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1、13.23.2體外受精和早期胚胎培養體外受精和早期胚胎培養學習目標:學習目標:1.簡述哺乳動物簡述哺乳動物體外受精體外受精技術的主要操作步驟。技術的主要操作步驟。2.簡述哺乳動物簡述哺乳動物胚胎的早期培養胚胎的早期培養方法。方法。2一、試管動物技術一、試管動物技術v(1)概念:概念: 通過人工操作使卵子和精子在通過人工操作使卵子和精子在體外體外條件下條件下成成熟和受精熟和受精,并通過,并通過培養發育為早期胚胎培養發育為早期胚胎后,后,再經過再經過移植移植產生后代的技術產生后代的技術v試管動物技術的三步試管動物技術的三步 第一步:卵子和精子的成熟和受精第一步:卵子和精子的成熟和受精 第二步:培養
2、為早期胚胎第二步:培養為早期胚胎 第三步:胚胎移植第三步:胚胎移植3閱讀教材,思考:閱讀教材,思考:卵母細胞采集的方法有哪些?采集的卵母細胞都能直接和卵母細胞采集的方法有哪些?采集的卵母細胞都能直接和獲能的精子受精嗎?獲能的精子受精嗎?2 2、收集精子的方法有哪些?、收集精子的方法有哪些?體外使精子獲能的方法有哪些?體外使精子獲能的方法有哪些?3 3、一般在什么溶液中完成受精過程?、一般在什么溶液中完成受精過程?4 4、5 5、發育培養液的成分有哪些?胚胎早期培養的目的?、發育培養液的成分有哪些?胚胎早期培養的目的?1 1、教材教材7272頁圖頁圖3-143-14中,卵母細胞培養的目的?中,卵
3、母細胞培養的目的? 精子離心處理的目的?精子離心處理的目的?(培養成熟,至減(培養成熟,至減中期)中期)(分離精子,便于獲能處理)(分離精子,便于獲能處理)4二、試管動物技術的過程二、試管動物技術的過程1、體外受精、體外受精卵母細胞的采集和培養卵母細胞的采集和培養常用對象:實驗動物如小鼠、兔,以及家畜豬、羊等常用對象:實驗動物如小鼠、兔,以及家畜豬、羊等常用對象:大家畜或大型動物,如牛等常用對象:大家畜或大型動物,如牛等51、體外受精、體外受精精子的采集和獲能精子的采集和獲能6哺乳動物體外受精過程的示意圖哺乳動物體外受精過程的示意圖7早期培養的目的:早期培養的目的: 檢查受精狀況和受精卵的發育
4、能力檢查受精狀況和受精卵的發育能力83、胚胎移植、胚胎移植9體外受精體外受精早期胚胎培養早期胚胎培養卵母細胞卵母細胞的采集的采集精子的獲精子的獲取取受精:受精:條件:條件:培養液成分:培養液成分:假陰道法假陰道法手握法手握法電刺激法電刺激法方法一:用促性腺激素處理,使其超數排卵,從輸卵方法一:用促性腺激素處理,使其超數排卵,從輸卵 管中沖取卵子管中沖取卵子方法二:從屠宰母畜卵巢中采集方法二:從屠宰母畜卵巢中采集 方法三:直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞方法三:直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞受精卵在發育培養液中培養受精卵在發育培養液中培養 無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、無機鹽、有機
5、鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等核苷酸、血清等 獲能的精子獲能的精子 培養成熟的卵子培養成熟的卵子 完成受精完成受精課內小結課內小結10有性生殖 無性生殖 核移植技術、胚胎移植遵循 不遵循體外受精體外受精胚胎移植胚胎移植 試管動物 克隆動物生殖方式技術手段遺傳物質遺傳規律比較試管動物和克隆動物比較試管動物和克隆動物來自2個個體 主要來自核供體 11122 哺乳動物體外受精的過程是哺乳動物體外受精的過程是 () 卵母細胞的采集卵母細胞的采集精子的采集精子的采集 卵母細胞的人工培養卵母細胞的人工培養精子的獲能處理精子的獲能處理 精子與成熟的卵子在受精溶液中共同培養精子與成熟的卵子在受精溶液
6、中共同培養 用用CaCl2處理精子處理精子用一定濃度的肝素溶液處理卵母細胞用一定濃度的肝素溶液處理卵母細胞 體外受精體外受精受精卵培養受精卵培養B134、胚、胚胎工程是一項綜合性的動物繁育技術,可胎工程是一項綜合性的動物繁育技術,可在畜牧業和制藥業等領域發揮重要作用。下在畜牧業和制藥業等領域發揮重要作用。下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程。圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程。(1)從良種母牛采集的卵母細胞,都需要進行體外培養,其目的從良種母牛采集的卵母細胞,都需要進行體外培養,其目的是是 ;從良種公牛采集的精子需;從良種公牛采集的精子需_后才能進行受精作用。后才能進行受精作用。(2)在體外培育受精卵時,除了給予一定量的在體外培育受精卵時,除了給予一定量的O2以維持細胞呼吸外,還需以維持細胞呼吸外,還需要提供要提供 氣體以維持氣體以維持 。(3)圖中過程圖中過程A稱為稱為_, 它在胚胎工程中的意義在于它在胚胎工程中的意義在于 。(4)研制能夠產生人類白細胞介素的牛乳腺生物反應器,需將目的基因研制能夠產生人類白細胞介素的牛乳腺生物反應器,需將目的基因導入牛受精卵,最常用的導入方法是導入牛受精卵,最常用的導入方法是 ;獲得轉基因母;獲得轉基因母牛后,如果牛后,如果 即說明目的基因已經表達。即說
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