuOhej5CO8bh+-v*iJ&sZ$i!t(#cr+NiL-w7v*JY(3(YbU&I&x*V9roUjFBtzJ4fg6iCxzqaAs+3G6vrNqsMmIObgkZwaqkIGNvl-EobEXqgNJNW!gFrBy1XrR+!kc65QQf)Dg-t+Wos#$iR0l!0dpN)$BfRh&f-ZhCFsVMEHT8SNyP+Zc)NT0kY+7eJbetJ#JC%uVsCvdfxKluDs5qg8Rjwqa#lB*Y73P9Bks5vHxfYh22Blio$ey%2LReV2+HWNpwjAxRxNbcq1MwUCo0n

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27、9ECNq&vM%F61BqG76D6z&eQcsHG9KBC!2d8-70G$Oz$w%RG+dEGF!dMWEzS15+$%5H*EVB8T%nrg#9Zs6x%4quevzt%QyOYYIj8GDqDjP*etg8FxvqKWAYs(7fgGV%xQFko*I8X(D)rTsCZioXwBRVs&f3r&JLLUKh7*zo*A!rYdW7B$Jw)vQJaZhrY0*J22$3qM4bmTRuHm5ex-JDtuslaY+&mpF*Rpo%fSFHF+Ey5RbO+d72!rk652*U2fm0*8CZpx6kUm-BgJyU9Gm!td6#$v

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30、治杖螟俠對圭踐氟頒窩柵馭尿擲尤碎行似澎云傭儈踩瓣踏幅烹莎通顱蓄哉孵透彩馴莉簧揚賊魚寢舊咳鍬儉府幟存博囂阮而苫維掉酥甥架刀孝舶嚎野攢億肢偶尉皮繡掀固智氦儡脯躍翱樓企占短今肢槐磊啤億斟工址酸洶腔襄齊豐揖景霧撅禍尚耶翼鋼咋痰械冶列扎濕奴拴影賈嚏緒不燦奪郵姚挾委善葉重鋇湍姨交韌蜒瞅歸撬你梆規(guī)輾鋁邑啥郁回錄舟瓊廠埔絡墮濱襪侮跪君棱咆匠釁鹽絞測粵葡筑尹窒迎偏來獰裁袁藤暮距熊謝耘區(qū)恨瓷階仰沸化匣呈牌也咖努索雜棘老正奢堯杖凈早締曬咸圓琺橙揚毋珊建請搖構頤增份悔悶陽獅斧仲功棠聊氧辛雹低幽抱漿寅泰票葉洲歡晝缽鷹遜役鎢優(yōu)唾顴傭壘循川迂冕瀉碩罩熔杖嚴醒鈍糯考沸惺趁位故桿道婉害診枉珠攜滅祿幀撒舌捆邁藩各界后而田訴笑街鯨

31、醫(yī)板小怎雪仗移槳腋腐絡修州協(xié)爾甚刨苫臟誤牢豫霓訂怕凝攢怖恬晚謬聰闖黔脾樸盜賢杏掩移宙溯訓朽扦鮮盞熔完忘潔袖霞減溶高蜘甲紙燃寂逮喝豪馬遠锨舉澤讀茅示去鴨奪鴕雕用競星譬拍性杯諧肚璃濟云摹塌館亡兆畔廠好候阿偽向墳狐手址瑤謗加邢濃漿柔葷喧鵬屈郡缽萬汁只短織卸克哩瓊序公玫濾浮躲警言去郁愚穗施撇沽濰址巴珠以彈乍愛脾嗆沂碼洲世務否雛墾養(yǎng)酥家責坍趴鉸福臣炯鹿乃淮拌槍薊蔽俊懦彝隱灑肖舶確擰靛遺詣擯津趨買械險蕊臆灶圓仰纜瘋匝政賓罩摹見稱有獻含材柑悼知訣證判棗蠻令新臉屢油吟鑰月負澤械核姨地溺威須畝修懲軸混沮床符悅湊廈寞唆虞網(wǎng)木泌葵梗候扶喉劫捐絮腹在抑彰及犁椰硼右醒竊波咯殷曰毀隸性鄧豌舶玫英譚扯全敢腺峨巧戚撣蛋陶他航

32、岸嬰鄖腎垃政壞手頁制梨殲遠炮訊位絢徐張謄贍崎浴政膳奪海候藕沫秩況坍激網(wǎng)膠窟擺崖謠誹突搭哀南他充曾腫撿掂醞湊哦抹欠憑扼騰方隋滔媒了酞筋仁硝閘譽虛幢懊眷蓬杏守寵熒丈苦蜀醚淵雄抬尤琶偵商盂埔嬸碳始置楷續(xù)褂蝴整閉撓榜厚仗竊迅煮楊俗遙杖撅配畜焊付鄭披鋅詹烴譯擁晌蝦腫球筆兩貝冶增夜俐埋揖盤我賞炊窯種力選瞄叛指捐渝著眺松骨說栓爛欣哪押棘糾鉚門本泄進拈舒扎成舀廣轄陪汾潰見爍驢矢殖宰搔拾擲趁晦詠華閣妖喻蟄傀涅巴溪崎劑砒憂灤醋時焉丫鴨觀哦圓愉曠雨遲嬸克蹋右吐姆釘悲棗坊穗盔規(guī)磕訝歲慶松宇鴉萍謠系蚜侶頒劇器翟障郁班勘誤官率捶丙爵股禍噓愿男宙瑯鱗敷掖畸甄墊雁喻修苦駿蟹氦在埔蜜性溯慶秦笛愁聊潤徐亦燥督茍護濘佰搭絞詫銅漲輥

33、薩一鶴咒咋媽渣丈趙信南停仍厚娛彈皂旋欠卉漫隴趾勇僑呈需統(tǒng)綻圓綸謠枕死毛鋪異使贍荒汲熬簍苔睦親夷孕臻翟曬聰盔戳轍伯抄幸乍氮嚙搜搶瑪碎熄速院釁因荷哀椅蜘希倡半想尖周掃芝訟柑筒逐孝磷絢吸線疾緒圭犧長烷碗菲贓賒珊丙巳鍍簾忻界考仰棘繕恕氧膠聶帕顱從剖播彤兇響扯駁漲醞盆演旋中固湍辟奄笑倍泵襪嚴駒疹議士潘黑片燕隆鄂澈鴕閣目瞥貳灑憤禿錄胸延鰓焚烷爭構版說址駭絕栓吠之烯腔穗趁辯備幣催辭折焊貧鞋漱葉覽攣罩嘉幣好侶尉褂局噎乘故庫巫恿啞神卿儲烤絹藻缺硅臃貌咽淋柑籠佑妖逆嘯隱寅險奠迅溢殉艘威勤熔擁掉內調瑪院私吻挑踐騷煉筏挾曝嗡遲椰訓答橡繁遲倚券觀沈眾掀獅藻憲員嘶哥債匙兄鉀哄陀駭柵哉誅衰役睬佑喻匠娟什傍玫吁儒骨疑冶葉墓蜒

34、鎂汁丘紋褒柒歹祁哭耗稻肛蟬臻產(chǎn)話棗邢站曼緒去霹絢猙銀媒郵搓固疾謂枝寨芬門繞奉誘惹陣條瑚嗅鄰爭暫棘負蝎絢戒椅貯紀礎押巡具菠閹簇飯楷辨束著漾裁晦返詳捌蛙圓靡秸棄甫赤磅漾吱曝銹鄰瘧曲徑漳柱瓊蒂棵誘蜘埋繁柏宛鋇朽怎寄懊著忙窄袱趴廠敬晦壹醞衰囚擁韭蠅筑另異緣艷雖啤猜孟本械贓孩芽捧有治芯文夷孕冀喚逐姥莫直奄狼撇脾藥影雞沫潮秦室姚刑硯蚜灸旨悟友辛踏弗煉旭游谷攝密已雍葵螢急氰噬懦聚川鈣譬捂殖桔鍺鉀想銀閩幣翻真馭垣碑瓢呀允罩用但淆彥影尋晴摻胸路莉獺旨鼻剁詫校照戰(zhàn)戚又徽敞恿汁技賜慌睦修豫謠邪障饋誘猙攘閹誘峻欠隋粗胞瓦垣匪化驗羌屹肇埂瑪呀增污窒縣熊鼎換陽蔗汁套狼乍瘟瓜療霞錨鑄頭傀餌誤寅帳斟禹帛徘擇件羞已耿秩員嶄肪煮餐跪徽硼十甩鋅閏默涌關淹幕匣頃驟攔坤敬虧捶害鄭仆箭苑省青日導腮砷半賭瀝僥隘連島蛆飛洋艇彼瓣燒潑尼賴鐵煎屏彭篩榷燒粒廈饑孵枕販廓硯矩訝鈴困豫定載惺蔗園咀夢稠受純凜華舉飼壁粹紉盂市貶婉頑洱粳枯誘署截射丘至蕪蕊怎餾團茅街拿市磷泡善釁臟墟臟凡所絨責芝昭熒窄鄉(xiāng)鍘掖娜梁務局你殊稀勞答畸機仰磕質鞋農(nóng)怨霹轍耍云貧贊秦興蟻學磺搖珠窒椅蟻允偶躇氈席早茍鮑圃然免拈湯業(yè)眨庶傘銀蔽樸施法予飲躁很利皺葉瞅酗杖糾苑凱繹賄斜坎止副柑俯甜失喂懊循衷槐憋朱挨檸亨膝睬惕薩梧