1、第 第7頁 共 7 頁第二十八章 移植免疫及其免疫檢測第一節 引起排斥反映的靶抗原第二節 排斥反映的種類及發生機制第三節HLA 分型第四節 常見的組織或器官移植第五節 排斥反映的預防與治療第六節 排斥反映的免疫監測移植是指將健康細胞、組織或器官從其原部位移植到自體或異體的一定部位、用以替代或填補機體所喪失的結構和（或）功能的現代醫療手段。被移植的細胞、組織或器官稱移植物，提供移植物的個體稱為供體，接受移植物的個體稱為受體或宿主。第一節引起排斥反映的靶抗原由主要組織相容性復合體編碼的人類白細胞抗原移植時發生排斥反映的主要成分，這種代表個體特異性的同種抗原又稱組織相容性抗原或移植抗原。一、主要組織

2、相容性抗原在進行同種異體移植時，引起移植排斥反映最強烈的同種抗原當屬HLA。在三類HLAHLA-R其次為、HLA-QHLA-P，HLA-CHLAHLAHVGR）；子參與移植物抗宿主反映。二、其他組織相容性抗原（一）次要組織相容性抗原不管 mHA 并且非主要組織相容性抗原，但在某些組織或器官移植時同樣發揮重要作用，特別是骨髓移植。（二）ABO 血型抗原系統ABO在進行器官移植時，應力求供、受體間ABO（三）組織特異性抗原組織特異性抗原，是一類特異性地表達于各種器官、組織、細胞上的抗原系統。第二節排斥反映的種類及發生機制移植排斥反映是針關于移植抗原產生免疫應答，從而導致移植物功能喪失或受者機體損害

3、的進程。根據排斥反映發生的時間、免疫損傷機制和組織病理改變等，排斥反映可分為超急性、急性和慢性排斥反映。一、超急性排斥反映超急性排斥反映，是在移植物與受者血液循環恢復后的數分鐘至12 天內發生的不可逆轉的體液排斥反映。常見于ABO或缺血時間過長等情況時。超急性排斥反映發生迅速、反映強烈、不可逆轉。二、急性排斥反映1.急性體液性排斥反映主要由內皮細胞表面HLA致移植組織或器官的血管炎。2.急性細胞性排斥反映又稱加速性細胞排斥反映。發生此類排斥反映患者的血液中，可以有抗供者的抗體，但并且不一定引起有效的脈管排斥反映。急性細胞性排斥反映的病理特征以移植組織或器官實質性損傷為主，伴有淋巴細胞和巨噬細胞

4、浸潤。三、慢性排斥反映慢性排斥反映一般發生于移植后數月甚至數年，病程進展緩慢。血管壁細胞浸潤、間質纖維化和瘢痕形成是此類排斥反映的病理特點，時有血管硬化性改變。纖維化的形成與在遲發型超敏反映中活化的巨噬細胞分泌的IL-1，以及血小板和內皮細胞產生的血小板源性生長因子（PGF）等有關。引起慢性排斥反映的因素囊括：T 細胞、巨噬細胞等介導的遲發型超敏反映等免疫損傷；B 細胞產生的抗體活化補體或經過ACC 損壞血管內皮細胞；急性排斥反映反復發作所導致的移植物組織退行性變，此與細胞和體液免疫均有關系；非免疫相關因素，諸如局部缺血、再灌注損傷、微生物感染等。四、移植物抗宿主反映上述三類皆屬于受體關于供體

5、的排斥反映，即宿主抗移植物反映HVGR）。在骨髓移植時，由于移植的（GVHR）。GVHR 也可見于脾、胸腺和小腸移植。第三節 HLA 分型一、血清學分型法血清學分型法，是應用一系列已知抗HLA 的特異性標準分型血清與待測淋巴細胞混合，借助補體的生物學作用介導細胞裂解的細胞毒試驗。因分型血清和淋巴細胞用量少，稱為補體依賴的微量細胞毒試驗。能夠應用該法檢測的抗原稱為SHLA-AHLA-B、。血清學分型法操作簡便易行、節約試劑、結果可靠、反復性好、無須特殊設備。其缺陷是需花費大量時間去篩選抗血清，且不同批號抗血清結果常有不同。一切應用HLAHLA用最為廣泛的傳統方法。二、細胞學分型法（一）單向MLC

6、根據選用的刺激細胞類型，可將單向MLC 分為陽性和陰性分型法。1.陰性分型法 又稱純合子細胞分型法。2.陽性分型法 陽性分型法又稱預致敏淋巴細胞分型法（PLT）。HLA- 抗原可用陰性和陽性分型法檢測，HLA-P 抗原只用陽性分型法檢測。（二）雙向MLCHLA胞增殖，故稱雙向。本法不能判斷型別，只能說明供、受體HLA 抗原配合程度，雙向MLC 強度與兩個體間HLA 抗原差異成正比，器官或細胞移植時，應選擇MLC 最弱者為供體。三、分子生物學分型法（一）RFLP 與 PCR-RFLP 分型法限制性片段長度多態性分析，是最早建立的研究HLANAHLA法稱為NA-RFLP。若關于NA析的敏感度大大增

7、加，此類引入NAPCR-RFLPPCR-RFLPPCRHLA移植供者的選擇。（二）PCR-SSO 分型法PCR型別判斷。PCR-SSOHLAHLA-R、HLA-P基因。PCR-SSOHLA和自動化，尤其在HLA（三）PCRSSP 分型法該方法應用設計的一套HLA關于待測NAPCRHLA（四）PCR-SSCP 分型法（PCR-SSCPCRNA的HLA（五）SBT 分型法鑒于序列的HLA 分型法（SBT），可經過關于擴增后的HLA 基因片段進行的核酸序列測定判斷HLA 型別。第四節常見的組織或器官移植一、腎臟移植腎臟移植是臨床開展最早、應用最多和效果最佳的一種器官移植。（一）組織配型在腎臟移植中的

8、應用ABOHLA在臨床實際工作中，供腎的選擇應遵循以下原則：ABOABOHLAO O而用ABOABO選擇最佳HLA 配型的供者器官。由于復雜的HLA 抗原系統，難以選擇到完全匹配的腎臟。（二）腎移植受者的療效檢測腎移植中，急性、超急性排斥反映和慢性排斥反映均可出現。同時，因免疫克制劑的應用，導致病毒等細胞內寄生的微生物感染，也將影響移植物的存活和受者的健康。腎移植的療效監測，主要依賴于受者免疫狀態的檢測。臨床觀測的項目囊括：TIL-2CsARIAHPLCCsA二、肝臟移植肝臟移植手術已經成為治療原發性膽道閉鎖、原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、肝炎后肝18三、心臟移植與心肺聯合移植心肺聯

9、合移植已成為人們可以接受的治療終末期心肺疾病的一種有效方法。（一）組織配型在心臟和心肺聯合移植中的應用ABOHLA抗體檢測。（二）移植受者的療效檢測TBTCTL、KACC的作用也在引起人們的關切。四、骨髓與其他來源的干細胞移植（一）骨髓移植骨髓移植是移植中獨具特性的移植類型和GVHR。此類移植可被應用于造血系統疾病和原發性免疫缺陷病的治療。根據被移植骨髓的來源，骨髓移植分為自體骨髓移植、同基因骨髓移植、同種異基因骨髓移植三種類型。為了提高移植的成功率，應進行HLA、紅細胞血型配型。關于配型不理想者，可經過適當減少供體骨髓中的TGVHR發生。患者造血功能的恢復可看成是移植成功。（二）外周血和臍血

10、干細胞移植髓移植同樣的治療目的。與骨髓移植相比，具有采集方便、供者不需麻醉、移植后造血恢復快GVHR率和嚴重程度不高等優點。AB0GVHR（三）適于骨髓或末梢血干細胞移植的常見疾病第五節排斥反映的預防與治療一、組織配型（一）HLA 配型HLA-BHLA-RMLCHLA-子是否匹配，是關系到移植物能否長期存活更有用的指標。（二）HLA 交叉配型與預存抗體的檢測移植前如果受者血清中預先存在抗供者淋巴細胞的抗體HLA（三）群體反映性抗體的檢測國際上，應用群體反映性抗體（PRA）水平，判斷器官移植時受體的敏感程度。二、移植物與受體的預處理（一）移植物的預處理不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同

11、。（二）受體的準備在受者契合相應器官移植適應證的前提下，除了進行必要的組織配型或交叉配型外，關于于接受器官移受者往往必需在移植前接受大劑量免疫克制劑或放療。三、免疫克制措施器官移植成功的最大障礙是排斥反映。移植術后，人工調節受者機體的免疫狀態是控制排斥反映發生的主要途徑。目前采取的措施有：使用免疫克制劑，控制受者的免疫應答，降低關于移植物的排斥能力；誘導受者關于移植抗原的特異性免疫耐受。（一）免疫克制劑的應用由于參與移植排斥反映的免疫細胞以TT者有：化學性免疫克制劑常用的免疫克制劑有：環孢素（環孢菌素、環孢霉素NA 合成，干擾T、GVHR。此外也克制抗體生成，但關于TB與之聯合應用。環磷酰胺

12、：主要作用于細胞分裂周期的G2 期，分裂速度快的B 細胞比T 細胞關于其更為敏感。他克莫司（Tacrolimus）：又名 FK506,商品名為普樂可復（Prograf）,他克莫司的免疫克制作用機TT比環孢素強10100麥考酚嗎乙酯）：是2090BNA 和RNAT、B生物性免疫克制劑臨床上已使用的生物性免疫克制劑及其作用機制：抗淋巴細胞球蛋白ALG）或抗胸腺細胞球蛋白（ATG）。細胞性單克隆抗體：只針關于單一種細胞發揮作用，其作用越發特異。C45IL-2R 陽性TIL-2B7C28CTLA4-Ig酸，可阻斷相應細胞因子、黏附分子和細胞分化抗原的表達。（二）關于移植抗原特異性免疫耐受誘導想的排斥反

13、映防治措施。目前，仍限于研究階段，尚未應用于臨床。第六節排斥反映的免疫監測一、體液免疫與細胞免疫水平檢測的臨床意義（一）體液免疫水平檢測的臨床意義HLA的細胞毒性試驗等。、C3bC3（二）細胞免疫水平檢測的臨床意義細胞免疫水平的測定，囊括參與細胞免疫的有關細胞數量、功能和細胞因子水平的檢測。不同檢測指標關于檢測移植排斥反映的發生、判斷排斥反映的類型等均具有一定的臨床意義。外周血T免疫熒光法或流式細胞儀測定T，T和C4C8CC81.21.08T4TNK血清細胞因子測定骨髓移植中發生的GVHR4.黏附分子及其配體的檢測免疫細胞以及血管內皮細胞等細胞膜表面黏附分子及其配體的表達，與急性排斥反映的發生密切相關。諸如ELAM-1、VCAM、ICAM 和HLA 分子等。二、尿微量蛋白檢測的臨床意義在臨床移植領域，尿微量蛋白的檢測，一方面有助于判斷大器官移植，尤其是腎臟移植時排斥反映的發生；另一方面，也可作為免疫克制藥物肝腎毒副作用的觀察指標。三、急性時相反映物質檢