DNA指紋技術在親子鑒定中的應用關鍵詞DNA指紋技術親子鑒定一、 親子鑒定的概述親子鑒定指的是應用生物學、醫學、遺傳學等方法對人類的遺傳標記的監測分析來判定不同個體之間的是否有血緣關系，在三國時期的“滴血認親”中，血液相溶者則為親就表明了親子鑒定的存在，盡管這種方法在古代存在了很久，但卻無明顯的科學依據證明。隨著科學的發展進步，親子鑒定也從“滴血認親”發展成為了現代的分子生物學檢測，現代的親子鑒定技術，它包含了遺傳學、群體遺傳學、分子遺傳學、分子生物學、生物化學、統計學和計算機等多門學科，從最初通過ABO血型進行鑒定到現在的線粒體測序等方法進行檢測，方法不斷的得到完善并且結果有很好的科學依據證明也越發準確。目前，對于以下情況需要進行親子鑒定，比如抱養認親、繼承財產公證、移民需要、出生證明信息不全等原因導致上戶口需要鑒定、計生委對孩子是否超生等問題進行確認、男方懷疑孩子不是自己親生、強奸導致女方懷孕對嫌疑人進行指控甚至是對尸體身份的確定，親子鑒定的結果對鑒定者具有很大的意義和作用，因此親子鑒定的工作需要嚴肅認真的對待。二、 DNA指紋技術的發展及原理世界上每一個個體都存在其唯一的特征，指紋就是其中的一個，兩個不同的人具有相同的指紋的概率微乎其微，而一個人的一生他的指紋不會改變，因此，他成為了每個人特有的標志，隨著分子生物學的發展，我們開始從分子細胞角度進行指紋的識別，DNA指紋技術就能夠很好地解決這個問題。上世紀七十年代，遺傳標志主要是生物的外觀表現型、生理缺陷型等，而后，生物個體的DNA具有差異性的問題被提出和研究，因為人體的遺傳信息都在DNA上，而不同個體的差異本質上就是DNA分子的不同，因此，DNA成為了每個個體的可靠遺傳標志。在1980年，Wyman和White兩位科學家首先發現了人們DNA分子的標志一一限制性酶切片段長度的多態性，它不但不受顯隱性關系的影像還不受環境和發育階段所受的影響，但是它過多的依賴與內切酶的的選擇，但由于方法的復雜，條件要求較高因此未得到大范圍的使用；1982年發現了在高度多態性的區域內串聯了重復的短序列單位，而重復數目的不同決定了個體的差異；在1985年，在肌紅蛋白基因的內含子的高度變區的重復序列核心做探針下，未經過嚴格的洗脫，對人基因組DNA的電泳圖譜進行了Southern印跡雜交，得到的不同個體的圖譜均有明顯的差異，與人的指紋類似，具有高度的特異性，且依然遵循孟德爾遺傳規律，因此將所產生的圖譜稱為DNA指紋圖譜，它的高度特異性，體現了物種遺傳的多態性，成為了一種先進的遺傳標記系統，之后，該技術的運用越來越廣泛。在中國，楊建廠等科學家在1979年時利用了聚合酶鏈反應技術建立了新的DNA指紋檢測系統一一引物PCR人DNA指紋檢測技術，并開發研究了相關軟件應用于人的識別、遺傳素質與疾病的關系等研究。DNA指紋技術的探針大多數為化學法合成或生物提取后再擴增出來的高水平探針，包括bacteriophageMB、PGB725等。DNA指紋技術的原理為在生物中提取DNA后進行PCR擴增出完整的或者高可變位點的基因組DNA，然后酶切成DNA片段，進行瓊脂糖凝膠電泳按照分子量大小而分離，將其轉移至尼龍濾膜上，通過DNA探針與具有互補堿基序列的片段雜交，顯影后得到DNA指紋圖譜。DNA指紋技術因DNA序列個別位點堿基發生突變，引起其中某個限制性內切酶的識別位點獲得或者丟失，因而表現出不同長度的酶切片段，因此它具有高度特異性、多位點性以及較穩定的遺傳性的特點。三、DNA指紋技術的方法步驟DNA指紋技術是在以限制性酶切片段長度的多態性為基礎的方法技術，包括了以下幾個步驟：（1）從被檢測的樣品當中提取出染色體DNA，裂解有核細胞的細胞膜和核膜，釋放染色體DNA，去除蛋白質后沉淀得到純的DNA；（2）用限制性內切酶將提取出的DNA分子酶切成大小不等的DNA片段；（3）用瓊脂糖凝膠電泳法將酶切后的DNA片段電泳分離，在堿性溶液的環境下DNA分子由雙鏈解旋為單鏈，使用為“Southern”印跡法將單鏈DNA片段轉移至尼龍濾膜或者硝化纖維膜；（4）將DNA在膜上固定好，用進行過放射性標記后的已知序列的DNA探針與DNA片段進行雜交，通過同位素磷酸可以在DNA片段和探針之間堿基配對；（5）將雜交后的產物放入放射自顯影暗盒中，保持暗盒在-70€暗奈露？?4d，放射線可以將配對的堿基對在暗盒中的某線片子上形成圖像，此時的圖像就是長度不等的DNA片段的顯影，即是DNA指紋圖譜。如果樣品中的DNA含量太少，可以將提取出的DNA分子進行PCR擴增，之后再進行之后的步驟。DNA指紋具有高度特異性，它的圖譜譜帶包含了豐富的多態量，并遵循孟德爾遺傳定律，可以共顯性地穩定遺傳給后代，因此DNA指紋技術被廣泛的用于親子鑒定當中。DNA指紋技術開辟了分子生物檢驗的新領域，使得親子鑒定和個體識別都達到了同一認定水平，采用DNA指紋技術作親子鑒定得到的結果更加直觀且具有準確性，例如在有父母不在的情況下，通過與其親屬的鑒定也可以確立親緣關系；強奸致孕案中，DNA指紋可以確定或否定胎兒的生物學父親，成為判刑的證據；用胚胎組織進行DNA指紋親子鑒定，提取出的DNA可以長期保存用來復查。總之，DNA指紋能夠很好地解決繼承權糾紛、強奸致孕、醫院抱錯嬰兒、婚外生育等問題。隨著分子生物學的發展，DNA序列的多態性成為了分子生物學的研究熱點問題，DNA指紋技術也將在更多的領域中得到推廣使用，但是盡管DNA指紋技術具有較大的實用價值，在生物醫學、藥學、法學等諸多領域均有重要的作用，它依然存在著一定的問題，比如，DNA指紋的圖譜中譜帶過多，并且各個譜帶強弱不等，對于是否為等位基因不易判斷；對于DNA指紋與特定組織性狀之間是否存在連鎖關系尚未弄明白，而連鎖圖譜的制作還需要大量的工作；特異性探針也并未完全被掌握，所以DNA指紋雖前景廣闊但是實際的應用價值仍讓具有局限性。五、 親子鑒定的倫理學問題DNA指紋技術進行親子鑒定作為新型的技術，它在增強了人們知情權的同時也帶了諸多倫理問題，它涉及了父母與孩子，并反映了男方的知情權、相關經濟利益、女方的隱私權、孩子的尊嚴和利益以及家庭婚姻的穩定性，甚至是嫌疑犯的直接證據，不但是對身體的傷害、信任的危機，也有對道德的沖擊，因此在倫理道德方面必須得到足夠的重視。對于有關親子鑒定的完善，應該保護女性的合法權益，是孩子的利