藥物的雜質檢查詳解演示文稿當前1頁，總共75頁。（優選）藥物的雜質檢查當前2頁，總共75頁。中國藥典（2010年版）二部凡例中規定：檢查項下包括安全性(safety)、有效性(efficacy)、均一性(homogenization)、純度(purity)四個方面。

第一節概述當前3頁，總共75頁。第一節概述一、藥物純度的概念與要求1.純度（Purity）藥物的純凈程度。2.雜質

(Impurities)

藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩定性和療效，甚至對人體健康有害的物質。ChP將任何影響藥品純度的物質均稱為雜質。當前4頁，總共75頁。2010版藥典，二部，附錄XIXF藥品雜質分析指導原則(GuidelinesfortheAnalysisofImpuritiesinDrugs)任何影響藥品純度的物質均稱為雜質。Anysubstancethataffectsthepurityofadrugisconsideredasanimpurity)

藥品質量標準中的雜質系指在按照經國家有關藥品監督管理部門依法審查批準的規定工藝和規定原輔料生產的藥品中，由其生產工藝或原輔料帶入的雜質，或在貯存過程中產生的雜質。不包括變更生產工藝或變更原輔料而產生的新的雜質，也不包括摻入或污染的外來物質。當前5頁，總共75頁。雜質控制的理念純度控制限度控制雜質譜控制（impurityprofiles）當前6頁，總共75頁。純度控制早期的藥物質量控制主要基于容量法、分光光度法等經典的化學分析方法,對雜質的控制主要是通過對藥品的純度控制間接實現的。BP(1980)提出了有關物質(relatedsubstances)的概念。當前7頁，總共75頁。限度控制BP(1988)

“與已知雜質相比,對藥品中的未知(潛在)雜質的控制更為重要”。BP(1998)在附錄中首次增加了有關物質和殘留溶劑檢查通則,增加了雜質控制指導原則;同時在各論中對化學藥品的已知雜質給出了具體的名稱、分子式和結構式,并通過“已知雜質”、“任意單個雜質”和“總雜質”實現對化學藥品中雜質的控制。標志著對藥品中雜質的“限度控制”理念已經成熟。年版當前8頁，總共75頁。雜質譜(impurityprofiles)控制藥品中的諸雜質的種類與含量被總稱為雜質譜理想的控制理念應是針對藥品中的每一個雜質,依據其生理活性逐一制定其質控限度。當前9頁，總共75頁。3.藥物純度與試劑純度共同點——均規定所含雜質的種類和限量.不同點①藥物純度從用藥安全、有效和對藥物穩定性等方面考慮,只有合格品和不合格品.

②試劑純度是從雜質可能引起的化學變化對使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規定,它不考慮雜質對生物體的生理作用及毒副作用?；瘜W試劑不能代替藥品！當前10頁，總共75頁。硫酸鋇（BaSO4)藥典規定檢查可溶性鋇鹽?；瘜W試劑一般分為4個等級〔基準試劑、優級純（GR）或特種試劑(光譜純、色譜純、農藥殘留檢測級)、分析純（AR）和化學純（CR）〕當前11頁，總共75頁。二、雜質的來源與種類雜質的來源生產過程儲藏過程合成過程中，原料不純或反應不完全，中間體、副產物在精制中未除盡制劑過程試劑、溶劑、還原劑殘留異構體、多晶體使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發生水解、氧化、分解、異構化、晶型轉變、聚合、潮解和發霉等變化當前12頁，總共75頁。當前13頁，總共75頁。一般雜質（generalimpurities)指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產和貯藏過程中容易引入的雜質，如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、砷鹽、重金屬等。特殊雜質（specialimpurities）指在特定藥物的生產和貯藏過程中引入的雜質，這類雜質隨藥物的不同而不同。

當前14頁，總共75頁。異煙肼(isoniazid)的合成路線4-甲基吡啶蒸氣、水蒸氣在釩觸媒存在下與空氣中的氧氣作用，氧化為異煙酸；再與水合肼反應，即得。若最后一步反應不完全，產品中可混有游離肼。當前15頁，總共75頁。三、雜質的限量(LimitTest)藥物中所含雜質的最大允許量。通常用百分之幾或百萬分之幾(partspermillion,ppm)雜質限量控制限量檢查對照法靈敏度法比較法定量測定雜質含量注意平行原則當前16頁，總共75頁。注意單位統一！當前17頁，總共75頁。示例一茶苯海明中氯化物檢查取本品0.30g

置200ml量瓶中，加水50ml、氨試液3ml和10%硝酸銨溶液6ml，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱15min，并時時振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，放置15min，濾過，取續濾液25ml置納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，與標準氯化鈉溶液(10μg

Cl-/ml)1.5

ml制成的對照液比較，求氯化物的限量。C=10μg/mlV=1.5mlS=?答案：L（%）=0.04%當前18頁，總共75頁。示例二腎上腺素中酮體的檢查取本品0.2g,置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測定吸光度不得超過0.05，酮體的百分吸收系數為435，求酮體的限量。V=100mlC=A/E=0.05/435=1.15×10-4

g/100ml

S=0.2g答案：L（%）=0.0575%當前19頁，總共75頁。示例三磷酸可待因中嗎啡的檢查取本品0.10g,加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15min，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡試液[取無水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成100ml]5.0ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深。問限量是多少？當前20頁，總共75頁。示例四苯巴比妥鈉中重金屬的檢查取本品2.0g,加水32ml，溶解后緩緩加入1mol/L鹽酸溶液8ml，充分振搖，靜置數分鐘，濾過，取濾液20ml，加酚酞指示液1滴與氨試液恰顯粉紅色，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量成25ml，依法檢查，含重金屬不得超過10ppm。試計算應取得標準鉛溶液(每1ml相當于10μgPb)的體積。當前21頁，總共75頁。第二節雜質的檢查方法雜質的檢查方法化學方法色譜方法光譜方法其他方法顯色反應檢查法、沉淀反應檢查法生成氣體的檢查法、滴定法薄層色譜法、HPLC法GC法、毛細管電泳法UV法、IR、原子吸收分光光度法熱分析法、酸堿度檢查法物理性狀檢查法當前22頁，總共75頁。氯化物檢查法硫酸鹽檢查法鐵鹽檢查法重金屬檢查法砷鹽檢查法干燥失重測定法水分測定法第三節藥物中一般雜質的檢查熾灼殘渣檢查法易炭化物檢查法殘留溶劑測定法溶液顏色檢查法溶液澄清度檢查法當前23頁，總共75頁。一、氯化物檢查法(limittestforchlorides)供試品稀HNO310mlH2OAgNO31ml標準溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml

暗處放置5min(避免AgCl分解)NaCl當前24頁，總共75頁。ToeachoftheNesslercylinderdescribedaboveadd1.0mlofsilvernitrateTS,dilutewithwaterto50mlandmixwell.Allowtostandinthedarkfor5minutes,comparetheopalescenceproducedbyviewingdowntheverticalaxisofthecylindersagainstablackbackground.

加入硝酸目的可避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成而干擾檢查，同時還可加速氯化銀沉淀的生成外產生較好的乳濁。酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。為了避免光線使單質銀析出，在觀察前應在暗處放置5分鐘。當前25頁，總共75頁。二、硫酸鹽檢查法(limittestforsulfates)K2SO4(1)靈敏度。(2)反應需在鹽酸酸性條件下進行。(3)試劑：氯化鋇；標準：硫酸鉀溶液。(4)比濁：同置于黑色背景上，自上向下觀察。測定條件當前26頁，總共75頁。三、鐵鹽檢查法(limittestforiron)1.硫氰酸鐵法

(Ch.P

和USP采用)硫酸鐵銨硫氰酸銨紅色當前27頁，總共75頁。供試品顯色，立即與同法制成的對照溶液比較加水溶解25ml稀HCl

4ml過硫酸銨50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水定容當前28頁，總共75頁。加鹽酸的目的在鹽酸酸性條件下反應，可防止Fe3+的水解。加過硫酸銨的作用加入氧化劑過硫酸銨氧化供試品中Fe2+成Fe3+，同時可防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。當前29頁，總共75頁。2.巰基醋酸法

(BP采用)紅色當前30頁，總共75頁。四、重金屬檢查法(limittestforheavymetals)附錄ⅧH重金屬檢查法本法所指的重金屬系指在規定實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質。如鉛(Pb)、銀(Ag)、汞(Hg)、銅(Cu)、鎘(Cd)、錫(Sn)、銻(Sb)、鉍(Bi)、鈷(Co)、鋅(Zn)、鉬(Mo)等。在藥品生產過程中遇到鉛的機會較多，鉛在體內又易積蓄中毒，故檢查時以鉛為代表。當前31頁，總共75頁。方法使用范圍硫代乙酰胺法溶于水、稀酸和乙醇的藥物熾灼后的硫代乙酰胺法含芳環、雜環以及難溶于水、稀酸和乙醇的藥物硫化鈉法溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物當前32頁，總共75頁。第一法

硫代乙酰胺法(thioacetamide)條件：

介質：醋酸鹽緩沖液

(pH3.5)

2ml

試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)2ml雜質對照液：Pb(NO3)2(10μg/ml)靈敏度范圍：10~20g/27ml黃色至棕黑色混懸液同置白紙，由上向下透視當前33頁，總共75頁。第二法熾灼后的硫代乙酰胺法

緩緩熾灼放冷H2SO40.5-1.0ml供試品炭化

加熱

HNO3500-600℃H2SO4

除盡放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml

中性按第一法檢查

蒸干氨試液注意：做空白試驗

當前34頁，總共75頁。第三法

硫化鈉法當前35頁，總共75頁。五、砷鹽檢查法(limittestforarsenic)砷鹽是有毒的物質，多由藥物生產過程所使用的無機試劑引入。砒霜(As2O3)對照品雄黃（As4S4）、雌黃（As2S3）ChP采用古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法檢查藥物中微量的砷鹽。當前36頁，總共75頁。Ag2S（黑）古法驗砷現代方法白田道夫法古蔡氏法

Ag-DDC法當前37頁，總共75頁。五、砷鹽檢查法

(一)古蔡氏法(Gutzeit)

黃色棕色黑色當前38頁，總共75頁。8cm有孔玻璃旋塞導氣管AsH3發生瓶溴化汞試紙醋酸鉛棉花(60mg)HClZn粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液生成砷斑吸收硫化氫氣體當前39頁，總共75頁。a.KI的作用還原劑：As5+→As3+反應速度慢反應速度快b.酸性SnCl2的作用還原劑①As5+→As3+當前40頁，總共75頁。②將KI氧化生成的I2→I-穩定的絡離子進而促進AsH3不斷生成③與Zn粒表面形成Zn-Sn齊SnCl2起去極化作用,使氫氣均勻而連續地發生當前41頁，總共75頁。白田道夫法—含銻藥物棕褐色膠態砷加入少量HgCl2,靈敏度可提高至2g/10ml。當前42頁，總共75頁。注意事項砷斑不穩定，應干燥、避光、立即比較。有機結合態的砷應破壞后檢查（加酸或堿），但溫度應低于600C。供試品若為鐵鹽，能消耗碘化鉀和氯化亞錫，可加酸性氯化亞錫，使高鐵離子還原后檢查。供試品（硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽）若在酸性條件下生成硫化氫或二氧化硫，與溴化汞試紙作用生成黑色硫化汞和金屬汞，可先用硝酸處理，使其氧化為硫酸鹽。銻鹽含量較多時，可改用白田道夫（Bettendorff）法檢查砷當前43頁，總共75頁。(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法[Ag(DDC)法]

紅色膠態銀目視比色法510nm測定A值當前44頁，總共75頁。線性范圍：1～10μg/40ml含銻藥物不干擾測定用于砷鹽的限量檢查和微量砷鹽的含量測定當前45頁，總共75頁。(三)次磷酸法

棕色用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物的砷鹽檢查，不產生干擾。靈敏度較古蔡法低。當前46頁，總共75頁。六、干燥失重測定法(DeterminationofLossonDrying)干燥失重：藥品在規定的條件下，經干燥后所減失的量。用于檢查藥物中的水分及其他揮發性物質。恒重：供試品連續兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下。（干燥至恒重的第二次及以后每次稱重都應在規定的條件下繼續干燥1h后進行）常壓恒溫干燥法減壓干燥器恒溫減壓干燥器當前47頁，總共75頁。七、水分測定法(DeterminationofWater)第一法（費休氏法）A.容量滴定法B.庫侖滴定法以卡爾-費休氏法（Karl-Fischer）反應為基礎，應用永停滴定法測定水份。滴定劑碘不是從滴定管加入，而是由含有碘離子的陽極電解液電解產生。

第二法（甲苯法）當前48頁，總共75頁。八、熾灼殘渣檢查法

(DeterminationofResidueonignition)系指有機藥物經炭化或揮發性無機藥物加熱分解后，高溫熾灼所產生的非揮發性無機雜質的硫酸鹽。0.1%～0.2%1～2mg當前49頁，總共75頁。九、殘留溶劑測定法(DeterminationoforganicSolventResidue)殘留溶劑：在合成原料藥，輔料或制劑生產的過程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機溶劑。中國藥典采用GC法測定溶劑殘留當前50頁，總共75頁。色譜系統與系統適用性試驗(SystemSuitabilityTests;SSTs)以直徑為的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80-170℃；并符合下列條件：⑴用待測物的色譜峰計算的N應大于1000；⑵內標物與待測物的兩個色譜峰的R≥1.5；⑶每個標準溶液進樣5次，所得待測物與內標物峰面積之比的RSD≤5%；若以外標法測定，所得待測物峰面積的RSD≤10%當前51頁，總共75頁。進行有機溶劑限度測定時，根據殘留溶劑的限度規定來確定對照品溶液的濃度；進行定量測定時，應根據供試品中實際殘留溶劑的實際殘留量確定對照品溶液的濃度。對照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對應的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過2倍為宜。當前52頁，總共75頁。頂空技術（headspacetechnology）頂空分析是一種樣品預處理技術,它是通過樣品基質上方的氣體成分來測定這些組分在原樣品中的含量。具有簡便、快捷、靈敏度高等優點。當前53頁，總共75頁。AgilentG1888頂空進樣器

當前54頁，總共75頁。當前55頁，總共75頁。靜態頂空1.注射器2.密封隔墊3.螺帽4.容器5.樣品6.恒溫浴7.溫度計當前56頁，總共75頁。動態頂空（吹掃-捕集）當前57頁，總共75頁。第四節特殊雜質的檢查方法增修訂項目2005年版2010年版紅外光譜鑒別原料530580制劑073有關物質HPLC方法142707殘留溶劑2497當前58頁，總共75頁。一、色譜分析法(一)TLC法比移值一般要求：顆粒直徑10~40μm薄層涂布：無粘合劑含粘合劑：常加入10~15%

煅石膏(CaSO4·2H2O,180℃烘4h)或0.5~0.7%羧甲基纖維素鈉水溶液當前59頁，總共75頁。①雜質對照品法

適用于已知雜質并能夠得到雜質對照品的情況②供試品溶液的自身稀釋法對照法適用于雜質的結構不能確定或無雜質對照品的情況。本法雖不及①法理想，但其優點是不需要制備雜質的對照品，還可配成幾種限量的對照溶液，比較簡單易行，所以應用較多。采用本法時應注意供試品與所檢雜質對顯色劑所顯的顏色應相同，顯色靈敏度也應相同或相近。測定法當前60頁，總共75頁。供試品10μl

N-甲基哌嗪10μl

50mg/ml

50μg/ml

枸櫞酸乙胺嗪I2蒸氣顯色對照品法當前61頁，總共75頁。1.樣品高濃度2.樣品低濃度（對照溶液）自身對照法當前62頁，總共75頁。③雜質對照品法與供試品溶液自身稀釋法對照法并用

有對照品用①，無對照品或未知雜質用②法④對照藥物法無合適的雜質對照品，或者是供試品顯示的雜質斑點顏色和主成分顏色有差異，難以判斷限量。當前63頁，總共75頁。對照藥物法1.樣品高濃度2.樣品低濃度3.對照藥物（濃度同1）當前64頁，總共75頁。(二)HPLC法當前65頁，總共75頁。內標法：用于有雜質對照品時能夠測定雜質的校正因子雜質的。含量測定。可避免因樣品前處理及進樣體積誤差對測定結果的影響。外標法(Externalstandardmethod)：用于有雜質對照品或雜質對照品易制備的情況。加校正因子的主成分自身對照法：用于有雜質對照品時，雜質的含量測定。不加校正因子的主成分自身對照法：用于沒有雜質對照品的情況。峰面積歸一化法：粗略測量供試品中雜質的含量。

當前66頁，總共75頁。內標法（internalstandardmethod）內標法：使用內標法可以抵消儀器穩定性差，進樣量不夠準確等原因帶來的定量分析誤差。如果在樣品預處理前加入內標物，則可抵消方法全過程引起的誤差。校正因子（Correctionfactor）：等量的不同物質在相同的實驗條件下