第二章 海洋動物細胞培養相關術語_第1頁
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文檔簡介

細胞培養的現實意義

生物技術上:生產各種生技術產品如:狂犬病、小兒麻痹癥等病毒疫苗,表皮生長因子及干擾素、白細胞介素等生長因子及單克隆抗體等。科學研究上:在病毒學、免疫學、遺傳學、腫瘤學等方面。臨床醫學上:胎兒的遺傳性疾病分析,藥物篩選及某些疾病的治療等細胞培養的優點

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

可以根據需要,控制包括pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術、記錄方法:

研究:倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記--

記錄:攝影照片、縮時電影、電視--5.研究的范圍比較廣泛

學科多:細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等

對象廣:

各種動物:低等動物--高等動物--人類

一種動物:不同年齡--

不同組織--

正常或異常(腫瘤--)

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象細胞培養的缺點

現人工模擬體內環境的技術已經很高,

但,人工所模擬的條件與體內實際情況

仍不完全相同.

當細胞被置于體外培養后,

生活在缺乏動態平衡的環境中,

久了,必然發生變化.

因此,對于體外培養的細胞,應該把他們視作一種既能保持動物體內原細胞一定的性狀、結構和功能又具有某些改變的特定的細胞群體,而不能將之與體內的細胞完全等同。細胞培養的工作原則有標準化的工作方法培養用的液體極多(如培養液、胰蛋白酶、HANKS液及抗菌素等),應由專人負責,并保證做到按規程行事,配制濃度準確,滅菌可靠,所有配好的溶液瓶上都要標明名稱、濃度、消毒與否和制備日期等。一切培養用品都要有固定的存放點,避免雜亂無章,其中尤其重要的是:培養用品與非培養用品應嚴格分開,已消毒品與未消毒品應分別存放。第二章細胞培養相關術語動物細胞與組織培養(cellandtissueculture)是動物細胞工程的重要技術基礎。動物的細胞與組織培養是指從活的機體中取出組織或細胞,模擬機體內生理條件,在體外建立無菌、適溫和一定營養條件等,使之生長和生存,并維持其結構和功能的技術。組織培養的概念組織培養這一名詞實際上是一個通用名詞,習慣上泛指所有的體外培養。根據培養物的不同可概括為三個不同概念:細胞培養、組織培養和器官培養。組織培養:將活體的一小片組織放在盛有培養液的玻璃或塑料培養器皿中,待組織塊粘著后,沿底面平面移動生長的過程稱為組織培養。從組織塊中生長出來的仍然是細胞,細胞在生長的同時也發生移動,至使組織培養難以長時間維持其原有結構,結果也就成了細胞培養。器官培養:是指采取某些措施使器官的原基、器官的一部分或整個器官在體外存活、生長,并保持其原有結構和功能的培養技術。細胞培養:是指用機械或化學的方法將組織分散成單個細胞后,選用最佳生存條件對活細胞進行培養和研究的技術。體外培養的種類培養方式群體培養:將大量細胞置與培養瓶中,讓其貼壁或懸浮生長,形成均勻的單細胞層獲單細胞懸液。克隆培養:將少數的細胞加入培養瓶中,貼壁后彼此間隔距離較遠,經過繁殖每一個細胞形成一個集落,成為克隆。原代培養(primaryculture):從直接取自生物體細胞、組織或器官開始的培養。。傳代(passage):細胞生長繁殖一定時間和達到一定密度后,須將細胞從一個培養器皿轉移或移植到另一個培養器皿,即稱為傳代或傳代培養。細胞系(cellline):原代培養物經首次傳代成功后即成細胞系。有限細胞系(finitecellline):如果不能繼續傳代或傳代數有限,為有限細胞系。連續細胞系(continuouscellline):如果可以連續傳代,則稱為連續細胞系。細胞株(cellstrain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養物稱為細胞株克隆(clone):亦稱無性繁殖系。對細胞來說,克隆是指由同一個祖先細胞通過有絲分裂產生的遺傳性狀一致的細胞群。無菌(asepsis):無真菌、細菌、支原體或其他微生物存在。無菌技術(aseptictechnique):采用化學或物理手段防止微生物污染的技術。在組織細胞培養中還意味著防止有害物質污染及其他細胞的交叉污染。合成培養基(chemicallydefinedmedium):是一種各種成分的化學結構均明確地用于細胞培養的營養液。

化學純試劑

CP

Chemicalpure

實驗試劑

LR

Laboratoryreagent

超純試劑

UP

Ultrapure

生化試劑

BC

Biochemical

光譜純

SP

Spectrumpure

氣相色譜

GC

Gaschromatography

指示劑

Ind

Indicator

層析用

FCP

Forchromatographpurpose

工業用

Tech

Technicalgrade

飼養層(feederlayer):又稱飼養細胞。是在細胞培養中使用的一層具有飼養其他細胞作用的細胞,在其表面可培養那些需要復雜營養的細胞。生長曲線(growthcurve):以正在生長繁殖的培養物中細胞的數目或生物量為時間的函數所繪制的曲線。體外培養細胞的分型

粘附型細胞:附著在某一固相支持物表面才能生長的細胞。懸浮型細胞:不必附著于固相支持物表面,而在懸浮狀態下即可生長的細胞。貼附(粘附)型細胞

粘附:是大多數有機體細胞在體內

生存和生長發育的基本存在方式結果基于粘附特性,使細胞與細胞之間相互結合形成組織,有機體的絕大多數細胞必須粘附于一固相表面才能生存和生長。

培養時:這些細胞被放到體外環境中以后,同樣需要粘附于某一固相表面才能生存和生長,因而屬于粘附型細胞。粘附(錨定或錨著)依賴型(性)細胞:唯有粘附于固相表面才能生存的細胞

類型

細胞在體內、外的粘附方式:存在差異

體內:粘附是全方位

外形具有復雜的立體特征

體外:多數情況,細胞只有一個附著平面

外形一般與體內時明顯不同

按照培養細胞粘附生長時的主要形態,可分為幾大類型

貼附(粘附)型細胞分類

上皮細胞型成纖維細胞型

上皮細胞型

名稱:僅形態上似體內,實

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