1、文檔來源為：從網絡收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持3文檔收集于互聯網，如有不妥請聯系刪除ATN-300型全自動定氮儀（蛋白質測定儀）操作說明手冊一、概述蛋白質的測定方法，目前仍以1883年凱達爾氏（Kiedahl）發明的定氮法為基礎，它根據各種蛋白質都具有固定比數的氮這一事實，通過對氮的測定而推算出蛋白質含量，此法所得的含氮量除了確定屬于蛋白質組成成分的氮以外，還包括非蛋白質組成的其他有機及無機態氮，所以換算所得的蛋白質含量稱作為粗蛋白含量，一般蛋白質中的含量為18%，換算后即每6.25克蛋白質中含有1克氮，因此6.25成為換算系數 K，但是不同的農產品及其制品 的實際含氮量有區別，

2、所以不同農產品必須采用不同的換算系數，如花生、大豆、蠶豆、大 麥、小麥、燕麥、黑麥等含氮為17.6%，求得K=5.7，養麥、葵花籽、亞麻籽、大麻籽、棉花籽、蓖麻籽等換算系數則為K=5.50,玉米、菜籽為6.00，水稻為5.95，上述以外的其他農產品的換算系數均適用6.25。盡管如此，目前世界上還沒有直接分離測定含蛋白質的可行方法。因此，迄今為止在國內外凱氏定氮法仍然是測定蛋白質含量的經典方法。所得結果準確、穩定。我公司研制生產的 ATN-300型全自動定氮儀（蛋白質測定儀），是引進消化吸收國內外 檢測新技術，結合我國國情，應用凱氏定氮法原理， 采用化學與物理學相結合完成的成套蛋 白質含量快速測

3、定裝置。為糧食、食品、飼料、農業、商檢等檢測部門提供了理想的檢測設 備。二、工作原理ATN-300型全自動定氮儀檢測原理為：整套裝置，由電加熱消化器、全自動蒸餾器兩部分組成。 要提高蛋白質含量測定的檢測 間餾是要加速樣品消速度，其關樣鍵加熱爐，增大了消化管受熱面，使消化管連同管內所注入的10ml H2SO4及試樣置入消化管插入井式爐內加熱取得更佳的熱效應，在消化前置入硒片作為催化劑進一步加速消化煮解，化煮解的時間ATN-30全自動定氮儀化裝置采用井式電大大縮短消化時間。消化管內溢出的SO2等有害氣體，通過消化管上的排污管經抽吸泵由水 帶入下水道，有效的抑制有害氣體的外逸，由省略了實驗室中安裝毒

4、氣通風櫥，試樣經40分鐘左右消化煮解，即可完全消化。消化的過程主要反應如下:R C H NH2 COOH + H 2SO4 宀 CO2 + SO2 + NH 3 + H2O2NH3 + H2SO4 t (NH 4)2SO4蒸餾與吸收過程的主要反應如下：（NH4）2SO4 + 2NaOH t Na2SO4 + 2NH 3 + 2H2ONH3 + 4H3BO3 t NH4HB3O7 + 5H2O然后經滴定，計算蛋白質含量，滴定的過程是鹽酸和硼酸氫銨反映的過程。NH4HB3O7 + HCl + 5H 2O t NH4CI + 4 H 3BO3三、技術參數1. 測定品種：糧食、食品、飼料、釀造、土壤、

5、制糖、乳制品、藥物等物質2. 測定樣品量：固體v 5g/個，液體v 15ml/個3. 測定范圍：含氮量 0.1200mg （0.02%95%）4. 測定數量：消化：一次同時消化個數按爐孔數定；單個蒸餾5. 測定時間：消化每批 45min ;蒸餾每個6min6. 測定重現性：平行試驗結果符合GB/T 6423-947. 電源：220V, 50Hz四、使用說明1 其他儀器和用具11 分析天平：感量 0.0001g1 2 實驗室用粉碎機或研缽1 3 酸式滴定管： 25ml 或 10ml14 錐形瓶：容積 250ml1 5 分樣篩：孔徑 0.45mm（40 目 ）2試劑2. 1鹽酸（HCI）:分析純（

6、GB622） 0.05mol/L標準液，（4.2ml鹽酸，注入1000ml蒸餾水） 碳酸鈉法標定鹽酸。2. 2氫氧化鈉（NaOH）:化學純或工業純（GB629）、40g溶于蒸餾水中溶成 100ml，配成 40%水溶液 （m/v）。2. 3硼酸（H3BO3）:分析純（GB628）2g，溶于蒸餾水中配成 100ml2%水溶液（m/v）.2. 4混合指示劑：甲基紅（G5H15N3O2）（HG3-958）溶于乙醇配成0.1%乙醇溶液，溴甲酚綠 （HG3-1220）溶于乙醇配成 0.5%乙醇溶液，二種溶液等體積混合，陰涼處保存（保存期三個月以內 ）。2. 5 硫酸銅（CuSO4 5H2O）分析純（GB6

7、55）10g ;硫酸鉀（K2SO4） （HG3-920）分析純 150g, 在研缽中研磨，仔細混勻后過40 目篩（加速劑 ）。2. 6濃硫酸（H2SO4）化學純（GB625）（含量98%、無氮）。3 操作方法31 樣品消化稱取經粉碎通過40-60目/寸試樣0.5-1g（視含量而定）無損的置入已洗滌烘干的試管中加 催化劑 5g 左右和 10ml 左右硫酸。將消化管分別放入消化架各個孔內， 然后置于消化爐上， 開啟抽氣三通上連接的自來水 龍頭， 使抽氣三通處于吸氣狀態。接通電源， 在加熱初始階段需注意觀測， 防止試樣因急沸 而飛濺。 （初化時，選用電壓型控溫消化爐起初控制在150V 左右， 1 5

8、分鐘左右后可滿電壓工作;選用數顯型消化爐起初控制在 200 度左右， 20 分鐘左右后再設定所需溫度。 ） 消化結束后（消化液呈澄清透明狀） ，將消化管架移至冷卻架冷卻至 40-50 度左右。然 后進行下一步的蒸餾。32 蒸餾1 、 用配套橡膠管根據結構圖和儀器側面標簽提示連好管路。2、（各參數數值設定）必須按住啟動鍵打開側面電源開關，按啟動鍵，測定酸泵、水 泵、堿泵的流量參數，按下一項鍵，在右邊托盤上接收瓶，接著按加酸按鍵，液晶 屏上顯示 4 秒左右時，再按此鍵就關閉了酸泵，此時取下接收瓶倒掉液體（主要是 防止管路中空氣導致加液不準） ，接著重復上面加液工作，停止后，取下接收瓶用 量筒量出數

9、值，計算出每秒加酸的量，在自動加液時只要輸入時間就可知道加了多 少液體量（根據實驗需要量設定） ，加堿、加蒸餾水在左邊放上消化管，加量及計 算的方法同上。液晶屏提示:設定加酸時間（毫秒為單位） ，根據實驗需要量而設 定好，加堿、加蒸餾水方法同上（秒為單位） 。（一般加堿量是消化時濃硫酸用量的5倍以上，蒸餾水是15ml，硼酸50ml）,按下一項鍵同時按住啟動鍵恢復正常畫面 （各泵流量已知） ，此過程只要操作一次就可以，以后都不用再操作此過程。3、正常工作之一（設定過程）畫面液晶屏提示，有 1 、 2、 3、 4，四個存儲編號（代表可存儲 4 個操作程序） 選好存儲樣品編號，液晶屏提示檢查、設定用

10、下一項鍵（上一項鍵）可選擇所需程序如選設定可設定各個參數（注意：每次開機只能設定一個存儲程序編號參數）A、 根據提示設定開啟電磁閥的時間值，請用上升或下降和下一項鍵和（上一項鍵）調（出廠時設定 48秒以上，請不要小于 40秒以免燒保險絲），接著根據提示設 定蒸汽穩定的時間數值，方法同上（出廠時設定60秒以上，請不要小于 50秒以免燒保險絲）；根據提示設定各個泵參數（泵流量前面已經測算過），根據提示設定報警定時器時間方法同上，（出廠時設定420秒）。B、如選檢查可以檢查設定參數，再按下一項鍵，進入正常畫面，按啟動鍵，開始工作，直到顯示請選擇工作模式畫面時。液晶屏顯示自動還是手動在選用自動工作模式

11、時（手動模式同樣），按一下啟動按鍵，再打開自來水龍頭，這時夾緊側面排水夾子，下方有機玻璃窗口里玻璃瓶內有水進入即可，過一段時 間后，下方有機玻璃瓶窗口里玻璃瓶有水進入，液晶屏提示電磁閥關閉，同時時 間減少顯示為0，顯示電磁閥開，液晶屏顯示蒸汽穩定的時間數，同時時間減少 顯示到0,并發出蜂鳴聲，顯示蒸汽穩定。這時關閉右側蒸汽開關，提起左側紅 色手柄把消化管固定在左邊的托架上，在右邊托盤放上250ml的接收瓶，（手動模式時，根據順序按各個按鍵加入各種液體后）再按啟動按鍵，按順序自動加入 各種液體（按照程序設定值），完成好后，打開右側蒸汽開關，再按啟動按鍵， 液晶屏顯示報警定時器時間，數值減為0時發

12、出蜂鳴聲。可觀察接收液數量是否達到（一般接收瓶內液體要達到150ml以上），接著移下接收瓶，這時關閉右側蒸汽開關，取下樣品待滴定用。第二個樣品同上方法。4、關機關閉電源，關水龍頭，打開側面排水夾子，關閉右側蒸汽開關，把連堿泵的膠管放 入蒸餾水容器內，前面放入消化管，等排完水。關一次開關，再按住啟動鍵打開側 面電源開關用手動模式按加堿鍵抽蒸餾水清洗堿泵，酸泵同樣清洗，關電結束。3. 3滴定用標定后的鹽酸溶液進行滴定接收瓶內的溶液，滴定溶液由綠色變為淡紫色為終點，記下消耗鹽酸溶液的毫升數，按下式計算蛋白含量：F亠人曰(V2-V1) X C X 0.014X K蛋白含量(%)=-式中：WV-滴定試樣

13、時消耗酸標準溶液的體積（ml）Vi滴定空白時消耗酸標準溶液的體積（ml）c標準酸溶液的摩爾濃度0.014氮的毫克當量數K氮換算成粗蛋白質的系數W 試樣重量 （g）（空白測定：用0.1克糖代替樣品或不加樣品做空白測定）平行測定的結果用算術平均值表示，保留小數后二位。3. 4換算系數結果報告中必須注明氮換算成粗蛋白質的系數，換算系數見下表。樣品名稱換算系數數據來源小麥5.70GB2905大麥5.70GB2905釀酒大麥6.25TOCT10846文檔來源為：從網絡收集整理.word版本可編輯.歡迎下載支持面粉5.70GB5009.5面包5.70AOAC14.103大豆6.25GB29055.71GB

14、5009.5玉米6.25食品常用數據手冊6.24GB5009.5飼料6.25GB6432肉制品6.25GB5009.5孚L制品6.38GB5009.5牛奶6.38ACAC16.036芝麻5.30GB5009.5油菜5.53油菜籽綜合利用3. 5注意事項1.消化時若有氣體外溢，加大抽氣三通連接的自來頭的壓力。消化密圭寸圈每次試驗結 束后清洗一遍延長使用壽命。2每天工作完，把 NaOH溶液外接的皮管移入蒸餾水瓶內，前面套好消化管抽洗幾次， 防止堿液殘留在堿泵內而影響使用壽命，也可防止單向閥粘連，待下次使用時，在蒸餾 樣品前需先排出lOOmlNaOH，以防稀釋NaOH，造成第一個樣品加入的堿液濃度不夠。3 每次試樣蒸餾結束，必須迅速取下消化管，防止消化管液體倒吸至蒸發爐內腐蝕電 熱管