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文檔簡介

實驗6a-淀粉酶的固定化及1．制作固定化α-淀粉酶。2．進行淀粉水解的測定。基本要求：發展要求：通過此實驗探討固定化酶的應用價值。1、酶制劑的概念和種類（一）酶制劑含有酶的制品①定義：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶②種類：A、液體酶制劑治療某些胃病的胃蛋白酶液B、固體酶制劑

1、通常對強酸、強堿、高溫和有機溶劑等條件非常敏感，容易失活；

2、溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產成本；

3、反應后會混在產物中，可能影響產品質量。(難分離）3、酶制劑的缺點1、固定化酶技術。即將酶固定在一定空間內的技術（如固定在不溶于水的載體上）。2、固定化酶技術的優點：（1）使酶既能與反應物接觸，又能與產物分離；酶不溶解在催化反應的溶液中，產物更易純化（2）固定在載體上的酶可以被反復利用。可較長時間地貯存和使用。（二）固定化酶固定化酶：就是將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。介質本身不溶于水。固定化的方法：吸附法、交聯法、包埋法、共價偶連法等3.固定化酶方法吸附法酶蛋白分子吸附在載體交聯法交聯法是指通過雙功能試劑，將酶和酶聯結成網狀結構的方法。結合部位也不是酶的活性中心，也不是維持其空間結構的必需基團。實驗原理：本實驗是用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測試，流出物呈紅色表明水解產物糊精生成淀粉α-淀粉酶糊精β淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麥芽糖這里使用的是枯草桿菌的α-淀粉酶，其作用的最適溫度為50~75℃；最適PH為5.5~7.5遇碘顯藍色遇碘顯紅色遇碘不顯色（三）實驗固定化裝置反應柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器步驟:1.將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,觀察顏色。用水稀釋1倍后再觀察顏色。反應柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器淀粉實驗結果12341、2mL水+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉濾液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉濾液+1~2滴KI-I2溶液+稀釋1倍2.實驗后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4℃冰箱中,幾天后再重復上述實驗,看是否有相同的結果.課后練習1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒有淀粉酶?2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液，保溫幾分鐘后用碘液檢驗。如

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