digeneHC2HPV檢測臨床應用及其優勢介紹WH市場部HybridCapture?2（HC2）--雜交捕獲二代利用基因雜交、化學發光、信號放大的原理在分子水平同時檢測被WHO確認的13種高危型-HPV病毒DNA96test/kit(88病人標本/盒）HC2HPV檢測流程：樣本收集：樣本類型及采樣注意事項樣本處理過程檢測步驟HC2HPV檢測

采樣器用于HPV檢測的最常見的樣本

是:

Thehc2DNACollectionDevice采樣器?采集的STM標本TheThinPrep?樣本(Hologic)新鮮宮頸活檢標本（截面為2-5mm的宮頸活檢組織）HC2HPV檢測宮頸取樣插入宮頸口1-1.5cm，直到刷子最外圈接觸到外宮頸逆時針方向,旋轉三圈,停留十秒將刷子底部放到轉移管中，在劃線處折斷桿子，將整個刷子留在轉移管中HC2HPV檢測宮頸取樣標本保存HPV標本的保存

1、室溫下：保存2周

2、2-8℃：再保存1周

3、-20℃：保存3個月或更長

標本保存注意事項使用專用的DIGENEHPV采樣器（含試劑，可抑制細菌生長，保持DNA完整性）

注：切勿將小刷子扔掉，以保留足量標本采樣前三天內不要陰道內用藥或沖洗，避免經期采樣采樣前不要進行醋酸/碘液涂抹開蓋、折斷小刷子時勿大力震蕩試管，以免試劑濺出影響檢測或標本濺出造成污染少量血液不影響檢測結果在試管壁上標明患者名稱和年齡蓋緊瓶蓋HC2HPV檢測流程：樣本收集：樣本類型及采樣注意事項樣本處理過程檢測步驟不同類型的樣本

hc2DNACollectionDevice采樣器TheThinPrep細胞保存液細胞溶解:只保留DNA保留細胞不同類型的樣本處理Thinprep樣本在進行hc2檢測前進行轉換樣本轉換試劑盒CCUPreservCyt（即Thinprep樣本）的轉換流程Step1Step2Step3Step4Step5搖動/漩渦混合10sec.取出4mL加入400uL轉換緩沖液加蓋和漩渦混合離心15min取出上清液Step10Step9Step8Step7Step6取出殘余液態150uL變性液加蓋漩渦混合30sec65°水浴15min.漩渦混合15-30sec.在水浴30min.漩渦混合5sec.去蓋，取75uL加入微孔板用Digene自己的采樣標本，可直接進行檢測!

Step1Step2Step3500uL混有指示劑的變性劑加入樣本加蓋和漩渦混合(MST)65°水浴45min.漩渦混合5secHC2HPV檢測流程：樣本收集：樣本類型及采樣注意事項樣本處理過程檢測步驟HC2技術的檢測步驟DenaturespecimenHybridizewithRNAprobeCapture

anddetecthybridsLuminescenceHc2檢測方法分為簡單的5部變性溶解細胞，釋放DNA單鏈雜交全長病毒RNA探針與病毒靶DNA結合捕獲DNA:RNA復合物被包被在微孔板上的抗體捕獲

一抗特異性結合DNA:RNA復合物

雜交檢測用二抗結合捕獲后的復合物二抗偶聯有堿性磷酸酶發光信號產生 加入堿性磷酸酶的底物

產生化學發光信號HC2HPV檢測步驟-----簡單的5步

Step1:變性溶解細胞，解鏈和變性核酸,釋放HPVDNA單鏈Step2:雜交全長病毒RNA探針與HPV病毒靶DNA結合，形成RNA:DNA復合物Step3:捕獲RNA:DNA復合物被包被在微孔板上的抗體捕獲一抗特異性結RNA:DNA復合物