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文檔簡介
骨髓細胞微核實驗骨髓細胞微核實驗1微核試驗是用于染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物的快速檢測方法。微核(Micronucleus,MCN)是指細胞中主核之外的顆粒,染色與細胞核一致,相當于細胞直徑的1/20-1/5,呈圓形或杏仁狀。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。實驗原理微核試驗是用于染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物的快速檢2機理:1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中結論:
微核試驗能檢測化學或其他物質因素誘導產(chǎn)生的染色體完整性改變和染色體分離改變這兩種遺傳學終點實驗原理機理:實驗原理3無核細胞紅細胞有核細胞中微核難與正常核分葉及核突出物區(qū)別微核實驗無核細胞紅細胞有核細胞中微4紅細胞的分化成熟過程紅細胞的分化成熟過程5骨髓細胞微核實驗課件6小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成7在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色如PCE/NCE<0.沖洗:蒸餾水沖洗,晾干固定:甲醇固定10min,需要晾干;具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。如PCE/NCE<0.本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中8環(huán)磷酰胺(CTX)最常用的烷化劑類抗腫瘤藥。在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤89結果示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中一個微核示小鼠骨髓正常嗜多染紅細胞9結果示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中一個微核示小鼠骨髓正常嗜多染910示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核10示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核1011示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核11示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核11Giemsa染色PCE胞質內(nèi)含有核糖體,染色呈灰藍色;MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。NCEPCE&MCNGiemsa染色PCE胞質內(nèi)含有核糖體,染色呈灰藍色;MCN12實驗目的用化療藥(環(huán)磷酰胺)制備突變模型觀察小鼠骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核實驗目的用化療藥(環(huán)磷酰胺)制備突變模型13【Animal】小鼠是微核試驗的常規(guī)動物,通常用7~12周齡,體重18~20g的小鼠。【Reagents】小牛血清Giemsa染液環(huán)磷酰胺實驗動物及試劑【Animal】實驗動物及試劑14實驗分組和染毒方法環(huán)磷酰胺40mg/kg
模型組等體積溶劑對照組染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材實驗分組和染毒方法環(huán)磷酰胺40mg/kg模型組等體積溶劑對15處死:小鼠頸椎脫臼處死;取股骨:防止出血;取骨髓:小牛血清1滴推片:30度角;晾干:一定要干;固定:甲醇固定10min,需要晾干;染色:Gimesa染液染色(10~15min)沖洗:蒸餾水沖洗,晾干閱片:觀察微核。
染毒后操作步驟處死:小鼠頸椎脫臼處死;取股骨:防止出血;取骨髓:小牛血清116推片方法推片方法17觀察與計數(shù):低倍鏡下選擇分布均勻,染色較好的區(qū)域油鏡下觀察計數(shù)多染紅細胞(PCE)呈灰藍色,正染紅細胞(NCE)呈橘黃色。典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。計數(shù)1000個PCE中含微核的PCE數(shù),并且計數(shù)200個細胞中PCE與NCE的比值。微核率(‰)=含微核PCE細胞數(shù)PCE細胞總數(shù)×1000實驗方法和步驟觀察與計數(shù):低倍鏡下選擇分布均勻,染色較好的區(qū)域微核率(‰)18實驗結果組別動物數(shù)受檢PCE總數(shù)含微核PCE數(shù)微核率陰性對照組模型組實驗結果組別動物數(shù)受檢PCE總數(shù)含微核PCE數(shù)微核率陰性對照19結果分析與評價本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.PCE/NCE為評價細胞毒性的指標:正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.6~1.2);如PCE/NCE<0.1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;如PCE/NCE<0.05,則表示受試化學毒物的劑量過大,試驗結果不可靠。結果分析與評價本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示20ThankYou!ThankYou!環(huán)磷酰胺是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。如PCE/NCE<0.染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中固定:甲醇固定10min,需要晾干;2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中沖洗:蒸餾水沖洗,晾干MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。如PCE/NCE<0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.環(huán)磷酰胺40mg/kg固定:甲醇固定10min,需要晾干;如PCE/NCE<0.如PCE/NCE<0.染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中環(huán)磷酰胺40mg/kg1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成【Reagents】小牛血清ThankYou!NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。如PCE/NCE<0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。ThankYou!典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中環(huán)磷酰胺40mg/kg染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材如PCE/NCE<0.在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。如PCE/NCE<0.2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。固定:甲醇固定10min,需要晾干;如PCE/NCE<0.小鼠是微核試驗的常規(guī)動物,通常用7~12周齡,體重18~20g的小鼠。NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.計數(shù)1000個PCE中含微核的PCE數(shù),并且計數(shù)200個細胞中PCE與NCE的比值。如PCE/NCE<0.油鏡下觀察計數(shù)本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.如PCE/NCE<0.在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;沖洗:蒸餾水沖洗,晾干在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色觀察與計數(shù):低倍鏡下選擇分布均勻,染色較好的區(qū)域環(huán)磷酰胺40mg/kg在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。如PCE/NCE<0.用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。油鏡下觀察計數(shù)2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。環(huán)磷酰胺1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。固定:甲醇固定10min,需要晾干;微核(Micronucleus,MCN)是指細胞中主核之外的顆粒,染色與細胞核一致,相當于細胞直徑的1/20-1/5,呈圓形或杏仁狀。謝謝觀看!環(huán)磷酰胺正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.示小鼠骨骨髓細胞微核實驗骨髓細胞微核實驗23微核試驗是用于染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物的快速檢測方法。微核(Micronucleus,MCN)是指細胞中主核之外的顆粒,染色與細胞核一致,相當于細胞直徑的1/20-1/5,呈圓形或杏仁狀。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。實驗原理微核試驗是用于染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物的快速檢24機理:1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中結論:
微核試驗能檢測化學或其他物質因素誘導產(chǎn)生的染色體完整性改變和染色體分離改變這兩種遺傳學終點實驗原理機理:實驗原理25無核細胞紅細胞有核細胞中微核難與正常核分葉及核突出物區(qū)別微核實驗無核細胞紅細胞有核細胞中微26紅細胞的分化成熟過程紅細胞的分化成熟過程27骨髓細胞微核實驗課件28小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成29在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色如PCE/NCE<0.沖洗:蒸餾水沖洗,晾干固定:甲醇固定10min,需要晾干;具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。如PCE/NCE<0.本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中30環(huán)磷酰胺(CTX)最常用的烷化劑類抗腫瘤藥。在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤3031結果示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中一個微核示小鼠骨髓正常嗜多染紅細胞9結果示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中一個微核示小鼠骨髓正常嗜多染3132示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核10示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核3233示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核11示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中多個微核33Giemsa染色PCE胞質內(nèi)含有核糖體,染色呈灰藍色;MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。NCEPCE&MCNGiemsa染色PCE胞質內(nèi)含有核糖體,染色呈灰藍色;MCN34實驗目的用化療藥(環(huán)磷酰胺)制備突變模型觀察小鼠骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核實驗目的用化療藥(環(huán)磷酰胺)制備突變模型35【Animal】小鼠是微核試驗的常規(guī)動物,通常用7~12周齡,體重18~20g的小鼠。【Reagents】小牛血清Giemsa染液環(huán)磷酰胺實驗動物及試劑【Animal】實驗動物及試劑36實驗分組和染毒方法環(huán)磷酰胺40mg/kg
模型組等體積溶劑對照組染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材實驗分組和染毒方法環(huán)磷酰胺40mg/kg模型組等體積溶劑對37處死:小鼠頸椎脫臼處死;取股骨:防止出血;取骨髓:小牛血清1滴推片:30度角;晾干:一定要干;固定:甲醇固定10min,需要晾干;染色:Gimesa染液染色(10~15min)沖洗:蒸餾水沖洗,晾干閱片:觀察微核。
染毒后操作步驟處死:小鼠頸椎脫臼處死;取股骨:防止出血;取骨髓:小牛血清138推片方法推片方法39觀察與計數(shù):低倍鏡下選擇分布均勻,染色較好的區(qū)域油鏡下觀察計數(shù)多染紅細胞(PCE)呈灰藍色,正染紅細胞(NCE)呈橘黃色。典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。計數(shù)1000個PCE中含微核的PCE數(shù),并且計數(shù)200個細胞中PCE與NCE的比值。微核率(‰)=含微核PCE細胞數(shù)PCE細胞總數(shù)×1000實驗方法和步驟觀察與計數(shù):低倍鏡下選擇分布均勻,染色較好的區(qū)域微核率(‰)40實驗結果組別動物數(shù)受檢PCE總數(shù)含微核PCE數(shù)微核率陰性對照組模型組實驗結果組別動物數(shù)受檢PCE總數(shù)含微核PCE數(shù)微核率陰性對照41結果分析與評價本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示.PCE/NCE為評價細胞毒性的指標:正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.6~1.2);如PCE/NCE<0.1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;如PCE/NCE<0.05,則表示受試化學毒物的劑量過大,試驗結果不可靠。結果分析與評價本試驗中只計數(shù)PCE中微核,微核率以千分率表示42ThankYou!ThankYou!環(huán)磷酰胺是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。如PCE/NCE<0.染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中固定:甲醇固定10min,需要晾干;2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中沖洗:蒸餾水沖洗,晾干MCN多數(shù)為圓形,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。如PCE/NCE<0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.環(huán)磷酰胺40mg/kg固定:甲醇固定10min,需要晾干;如PCE/NCE<0.如PCE/NCE<0.染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中環(huán)磷酰胺40mg/kg1,則表示PCE形成受到嚴重抑制;是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核的形成【Reagents】小牛血清ThankYou!NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。具有顯著的遺傳、生殖毒性:停經(jīng)或精子缺乏,妊娠初期時給予可致畸胎。示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。是細胞內(nèi)染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂時滯留在細胞核外的遺傳物質。如PCE/NCE<0.正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.用藥后24-30小時,骨髓中微核形成達峰。ThankYou!典型的微核多為單個、圓形、邊緣光滑整齊,嗜色性與核質一致,呈紫紅色或藍紫色。正常PCE/NCE比值約為l(正常范圍為0.示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核示小鼠骨髓嗜多染紅細胞中兩個微核1有絲分裂毒物的作用使個別染色體或帶著絲點的染色體環(huán)和斷片在細胞分裂后期被滯留在細胞質中環(huán)磷酰胺40mg/kg染毒方法(30h兩次給藥法):兩次給受試物間隔24h,第二次給藥后6h取材如PCE/NCE<0.在體外無抗腫瘤活性,進入體內(nèi)經(jīng)轉化、分解,生成酰胺氮芥對腫瘤細胞有細胞毒作用。如PCE/NCE<0.2斷片或無著絲點染色體在細胞分裂后期不能定向移動,從而遺留在細胞質中副作用明顯,有惡心、食欲減退、脫發(fā)、白細胞減少、中毒性膀胱炎、肝功能損傷等。固定:甲醇固定10min,需要晾干;如PCE/NCE<0.小鼠是微核試驗的常規(guī)動物,通常用7~12周齡,體重18~20g的小鼠。NCE的核糖體已消失,被染成淡桔紅色。示
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